谭琴
- 作品数：25 被引量：45H指数：4
- 供职机构：深圳市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目深圳市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- DEHP对大鼠睾丸组织病理损害和超微结构的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)对雄性大鼠睾丸的病理损害和超微结构的影响。方法 5周龄雄性SD大鼠40只,随机分为对照组、DEHP低剂量组、DEHP中剂量组、DEHP高剂量组,每组10只,每天灌胃1次,每周5次,连续灌胃6周。于末次染毒24 h后处死动物,称量大鼠体重及睾丸湿重,并计算睾丸系数;苏木精-伊红染色(HE染色)后进行光镜和电镜检查。结果与对照组相比,DEHP中剂量组及高剂量组睾丸重量、睾丸脏器系数明显降低;病理检查发现,DEHP中剂量组及高剂量组睾丸支持细胞形成大量空泡,睾丸间质细胞异常增生,生精细胞严重脱落;电镜检查发现,DEHP中剂量组及高剂量组睾丸内线粒体断脊、脱颗粒,精细胞内的线粒体鞘异常,精原细胞内大量空泡。结论 DEHP可引起大鼠睾丸明显病理损害和超微机构改变,产生雄性生殖毒性。
- 秦逍云谭琴徐新云张倩马佺杨细飞
- 关键词：邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯睾丸超微结构生殖毒性
- DEHP对雄性大鼠激素相关基因表达水平的影响研究
- 目的:探讨邻苯二甲酸二(2--乙基己基)(DEHP)酯对雄性大鼠激素相关基因表达水平的影响.
方法:40只5周龄雄性SPF级SD大鼠,随机分为对照组(玉米油)、DEHP低剂量组(100mg/kg)、DEHP中剂...
- 徐新云秦逍云谭琴
- 关键词：邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯生殖毒性
- 邻苯二甲酸酯类的生殖毒性及其环境内分泌干扰作用
- 本文首先介绍了邻苯二甲酸酯类塑化剂的理化特性，其次介绍了塑化剂的来源与接触机会，然后介绍了塑化剂在人体的吸收、分布、代谢与排泄，分析了急性、慢性塑化剂的一般毒性，重点分析了雄性、雌性、胚胎生殖毒性，介绍了致突变作用、致癌...
- 吴德生秦逍云谭琴
- 关键词：生殖毒性食品检测
- CYP3A4沉默细胞株建立及其对三氯乙烯毒性的影响被引量：1
- 2014年
- 目的构建CYP3A4基因沉默载体,转染L02肝细胞,建立CYP3A4沉默细胞株并观察其对三氯乙烯毒性的影响。方法根据GenBank提供的CYP3A4基因mRNA序列设计合成shRNA,将shRNA连接到pLKO.1-puro中,将已经构建的慢病毒载体对293FT细胞进行转染,收集病毒上清,感染正常L02肝细胞。用嘌呤霉素进行筛选得到CYP3A4沉默细胞株,通过荧光定量PCR和Western blot对细胞株进行鉴定。用不同剂量三氯乙烯对正常L02肝细胞和CYP3A4沉默细胞进行染毒12h,观察凋亡基因(Bcl-2、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9)和癌基因(c-fos、c-myc、K-ras、p53)表达变化。结果测序证明插入pLKO.1-puro载体的干扰序列与设计的序列一致,荧光定量PCR检测CYP3A4沉默细胞CYP3A4基因表达比正常L02肝细胞下降77.3%,Western blot实验显示CYP3A4沉默细胞CYP3A4蛋白表达水平比正常L02肝细胞下降84.6%。CYP3A4沉默细胞经三氯乙烯染毒后Bcl-2表达水平显著高于L02细胞的表达水平;Caspase-3表达水平无明显改变;Caspase-8仅在TCE高剂量组表达下降;Caspase-9在TCE剂量≥1.0 mmol/L表达水平下降;癌基因c-fos、c-myc、k-ras和p53表达水平都有一定程度下降,部分剂量组存在显著差异(P<0.05或P<0.01)。结论三氯乙烯对正常肝细胞和CYP3A4沉默细胞凋亡基因和癌基因表达存在明显差异,提示CYP3A4是三氯乙烯在体内代谢的重要因素,与三氯乙烯毒性存在一定关系。
- 徐新云毛侃琅袁建辉毛吉炎吴德生黄海燕谢杏秦逍云谭琴
- 关键词：肝细胞CYP3A4慢病毒载体三氯乙烯
- 邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯对雄性大鼠激素相关基因表达水平的影响被引量：9
- 2014年
- 目的:探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)对雄性大鼠睾丸中激素相关基因表达水平的影响,为研究DEHP生殖毒性提供科学依据。方法:40只5周龄雄性SPF级SD大鼠,随机分为对照组(玉米油)、DEHP低剂量组(100 mg/kg)、DEHP中剂量组(500mg/kg)和DEHP高剂量组(1 5 00 m g/kg),每组10只,每天灌胃染毒1次,每周5次,连续染毒6周。于末次染毒24 h后处死动物,实时荧光定量PCR法测定睾丸组织内类固醇快速调节蛋白(StAR)、3β-羟基类固醇脱氢酶(3-HSD)、17-羟基类固醇脱氢酶(17-HSD)、促性腺激素释放激素(GnRH)及雌激素受体(ERα、ERβ)的基因表达水平。结果:与对照组比较,、β基因表达水平在DEHP各剂量组均明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.01或P<0.05);17β-HSD基因表达水平在DEHP高剂量组升高(P<0.01),而低剂量组和中剂量组则无明显改变(P>0.05);ERα基因表达在DEHP高剂量组升高(P<0.01);ERβ基因表达在DEHP低剂量组和中剂量组下降(P<0.01),但在DEHP高剂量组升高(P<0.01);GnRH基因表达水平在DEHP中剂量组和高剂量组均显著下降,差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:DEHP染毒可引起雄性大鼠激素相关基因表达水平改变,干扰雄性激素的合成,可能导致生殖障碍。
- 秦逍云谭琴徐新云吴德生黄海燕
- 关键词：促性腺激素释放激素雌激素受体
- 邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯对大鼠卵巢病理和超微结构的影响被引量：3
- 2014年
- 目的:探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)对大鼠卵巢病理和超微结构的影响,评价DEHP对雌性大鼠的生殖毒性作用。方法:SPF级5周龄雌性SD大鼠40只,随机分为对照组(玉米油)、DEHP低剂量组(100 mg/kg)、DEHP中剂量组(500 mg/kg)和DEHP高剂量组(1 500 mg/kg),每组10只,每天灌胃1次,每周5次,连续染毒6周。染毒结束后称量大鼠体质量及卵巢质量,计算卵巢脏器系数;光镜下观察大鼠卵巢病理改变;电镜观察卵巢颗粒细胞超微结构的变化。结果:各染毒组大鼠体质量与对照组比较差异均无统计学意义(P均>0.05),高剂量组卵巢质量和脏器系数较对照组明显增加(<0.01);普通光学显微镜检查发现DEHP处理后卵巢组织卵泡结构受损,电镜观察发现DEHP处理后颗粒细胞线粒体肿胀、线粒体嵴减少、胞浆空泡化、核染色质完全凝聚、出现凋亡小体、细胞变性坏死。结论:DEHP对大鼠卵巢毒性明显,影响卵泡发育,引起颗粒细胞凋亡。
- 谭琴秦逍云徐新云张倩马佺杨细飞吴德生蒋灵芝周丽刘建军黄海燕杨淋清黄新凤黄冠琴
- 关键词：卵巢卵泡颗粒细胞超微结构生殖毒性
- 邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯对大鼠卵巢组织凋亡基因和癌基因表达水平的影响被引量：5
- 2014年
- 目的:探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)对大鼠卵巢组织凋亡基因和癌基因表达水平的影响,为评价DEHP的雌性生殖毒性提供科学依据。方法:用不同剂量DEHP灌胃染毒雌性SD大鼠6周,设对照组(玉米油)、低剂量组(100 mg/kg)、中剂量组(500 mg/kg)、高剂量组(1 500 mg/kg),利用荧光定量PCR技术检测卵巢组织凋亡基因(Bcl-2、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9)和癌基因(c-fos、k-ras)mRNA表达的变化。结果:Bcl-2 mRNA表达水平在DEHP高剂量组显著降低,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.01);Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9 mRNA表达水平随DEHP染毒剂量升高呈上升趋势,与对照组比较显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。c-fos mRNA表达量与对照组间的差异无统计学意义(P>0.05),k-ras mRNA表达量在DEHP中剂量组和高剂量组显著高于对照组(P<0.01)。结论:DEHP可能通过线粒体途径激活Caspase通路诱导卵巢细胞凋亡,进而损害大鼠卵巢功能和生殖内分泌功能。且DEHP可激活原癌基因异常表达,具有一定的潜在致癌风险。
- 谭琴秦逍云徐新云吴德生杨细飞黄海燕周丽黄新凤
- 关键词：生殖毒性凋亡基因癌基因
- CYP2E1基因过表达细胞株的建立及鉴定
- 2014年
- 目的:应用分子克隆技术,构建CYP2E1基因过表达载体,转染L02肝细胞,建立CYP2E1过表达细胞株并进行鉴定,为深入研究环境和职业毒物的毒作用机制提供模型细胞。方法:根据GenBank提供的CYP2E1基因cDNA序列设计引物,PCR扩增该基因并将其克隆到慢病毒过表达载体pLVX-acGFP1-C1中,将已经构建的慢病毒载体对293FT细胞进行转染,收集病毒上清,感染正常L02肝细胞。用嘌呤霉素进行筛选得到转染CYP2E1基因的L02细胞,通过基因测序、荧光定量PCR和Western blot对细胞株进行鉴定。结果:测序证明重组慢病毒过表达载体CYP2E1基因序列与GenBank提供的CYP2E1序列一致,荧光定量PCR检测转染CYP2E1基因的L02细胞比正常肝细胞CYP2E1 mRNA表达提高273倍,Western blot实验显示转染CYP2E1基因的L02细胞CYP2E1蛋白表达水平比正常肝细胞提高3.2倍。结论:成功构建了CYP2E1基因过表达细胞株,可应用于环境毒物和职业毒物的分子机制研究。
- 徐新云毛侃琅周丽吴德生毛吉炎谢杏秦逍云谭琴
- 关键词：CYP2E1基因慢病毒载体过表达
- 邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯对大鼠睾丸和卵巢组织激素相关蛋白表达的影响被引量：6
- 2015年
- 目的：探讨邻苯二甲酸二（2-乙基己）酯（DEHP）对大鼠睾丸和卵巢组织激素相关蛋白表达水平的影响。方法：将80只5周龄SD大鼠,雌雄各半,随机分为对照组（玉米油）、DEHP低剂量组（100 mg/kg）、DEHP中剂量组（500 mg/kg）、DEHP高剂量组（1 500mg/kg）,每组雌雄各10只,每周染毒5 d,每天灌胃染毒1次,连续6周。末次染毒24 h后处死动物,提取睾丸或卵巢组织蛋白,应用Western blot分别检测睾丸组织中3β-羟基类固醇脱氢酶（3β-HSD）、促性腺激素释放激素受体（Gn RHR）、卵泡刺激素受体（FSHR）及卵巢组织中黄体生成素受体（LHR）和Gn RHR的蛋白表达水平。结果：与对照组比较,雄鼠睾丸组织在DEHP 500和1 500 mg/kg剂量时3β-HSD蛋白表达水平均显著升高（P均〈0.01）;Gn RHR蛋白表达水平在1 500 mg/kg剂量组显著下降（P均〈0.01）;FSHR蛋白表达水平在500和1 500 mg/kg组显著下降（P〈0.05或P〈0.01）。雌鼠卵巢组织在DEHP 100 mg/kg剂量组时LHR和Gn RHR蛋白表达水平与对照组比较差异均无统计学意义（P〉0.05）,在DEHP 500和1 500 mg/kg剂量组LHR表达水平比对照组下降25%~35%,Gn RHR下降60%~80%（P〈0.05或P〈0.01）。结论：DEHP染毒可引起大鼠睾丸和卵巢组织激素相关蛋白表达水平的改变,干扰大鼠体内性激素的代谢,推测此作用与DEHP的生殖毒性存在密切关系。
- 徐新云秦逍云谭琴柯跃斌袁建辉吴德生刘威杨晨
- 关键词：促性腺激素释放激素受体卵泡刺激素受体生殖毒性
- 三氯乙烯对CYP2E1基因高表达细胞和正常肝细胞的毒性作用被引量：4
- 2014年
- 目的 应用分子克隆技术建立CYP2E1基因高表达细胞株,观察三氯乙烯（TCE）对CYP2E1基因高表达细胞和正常肝细胞的毒性,探讨CYP2E1基因在TCE毒性中的作用.方法 用不同剂量三氯乙烯（0、0.25、0.5、1.0、2.0和4.0 mmol/L）对CYP2E1高表达细胞和正常人肝细胞（L02细胞）进行染毒12h,观察凋亡基因（Bcl-2、caspase-3、caspase-8、caspase-9）和癌基因（c-fos、c-myc、k-ras、p53）表达变化.结果 TCE染毒引起L02肝细胞和CYP2E1高表达细胞Bcl-2表达水平下降,0.25～2.0 mmol/L TCE剂量时L02肝细胞Bcl-2表达下降50％～60％,但相同剂量组的CYP2E1高表达细胞Bcl-2表达水平明显高于正常肝细胞20％～50％; 0.5～4.0 mmol/L TCE剂量时CYP2E1高表达细胞中凋亡基因caspase-3、caspase-8、caspase-9表达水平比正常肝细胞高30％～600％,差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）.TCE染毒后对L02肝细胞和CYP2E1高表达细胞的癌基因表达水平有明显差异,在0.5 ～4.0 mmol/L TCE染毒时,CYP2E1高表达细胞的c-fos、k-ras和c-myc基因表达水平明显高于L02肝细胞,差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）,升高幅度达25％～120％; CYP2E1高表达细胞的p53表达水平比正常肝细胞表达下降10％～50％,差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）.结论 TCE对正常肝细胞和CYP2E1高表达细胞凋亡基因和癌基因表达存在明显差异,提示CYP2E1是TCE在体内代谢的重要因素,与TCE毒性存在一定关系.
- 徐新云毛侃琅袁建辉吴德生黄海燕秦逍云谭琴
- 关键词：三氯乙烯肝细胞细胞色素P-450
