吴人亮
- 作品数:117 被引量:628H指数:12
- 供职机构:华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金海南省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 原位细胞凋亡TUNEL法的改进及其应用被引量:25
- 2004年
- 目的 :寻找一种能快速、准确检测以石蜡切片、冰冻切片与细胞爬片或涂片等为实验材料的原位细胞凋亡的 TUNEL法。方法 :在原已建立的 TUNEL技术基础上作了如下改进 :1石蜡切片用微波修复技术替代蛋白酶 K的消化作用 ;冰冻切片与细胞爬片或涂片用含 0 .1 % Triton X- 1 0 0和 0 .1 %枸橼酸三钠混合液作穿透处理。 2在滴加反应混合物前 ,切片用 0 .1 %焦碳酸二乙酯 ( DEPC)浸泡 ,抑制内源性核酸内切酶活性。 3在 POD转换剂前 ,切片用 3% H2 O2 -甲醇液阻断内源性过氧化物酶活性 ,并用正常山羊血清封闭非特异结合位点。4苏木素套染细胞核。结果 :改进后的 TUNEL法能特异地显示凋亡细胞为棕黄色 ,其他细胞核为蓝色 ,且对比明显 ,背景浅 ,组织结构完整清晰 ,便于显微照相等特点。结论 :改进后的 TUNEL法是一种快速、准确检测以石蜡切片、冰冻切片与细胞爬片或涂片等为实验材料细胞凋亡的有效方法。
- 袁永辉吴人亮王曦陈多恩
- 关键词:细胞凋亡TUNEL法原位缺口末端标记
- 小鼠原核表达载体pQE30/FGFR-1的构建及表达鉴定
- 2006年
- 目的构建小鼠FGFR-1胞外段基因重组原核表达载体pQE30/FGFR-1,并在大肠杆菌JM109中表达。方法利用RT-PCR技术,从胚肝中扩增出小鼠的FGFR-1胞外段基因的cDNA,用内切酶消化后插入原核表达质粒pQE30中。经琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定后,体外转化大肠杆菌,用RT-PCR和免疫印迹方法鉴定,同时利用Ni-NTA琼脂柱层析法纯化复性重组蛋白。结果琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定证实PCR扩增的cDNA及构建的重组原核表达质粒pQE30-FGFR-1正确,并在大肠杆菌中正确表达。经纯化后,进行SDS-PAGE电泳显示得到1条分子量约40kDa的蛋白质条带。结论成功构建小鼠原核表达载体pQE30/FGFR-1并在大肠杆菌中有效表达,纯化后获得具有活性的重组蛋白质。
- 郑少江郑少萍吴人亮焦嫦亮赵霞姜虹
- 关键词:基因重组原核表达
- 急性播散型组织胞浆菌病临床病理分析(附一例尸检报告)
- 1993年
- 组织胞浆菌病(histoplasmosis,HP)在国内仅见少数散在病例,而新生儿 HP 尚未见报道。我们最近尸检一例新生儿,作了光镜、电镜观察,确诊为急性播散型 HP,并着重对该病临床和病理变化进行了分析。1 病史摘要男婴,因出生反应低下,于出生后13h 入院,孕30+8周,顺急产。入院检查:体温不升,呼吸56次/min,脉搏110次/min,血压9.06/6.27kPa,体重1.
- 漆红张毅吴人亮
- 关键词:组织胞浆菌病病理学
- 细胞凋亡、胀亡和坏死——关于细胞死亡的新认识被引量:35
- 2002年
- 吴人亮李娜萍
- 关键词:细胞胀亡细胞坏死细胞凋亡
- 香烟烟雾提取物对小鼠气管环上皮钙粘附素表达的影响被引量:1
- 2000年
- 体外进行器官培养 ,通过免疫组织化学和原位杂交方法检测香烟烟雾提取物 (CSE)作用 48、 72 h,小鼠气管上皮细胞上皮钙粘附素 (E- cd)表达的变化。结果表明 ,正常对照组 E- cd分布于气管假复层纤毛柱状上皮细胞连接处的胞膜上 ,5 0 % CSE作用后 ,膜上 E- cd表达减少 ,随着作用时间延长 ,胞浆内 E- cd表达明显增加 (P<0 .0 5 ) ,而细胞内 E- cd m RNA含量无明显变化。提示 ,CSE对小鼠气管上皮细胞 E- cd表达的调控在翻译后水平 ,胞膜上 E- cd表达的下调与吸烟所致气道上皮细胞的损伤修复过程相关。
- 王曦吴人亮郝天玲郝春荣陈春莲
- 关键词:器官培养烟雾吸入损伤香烟烟雾提取物小鼠钙粘附素
- 鼻部动脉畸形致频发鼻腔大出血一例
- 2004年
- 王志斌崔永华葛新黄志诚吴人亮胡国栋邓仲端
- 关键词:并发症
- 支架蛋白IQGAP1-细胞黏附和迁移的关键纽带被引量:1
- 2007年
- 支架蛋白IQGAP1发现能与许多重要的细胞活动紧密相关,如黏附和迁移。研究发现在损伤修复、组织发展、肿瘤转移等过程中,IQGAP1的表达和功能有明显改变。同时作为Rho GTPase信号的主要效应因子,IQGAP1能传递细胞外信号至黏附素复合体、细胞骨架以及细胞核。通过上述信号通路,IQ-GAP1协助细胞完成一系列重要生理病理活动。
- 汪永平吴人亮
- 关键词:细胞黏附细胞迁移
- β-连环素及相关蛋白在脂多糖致急性肺损伤小鼠气道上皮的表达被引量:4
- 2007年
- 目的研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)致小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)时β-连环素(-βcate-nin,-βcat)在气道上皮细胞的表达变化及其意义。方法在建立LPS气管注射致小鼠急性肺损伤模型基础上,应用免疫组织化学染色检测-βcat、糖原合成酶激酶3-β(GSK3-β)在气道上皮的表达;应用Western blot检测肺组织内蛋白激酶C(PKC)、GSK3-β、磷酸化GSK3-β(P-GSK3-β)以及-βcat蛋白的表达。结果免疫检测显示,与正常组小鼠相比,LPS致急性肺损伤的小鼠气道上皮中,胞膜上-βcat及胞质内GSK3-β蛋白含量均明显降低(均P<0.05);Western blot检测显示,肺组织内PKC、P-GSK3-β及-βcat蛋白含量均较正常组小鼠明显升高(均P<0.05),而GSK3-β蛋白含量显著下降(P<0.05)。结论由LPS所致的小鼠ALI,一方面引起胞膜上行使连接功能的-βcat含量显著下降;另一方面可能通过PKC激活、GSK3-β磷酸化失活,导致胞质内-βcat含量的增加,使-βcat转入核内并与转录因子结合,启动Wnt途径靶基因转录,从而在气道上皮的损伤修复中发挥重要作用。
- 洪渊智李娜萍吴人亮刘明阁马燕
- 关键词:急性肺损伤Β-连环素WNT信号途径蛋白激酶C糖原合成酶激酶3
- 急性肾功能衰竭的病理学变化
- 1995年
- 急性肾功能衰竭的病理学变化同济医科大学基础医学院吴人亮武汉430030急性肾功能衰竭(acuterenalFailure,ARF)是各种原因引起肾脏泌尿功能在短时间内急剧障碍,以致机体的生化环境发生严重紊乱的病理过程,常伴有少尿、无尿,但有些病人尿量...
- 吴人亮
- 关键词:急性肾功能衰竭少尿ARF尿量病理过程
- 猪气道上皮细胞的快速分离培养被引量:6
- 2005年
- 陈文书郝天玲王曦田丹吴人亮
- 关键词:气道上皮细胞绿色荧光蛋白生物学研究支气管