朱吉
- 作品数:2 被引量:16H指数:2
- 供职机构:江南大学药学院医学系更多>>
- 发文基金:“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 从尿中分离制备人表皮生长因子被引量:2
- 2003年
- 目的探索从人尿中分离制备人表皮生长因子的工艺。方法通过超滤、蛋白质等电点沉淀、离子交换色谱和分子筛柱色谱等 ,从正常男性尿中分离、制备人表皮生长因子。结果从尿液 4 0L中 ,最后得到初步电泳纯 ,具有促细胞增殖活性的人表皮生长因子 2 .36mg。
- 王武康陈屏张亚男朱吉
- 关键词:人表皮生长因子尿液
- 圆弧青霉脂肪酶基因的克隆和表达被引量:14
- 2002年
- 圆弧青霉PG37总RNA甲醛变性电泳呈现真核生物所特有的 2 8SrRNA和 18SrRNA条带 .根据PG37所产碱性脂肪酶 (LipPC)N末端氨基酸残基序列和真核生物mRNA在 3’端具有poly(A)等所提供的生物信息 ,采用RT PCR技术扩增了LipPC成熟肽和 3’非编码区的cDNA片段 ,并将该PCR产物直接克隆至pUCm T载体中 .序列分析表明 ,LipPC含有 2 5 8个氨基酸残基 ,其中保守的五肽序列为Gly His Ser Leu Gly .进一步采用ClonTech公司的SmartTM PCRcDNA文库构建试剂盒 ,扩增、克隆和测定了自转录起始点至编码区的cDNA片段 ,从而完成了LipPC完整cDNA的分析测定 .最后将编码完整脂肪酶蛋白质的cDNA克隆至 pGEX 5X 3表达载体中 ,SDS PAGE检测结果表明 ,大肠杆菌BL2 1所表达的GST LipPC融合蛋白质分子质量约为 5 3ku .
- 邬敏辰朱吉黄伟达孙崇荣
- 关键词:碱性脂肪酶克隆