谢芳靖
- 作品数：36 被引量：161H指数：6
- 供职机构：集美大学水产学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划福建省高等学校新世纪优秀人才支持计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学更多>>
- 大黄鱼抗病功能基因的克隆与分析
- 对大黄鱼腹腔注射副溶血弧菌(实验组)或0.9％氯化钠溶液(对照组)，在注射4h、1d、2d、4d、8d、12d和16d后尾部取血，测定其血清中一氧化氮合酶、溶菌酶和酪氨酸酶活力的变化情况。结果表明，注射副溶血弧菌后大黄鱼...
- 谢芳靖
- 关键词：大黄鱼副溶血弧菌基因克隆溶菌酶酪氨酸酶
- 文献传递
- 影响远海梭子蟹精子顶体反应的原因初探
- 本文比较研究了不同因子对远海梭子蟹精子的顶体反应产生的影响。结果表明:不同机械力配制的精子悬浮液中震荡对精子顶体反应的影响最小,其顶体反应率为3.31%,研磨离心的顶体反应率最高,为9.44%。保存液中的Ca离子是影响精...
- 陈锦民王艺磊谢芳靖林鹏冯建军
- 关键词：远海梭子蟹精子顶体反应
- 文献传递
- 大黄鱼雌核发育二倍体诱导方法
- 大黄鱼雌核发育二倍体诱导方法，涉及一种雌核发育方法，尤其是涉及一种大黄鱼雌核发育二倍体诱导方法。提供一种大黄鱼雌核发育二倍体的诱导方法。取大黄鱼精液经稀释液稀释后用紫外线照射，使精子的遗传失活。在海水中混合大黄鱼成熟卵子...
- 王志勇谢芳靖刘家富
- 文献传递
- 大黄鱼ubc9基因的克隆和组织表达被引量：6
- 2009年
- 类泛素化(sumoylation)是一种重要的转录后修饰过程。激活的SUMO(small ubiquitin-related modifer)和E2结合酶结合稳定后共价结合到底物上,从而完成对底物的类泛素化。UBC9(ubiquitin-conjugating enzyme)作为惟一的E2结合酶,在完成类泛素化中起着重要作用。从已构建的大黄鱼性腺线性化cDNA文库中筛选出ubc9同源片段,用SMART-RACE方法克隆得到了846bp的全长cDNA序列。该序列编码一个由158个氨基酸组成的蛋白。该蛋白序列与已知的UBC9高度同源,含UBC保守结构域和UBC9激活位点区域。实时定量PCR分析ubc9基因在各组织器官的表达,结果发现,ubc9基因在大黄鱼的性腺中大量表达。推测UBC9在大黄鱼性腺发育中起重要的生物学作用。
- 周鹏张子平王艺磊谢芳靖邹志华
- 关键词：RT-PCR大黄鱼
- 引物退火控制技术在差异表达基因克隆中的应用被引量：12
- 2007年
- 许多年以来，分离差异表达基因的方法仅限于差异筛选cDNA文库，直到1992年Liang等发明了一种检测基因转录模式的方法，即mRNA差异显示技术（mRNA Differential Display Reverse Transcription PCR，DDRT-PCR），第一次实现了同时陕速灵敏地检测到真核细胞中大部分的差异表达转录体的目的。
- 谢芳靖张子平林鹏王艺磊
- 关键词：差异表达基因基因克隆控制技术MRNA差异显示技术DISPLAY引物
- 3个花鳗鲡地理种群的AFLP分析被引量：2
- 2011年
- 应用AFLP分子标记技术首次对澳大利亚、海南岛和菲律宾3个种群的共60尾花鳗鲡(Anguilla marmorata)幼鱼样品进行了遗传多样性分析。4对选择性扩增引物共扩增得到180个位点,平均每对引物扩增出45个位点。澳大利亚、海南岛和菲律宾3个种群的多态位点分别为78.33%、79.44%和84.44%,Nei′s遗传多样性指数分别为0.330 2±0.188 9、0.337 2±0.194 6和0.357 1±0.176 7,Shannon′s多样性指数分别为0.477 3±0.264 7、0.484 4±0.270 2和0.514 6±0.243 3;根据基因分化系数和AMOVA分析估算,3个花鳗鲡种群遗传变异分别有89.25%和96.07%存在于种群内,10.75%和3.93%存在于种群间。基因分化系数、AMOVA分析、遗传距离、基因流、系统树和显性基因型频率分析结果表明:3个花鳗鲡种群间出现了遗传分化,地理距离越大遗传分化程度越高,三者之间出现一定的基因交流。研究结果对花鳗鲡养殖具有指导意义。
- 朱友芳林凤钦王艺磊谢芳靖
- 关键词：种群AFLP
- 大黄鱼cyclin B1和cdc2 cDNA序列特征及组织表达分析被引量：6
- 2014年
- 成熟促进因子（MPF）是诱导细胞从G2期转入M期的关键因子，在配子成熟过程中具有重要作用．MPF由周期蛋白B（cyelin13，CB）和周期蛋白依赖性蛋白激酶（cDKl，由cdc2基因编码）2个亚基组成．本研究克隆了大黄鱼（Larim-ichthyscrocea）cyclinB1（Lc-cbl）和cdc2（Lc-cdc2）基因的eDNA序列，并分析了这2个基因mRNA的组织表达特征．为解析MPF在大黄鱼性腺发育和配子成熟的作用机理奠定基础．Lc-cbl基因全长cDNA1882bp，可编码397个氨基酸的蛋白；Lc-cdc2基因全长eDNA序列1151bp，可编码303个氨基酸的蛋白．基于Lc-cblcDNA序列推导的氨基酸序列与6种脊椎动物的CBl氨基酸序列有较高相似性（67％～84％），并具有周期蛋白盒、毁坏盒、以及蛋白酶K位点（RRxSK）等CB预期特征．基于Lc-cdc2的eDNA序列推导的氨基酸序列也与其他6种鱼类的CDKl氨酸酸序列有较高相似性（88％～97％），并具有丝氨酸／苏氨酸激酶催化结构域、ATP结合相关的保守序列（GxGxxGxV）、周期蛋白结合相关的PSTAIRE序列等CDKl的预期特征．可见，本研究克隆获得的2条序列是Lc-cbl和Lc-cdc2eDNA全长．实时荧光定量PCR结果显示，Lc-cbl和Lc-cdc2的2个基因mRNA表达具有相似的组织特异性，在性腺中tuRNA水平均远远高于其他组织，表明Lc-c6J和Lc-cdc2是大黄鱼性腺发育相关的重要基因．
- 蔡明夷周鹏韩坤煌谢芳靖张子平王艺磊
- 关键词：大黄鱼周期蛋白CDNA全长组织表达谱
- 不同倍性大黄鱼核仁数目银染观察被引量：2
- 2009年
- 用银染法对不同倍性(单倍体、正常二倍体、正常三倍体、雌核发育二倍体、雌核发育鱼子代三倍体)大黄鱼胚胎、仔鱼或成鱼的不同组织进行细胞核仁数目观察计数。结果表明,大黄鱼各种倍性个体细胞核仁数目与染色体倍性之间有良好的对应关系,且核仁数随个体倍性的增加而增加;非诱导雌核发育的大黄鱼细胞核仁众数与染色体组数相等(二倍体为2,三倍体为3),而人工诱导雌核发育大黄鱼及其子代细胞核仁众数却比其相同倍性的非雌核发育鱼少1(雌核发育二倍体为1,雌核发育三倍体为2)。雌核发育鱼核仁数减少是一个非常有趣的现象,值得进一步研究。大黄鱼不同发育阶段(胚胎、仔鱼、成鱼)以及同一个体不同组织(鳃、肾、鳍)的细胞核仁数目(众数)相同。因此,借助核仁银染法可以快速、可靠、简便地进行染色体倍性鉴定。而雌核发育鱼核仁数减少的机理值得进一步研究。
- 翁朝红王志勇蔡明夷谢芳靖陈希李益云
- 关键词：大黄鱼染色体倍性银染
- 利用引物退火控制技术克隆日本囊对虾性腺差异表达基因被引量：2
- 2011年
- 为了解日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)性腺发育及分化的分子机制,本研究采用改良的引物退火控制技术克隆到了共8个精巢、卵巢的差异表达基因.其中4个为已知基因,分别为凝血酶敏感蛋白基因、皮质棒蛋白基因、增殖细胞核抗原基因和泛素缀合酶基因;4个为未知基因,分别命名为MjACP3-T、MjACP4-T、MjACP15-T和MjACP4-O基因.采用实时定量PCR方法分析了4个未知基因在性腺发育过程的表达谱,结果表明:MjACP3-T、MjACP4-T和MjACP15-T基因在日本囊对虾精巢和卵巢中的表达量有显著差异,且在各个时期精巢的表达量均高于卵巢,说明这3个基因可能在精巢的发育中起到某些重要作用.卵巢MjACP4-O基因的表达量变化较大,第5期卵巢的相对表达量达到最高(为1.38),而其他各个阶段的变化较大,在第4期卵巢的相对表达量最低(为0.03).在精巢中,MjACP4-O基因的表达量随着精巢逐渐发育成熟呈下降趋势.定量PCR结果与引物退火控制技术的结果有着很好的一致性.研究结果表明,引物退火控制技术是一种简单高效的克隆差异表达基因的技术.采用该技术所克隆到的8个精巢、卵巢的差异表达基因,为进一步了解日本囊对虾性腺发育分化的分子机制提供了基础材料.
- 贾锡伟沈冰玲张子平王艺磊谢芳靖
- 关键词：海洋生物学日本囊对虾性腺差异表达基因
- 日本囊对虾性腺蛋白质双向电泳的样品制备方法的改进被引量：5
- 2011年
- 采用一种能同时提取RNA、DNA和Protein的试剂(RDP试剂)进行日本囊对虾性腺总蛋白质的制备,并通过双向电泳(2-DE)技术与传统的裂解液法比较提取效果.RDP法所得2-DE图谱清晰,条纹少,蛋白质点数多,而裂解液法存在横向和纵向拖尾,其碱性端蛋白质点大量缺失,说明RDP法能有效去除蛋白质样品中盐离子、脂类等干扰成分.结果不仅为后续的日本囊对虾性腺蛋白质组学研究提供了技术保障,也为其他甲壳类动物性腺总蛋白质的提取提供了借鉴.
- 岳亮王艺磊张子平冯建军邹志华谢芳靖林鹏
- 关键词：双向电泳日本囊对虾
