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李允静: 作品数：38 被引量：37H指数：4; 供职机构：中国农业科学院油料作物研究所更多>>; 发文基金：转基因生物新品种培育专项国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>

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一种Cry1Ab/Ac胶体金快速检测试剂盒: 本实用新型涉及一种Cry1Ab/Ac胶体金快速检测试剂盒，包括试剂盒体(01)；所述试剂盒体(01)的底部设有材料盒(04)，所述材料盒(04)内分别容置有PVC底板盒(05)、若干材料卷(07)和若干试剂瓶(06),所...; 高鸿飞吴刚翟杉杉崔丹丹武玉花李俊李晓飞李允静; 文献传递

基于插入位点基因组序列建立的鉴定大豆转化体MON89788基因型的方法: 本发明公开了一种快速鉴定转基因大豆MON89788单株基因型的方法，涉及转基因育种和转基因标准物质生产领域中转基因大豆MON89788纯合单株(单粒)、杂合单株的快速鉴定技术。根据转基因大豆MON89788外源基因插入位...; 武玉花李俊翟杉杉李允静高鸿飞吴刚

基于便携式生物传感器设备的转基因现场快速分析研究被引量：1: 2021年; 现场快速检验(point of care test,POCT)是实现转基因基层监管必要的技术手段,在转基因成分检测中发挥着重要作用。生物传感器为转基因成分简单、快速和低成本定量分析提供了一个可行的技术方案。目前大量的生物传感器研究还处于方法学研究阶段,研究者需要着重将生物传感器技术与分析设备集成,开发小型化的便携式检测系统,从而满足POCT分析。本文回顾了近年来已开发的基于手持式设备的用于转基因POCT分析的微型生物传感器系统研究进展,提出了未来可用于转基因POCT分析的生物传感器的小型化策略,展望了小型化转基因生物传感器系统的发展趋势、发展前景和面临的挑战。; 崔丹丹翟杉杉文璐珂武玉花李俊李允静李晓飞朱莉高鸿飞吴刚; 关键词：生物传感器转基因生物手持式设备小型化

一种基因编辑位点特异性PCR方法的开发和应用被引量：1: 2021年; 为了对基因组编辑产品进行精准定性和定量检测,以水稻SP1基因的编辑植株为材料,在编辑位点上下游设计通用引物,在编辑位点处设计基因编辑位点特异性TaqMan探针,建立了编辑位点特异性PCR方法。利用该方法可准确鉴定特异基因组编辑产品,检测灵敏度达到5~10拷贝,可在实时荧光PCR(qPCR)和微滴数字PCR(ddPCR)平台上对基因组编辑产品进行定量检测。由于数字PCR的微反应单元可消除野生型DNA对通用引物的竞争性消耗,与qPCR的定量结果相比,ddPCR定量结果具有更高的定量准确性。; 张洪文赵圣博闫晓红李俊翟杉杉肖芳高鸿飞李允静吴刚武玉花; 关键词：身份鉴定

转基因玉米MON87427/zSSIIb二重微滴数字PCR方法建立及应用被引量：6: 2021年; 实施转基因产品定量标识制度需要建立准确可靠的定量检测技术和方法。数字PCR(dPCR)不依赖标准物质,实现对DNA分子的绝对定量,已成功用于转基因含量检测和标准物质定值。为建立可靠的dPCR方法,获得准确测量结果,本研究以耐除草剂玉米MON87427为材料,探索建立二重微滴数字PCR(ddPCR)的策略。以构建的聚合MON87427转化体和5个玉米内标基因的重组质粒pUC57-M为质控样品,将5个不同的玉米内标基因分别与MON87427组合,通过优化退火温度,根据阳性微滴与阴性微滴分辨率、中等信号强度雨滴数量及测量值与理论值的一致性等,确定了二重ddPCR组合为MON87427/zSSIIb,最适退火温度为58.4℃。MON87427/zSSIIb二重ddPCR的动力学范围为10~60000拷贝。对盲样进行定量检测,二重ddPCR的定量结果与荧光定量PCR有良好的可比性,表明MON87427/zSSIIb二重ddPCR可取代qPCR方法进行转基因玉米MON87427的定量检测及标准物质定值。; 肖芳张秀杰李俊王颢潜李允静单露英翟杉杉高鸿飞吴刚武玉花; 关键词：荧光定量PCR

油菜转化体鉴定阳性质粒分子pYCID-1905的研制及应用被引量：1: 2021年; 转基因油菜是我国转基因生物安全监管的重要对象,为了解决检测机构常常面临的标准物质(样品)缺乏困境,统计我国批准进口和正在申请安全证书的11个转基因油菜品种,分析分子特征和相应的检测标准方法,确定每个转基因油菜品种的检测靶标序列。将11个转基因油菜品种的检测靶标序列通过基因合成的方法融合构建到pUC18载体上,研制出阳性质粒分子pYCID-1905,为转基因油菜的转化体鉴定检测提供了通用的阳性对照分子。结果发现,该质粒分子可同时用作国家标准(GB/T)、农业农村部公告、进出口检验检疫标准(SN/Y)和欧盟标准中普通PCR方法和实时荧光PCR方法的阳性对照,可以解决转基因油菜检测中缺乏标准样品的难题。; 翟杉杉李夏莹王颢潜李俊陈子言高鸿飞李允静吴刚张秀杰武玉花; 关键词：转基因油菜实时荧光PCR

转基因大豆CP4-EPSPS蛋白的降解规律研究被引量：1: 2021年; 随着转基因技术发展和应用,转基因外源基因表达蛋白在环境中富集和降解情况成为公众关注的问题,外源蛋白在环境中的检测和监测成为转基因研究和监管的一个方向。本研究利用模拟自然降解和蛋白酶K两种方式,处理转基因大豆种子(5%GTS 40-3-2),采用Western blot、双抗夹心快速检测试纸条和酶联免疫吸附测定(ELISA)等手段检测CP4-EPSPS蛋白降解情况,结果发现在模拟自然降解条件下,CP4-EPSPS蛋白呈现逐渐被降解的趋势,且在17周被彻底降解;蛋白酶K处理大豆匀浆情况下,9小时CP4-EPSPS蛋白被快速降解。该研究探索了CP4-EPSPS蛋白在自然环境下的降解规律,为寻求一种快速、安全、有效降解转基因CP4-EPSPS蛋白研究提供参考。; 李允静万丹凤刘标肖芳李晓飞李晓飞李俊武玉花沈文静李俊朱莉吴刚; 关键词：转基因大豆蛋白质降解

基于数字PCR鉴定纯合型或杂合型MON810的方法: 本发明公开了一种基于数字PCR鉴定纯合型或杂合型MON810的方法，涉及分子生物学及转基因检测技术领域。本方法是：①收集：采用欧盟经过验证的MON810特异性转化事件以及玉米内标准基因hmgA定量检测方法；②数字PCR扩...; 李允静吴刚李晓飞武玉花李飞武; 文献传递

一种阳性质粒分子pBI121-Screening及其应用: 本发明公开了一种阳性质粒分子pBI121?Screening及其应用，涉及转基因安全领域中转基因作物的安全监管和筛查检测技术。pBI121?Screening的碱基序列如SEQ NO.1所示。利用pBI121?Scree...; 吴刚武玉花李俊王宇蕾李晓飞李允静; 文献传递

抗逆大豆IND-ØØ41Ø-5转化体特异性定性PCR检测方法的建立及其标准化: 2024年; 抗逆大豆IND-ØØ41Ø-5已经批准获得我国进口用作加工原料的安全证书,含有外源HaHB4基因和bar标记基因。本研究根据抗逆大豆IND-ØØ41Ø-5转化体5′端和3′端插入位点旁侧序列信息,设计19对引物,结合罗萨里奥农业生物技术学院公司的1对引物,针对20对引物组合利用定性PCR技术进行引物特异性筛选,结果显示5′端的14号引物特异性良好,优化后获得最佳反应体系和反应程序;经测试,该引物特异性好、稳定性高,检出限达0.1%,扩增片段大小248 bp。经8家有资质实验室对本方法的特异性、检出限、重复性和再现性进行验证,各项参数均达到国家标准要求。本研究成功建立了抗逆大豆IND-ØØ41Ø-5转化体定性PCR检测方法,为IND-ØØ41Ø-5转化体在国内的安全监管提供技术支撑。; 肖芳李允静武玉花李俊高鸿飞翟杉杉吴刚梁晋刚; 关键词：转基因

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