广东省自然科学基金(S2012040008037)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 相关作者：刘伟闻真珍刘运权何春梅林首恒更多>>
- 相关机构：华南农业大学中国科学院华南植物园更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 利用SSH分离TDZ诱导金钗石斛成花相关基因被引量：2
- 2013年
- 以金钗石斛(Dendrobium nobile Lindl.)腋芽为材料,利用抑制消减杂交(SSH)技术构建了TDZ处理后金钗石斛腋芽的正向和反向SSH文库。通过PCR和反向Northern杂交验证后,得到的正向文库的314个阳性克隆和反向文库的59个克隆测序后经过聚类,最终得到39条受TDZ正向调控的EST序列,以及21条受其反向调控的EST序列。对其中某些差异基因进行半定量RT-PCR,结果显示这些基因的表达受TDZ的影响。利用Blastn和Blastx进行比对分析,其中20个没有同源序列,属于未知功能基因。其余序列的同源基因编码的产物参与包括光合作用、合成代谢、转录调控等多种生物学过程。在反向文库中分离到1个MADS-box基因的同源序列和1个Sos同源基因,而正向文库中存在多个反转录转座子,这些结果表明TDZ可以影响开花过程中的某些转录因子和信号基因的表达,进而促进金钗石斛开花。
- 闻真珍张娥刘运权刘伟
- 关键词：金钗石斛开花细胞分裂素反转录转座子
- 细胞分裂素对金钗石斛开花及其VRN1-like基因表达的影响被引量：3
- 2013年
- 以金钗石斛类原球茎为材料,通过同源克隆分离其VRN1-like同源基因,利用半定量RT-PCR分析细胞分裂素20 mg/L的噻重氮苯基脲(Thidiazuron)对该基因在腋芽和类原球茎中表达的影响.结果表明,喷施TDZ可以代替低温处理诱导金钗石斛开花;金钗石斛VRN1-like基因DnVRNA的cDNA编码的蛋白与高羊茅(Festuca arundinacea)和小麦(Triticum monococcum)中VRN1蛋白的氨基酸序列一致性分别为63%和62%.DnVRNA在腋芽中的表达受TDZ的促进,而在类原球茎中,其表达也受到细胞分裂素和低温的诱导,暗示该基因可能参与细胞分裂素替代低温诱导金钗石斛成花的生物学过程.
- 闻真珍刘运权林首恒林茵刘伟
- 关键词：金钗石斛细胞分裂素开花
- 农杆菌介导的DnMADS2基因转化金钗石斛初步研究被引量：3
- 2013年
- 为建立稳定有效的金钗石斛转化体系,进一步研究花发育相关基因的功能,为石斛兰分子育种提供基础,本研究以金钗石斛类原球茎(PLBs)为转化受体,通过农杆菌介导的方法将DnMADS2基因转入金钗石斛。结果表明:用20 mg/L潮霉素筛选4个月后获得抗性PLBs,对其进行HPT基因和DnMADS2基因的PCR检测表明,目的基因已成功整合到PLBs中。获得的转化PLBs在抗性培养基上分化为不定芽后,再经生根壮苗培养获得转化植株。对转化植株进行Southern检测,结果表明,DnMADS2基因已整合到5株金钗石斛转化植株基因组中。据此建立的稳定高效的金钗石斛转化体系和获得的转基因植株,将为DnMADS2基因功能的进一步研究和金钗石斛转基因育种奠定基础。
- 闻真珍何春梅刘运权刘伟
- 关键词：金钗石斛MADS-BOX
