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国家质检总局科技计划项目(2010IK0015)
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牛疙瘩皮肤病病毒ORF132基因的克隆及其原核表达
被引量:1
2012年
为原核表达牛疙瘩皮肤病病毒(LDSV)ORF132并对该基因进行生物信息学分析,本研究采用PCR扩增LSDV的ORF132基因,将其亚克隆至pGEX-6p-1载体中,构建重组质粒pGEX-LSDV-ORF132。生物信息学分析表明,LSDV的ORF132与Neethling vaccine LW1959株LW132、NI-2490株LSDV132和NW-LW株LD132的相应推导氨基酸同源性分别为100%、100%和94.4%,与山羊痘病毒、绵羊痘病毒相应推导氨基酸的同源性为20.7%~36%。SDS-PAGE和western blot分析表明,pGEX-LSDV-ORF132在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导主要以包涵体形式存在,其重组蛋白大小约为48.95 ku,并且与特异性抗体具有抗原反应活性。
周雪梅
聂福平
王昱
肖进文
聂奎
李应国
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原核表达
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