付晓蕊
- 作品数：9 被引量：9H指数：2
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学文化科学语言文字更多>>
- 结核分枝杆菌体外休眠模型的建立被引量：1
- 2016年
- 目的:模拟结核分枝杆菌体内缺氧和微营养的生长环境建立其休眠模型。方法:将牛分枝杆菌卡介苗野生株BCG菌株在"微需氧+pH5.0+10%Dubos"的条件下培养,以菌株生长停滞,菌体表面脂质体增厚为休眠标准进行鉴定。取不同时间菌株测定600 nm下的吸光度(A)值绘制生长曲线,同时进行金胺O-尼罗红(Auramin-O,Nile Red)双荧光染色和实时荧光定量PCR(Quantitative Realtime-PCR,qRT-PCR)检测休眠相关基因的表达量,确定菌株进入休眠状态。结果:在休眠条件培养过程中,BCG菌株的生长速度与常规条件培养菌株相比明显减慢(P<0.01),并且在休眠条件培养中第10、14和18天细菌生长基本接近停滞状态(P<0.01);同时金胺O荧光染色显示绿色荧光减弱,尼罗红红色荧光增强;休眠相关基因hspX、devR表达量逐渐上调,且培养第18天菌株明显高于第0天培养菌株(P<0.05)。结论:应用"微需氧+p H5.0+10%Dubos"条件培养,以金胺O-尼罗红染色和devR表达为标准,可以成功建立结核分枝杆菌休眠模型。
- 付晓蕊郑青周磊旦正尖措苏明权郝晓柯马越云
- 关键词：休眠金胺O
- 二代测序技术在血流感染病原体检测中的应用
- 周磊李金洁贺文芳付晓蕊徐修礼郝晓柯
- 休眠结核分枝杆菌的毒力研究
- 目的：阐明结核分枝杆菌休眠的对其毒力因子表达的影响.方法：将牛分枝杆菌卡介苗BCG野生株进行体外多重压力培养建立其休眠模型，在600nm下测定其吸光度绘制生长曲线，并通过金胺-O、尼罗红双荧光染色验证;然后分别利用RT-...
- 付晓蕊
- 关键词：卡介苗休眠毒力因子HBHA
- 结核分枝杆菌休眠的研究进展
- 结核分枝杆菌休眠是指结核菌受到外界不适宜环境刺激后而呈现出低水平代谢和复制停滞的生存状态，存在复苏和活化的可能性，是结核病迁延不愈耐药发生的根源之一。寻求结核分枝杆菌新的药物靶点和候选药物的筛选验证，以便于更好的早期诊断...
- 付晓蕊
- 关键词：结核分枝杆菌巨噬细胞
- devR基因调控的结核分枝杆菌细胞毒性的研究
- 2015年
- 目的阐明devR基因表达对分枝杆菌生长及感染能力的影响。方法确认野生型牛分支杆菌卡介苗（M.bovis BCG,简称BCG）、devR基因敲除的BCG菌株（简称ΔdevR）和devR基因回补的BCG菌株（简称devR.com）的devR序列正确;在不同时间点测定600 nm下的吸光度（A）值,绘制3种细菌的生长曲线;以感染复数（MOI）=10感染人肺泡Ⅱ型上皮细胞A549（简称A549细胞）和小鼠巨噬细胞Raw264.7（简称Raw264.7细胞）,分别采用流式细胞仪和酶联免疫吸附试验于0、24、48、72 h测定细胞凋亡率和乳酸脱氢酶（LDH）释放水平;采用实时定量PCR（RT-PCR）测定凋亡相关基因bcl-2和bad的表达水平。结果ΔdevR菌株在早期（培养2-10 d）生长较BCG菌株和devR.com菌株明显加快（P〈0.01）。ΔdevR菌株感染A549细胞和Raw264.7细胞后,细胞的凋亡和坏死效应明显增加,与BCG菌株和devR.com菌株比较差异有统计学意义（P〈0.05）。3种菌株感染A549细胞均导致凋亡相关基因bcl-2表达上调,且ΔdevR菌株感染组bcl-2基因表达明显高于BCG和devR.com菌株感染组;3种菌株感染Raw264.7细胞均导致凋亡相关基因bad表达上调,且ΔdevR菌株感染组bad基因表达明显高于BCG和devR.com菌株感染组。结论 devR基因敲除的BCG菌株毒力明显增强。
- 旦正尖措马越云周磊付晓蕊苏明权郝晓柯
- 关键词：卡介苗凋亡乳酸脱氢酶
- CREB及p-CREB在前列腺癌细胞增殖中的作用被引量：6
- 2016年
- 目的:探讨环磷腺苷效应元件结合蛋白(c AMP-response element binding protein,CREB)及磷酸化CREB(p-CREB)在前列腺癌细胞增殖中的作用。方法:采用组织芯片技术检测人正常前列腺、前列腺增生、不同分级前列腺癌组织中CREB及p-CREB的表达水平;免疫荧光及Western blotting检测人正常前列腺基质永生化细胞WPMY-1、前列腺癌细胞PC3及LNCap中CREB及p-CREB的表达水平;构建重组人源CREB质粒,并转染PC3及LNCap细胞,Western blotting及CCK-8试剂盒检测转染效率及细胞增殖水平的变化。结果:CREB及p-CREB在前列腺癌组织中表达率明显高于正常前列腺(96%vs 50%,88%vs 40%,P<0.05)和前列腺增生组织(96%vs 80%,88%vs 60%,P<0.05);CREB及p-CREB蛋白水平在前列腺癌PC3及LNCap细胞中表达量显著高于正常前列腺基质永生化细胞WPMY-1[PC3细胞:(5.10±0.62)vs(2.31±0.40)、(4.31±0.54)vs(2.02±0.38);LNCap细胞:(7.5±0.83)vs(2.31±0.40)、(6.15±0.69)vs(2.02±0.38),均P<0.05)];转染重组质粒CREB可上调前列腺癌细胞PC3及LNCap中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达(均P<0.05),且转染后的PC3及LNCap细胞增殖水平明显增加(P<0.05)。结论:CREB及p-CREB在前列腺癌组织、体外培养前列腺癌细胞PC3及LNCap中高表达,并可上调PC3及LNCap中增殖相关基因PCNA的表达,提高细胞增殖水平。
- 唐海斌马越云苏明权李蕊常亮高萌付晓蕊杨玉琪郝晓柯
- 关键词：前列腺癌增殖
- 二代测序技术在血流感染病原体检测中的应用
- 周磊李金洁贺文芳付晓蕊徐修礼郝晓柯
- 金胺O染色法检测结核分枝杆菌的方法及注意事项
- 目的：探讨结核分枝杆菌金胺O染色法，为临床提供快速准确的诊断信息。方法：根据染料化学性质、菌体生长特性等特点进行了多次反复试验，细化金胺O染色的操作过程。结果：金胺O染色方法染色的标本，菌体形态和结构清晰，显色良好。结论...
- 付晓蕊
- 关键词：结核分枝杆菌BCG金胺O抗酸染色
- 免疫血清的制备及效价测定在临床免疫学检验实验教学中的应用被引量：2
- 2013年
- 高效价、高特异度的免疫血清是免疫学实验室必不可少的生物制剂,是高等医学院校学生免疫学实验的重要内容[1]。而目前,在各大医学院校的医学实验课中学生更多应用的是市售的商品诊断试剂,虽然方便简单,但是学生对免疫血清的制备、效价的鉴定及制备的注意事项以及实验结果偏移与试剂的关系了解甚少,同时极大地增加了实验费用。
- 李慧玲邬剑李克田付晓蕊黄春雨石琳申亚男李宁
- 关键词：临床免疫学检验免疫血清实验教学效价测定高等医学院校
