王新 作品数:26 被引量:29 H指数:3 供职机构: 南通大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家杰出青年科学基金 南通大学自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
一种荧光融合蛋白嵌合标记斑马鱼初级运动神经元的方法 本发明提供一种荧光融合蛋白嵌合标记斑马鱼初级运动神经元的方法,涉及转基因技术领域,其中荧光融合蛋白嵌合标记斑马鱼初级运动神经元系统的建立方法,包含以下步骤:利用供体质粒p5E‑mnx1、pME‑EGFP‑α‑Tubuli... 巩杰 刘东 钱佩佩 黄自刚 王新Clec14a基因调控斑马鱼胚胎血管发育 被引量:1 2018年 目的:探索Clec14a在斑马鱼胚胎期的表达及其在血管发育过程中的功能,探讨该基因调控血管发育机制。方法:通过胚胎整体原位杂交技术,观察Clec14a基因在斑马鱼胚胎期的表达情况;在转基因斑马鱼系Tg(kdrl:mCherry)和Tg(fli1a:nGFP)中,显微注射吗啉修饰的反义寡核苷酸(morpholinoantisense oligos)下调Clec14a基因表达,同时在转基因斑马鱼系Tg(kdrl:mCherry)中注射Clec14a-mRNA调控Clec14a基因表达,利用激光共聚焦显微镜观察分析斑马鱼节间血管(intersegment vessel,ISV)表型,统计分析内皮细胞迁移速度和数目的变化,并应用qRT-PCR技术检测下调后该基因mRNA表达情况。结果:在受精后24 h、48 h和72 h,Clec14a基因在斑马鱼脑、心脏、血管系统中有表达;Clec14a基因表达下调导致ISV发育缺陷,内皮细胞数目减少,抑制其迁移速度。结论:下调Clec14a基因表达能够通过抑制内皮细胞增殖和内皮细胞迁移调控斑马鱼胚胎血管发育。 杨晋娴 王新 刘东 张海骏 邵义祥关键词:血管发育 原位杂交 斑马鱼 microRNA-10a/b通过抑制Mib1调节斑马鱼神经元的发育 被引量:1 2017年 该文研究了microRNA-10(miR-10)家族miR-10a/b在斑马鱼胚胎发育时期神经管的表达及其对神经元发育的影响。通过斑马鱼胚胎整体原位杂交及Taq Man PCR技术分析研究miR-10a/b在斑马鱼胚胎期神经管的表达情况。利用吗啡啉(morpholino,Mo)修饰的反义寡核苷酸敲低技术建立miR-10a/b下调的斑马鱼模型,研究miR-10a/b下调后神经元发育异常的表型,并分析鉴定miR-10调控神经元发育的下游靶点。结果发现,受精后24 h(24 hours post fertilization,24 hpf)和48 hpf,miR-10a和miR-10b在斑马鱼神经管中高表达;miR-10a/b-Mo下调miR-10a/b的表达后,背神经管中神经元数量明显变少;下调Mib1(mindbomb E3 ubiquitin protein ligase 1)能挽救miR-10下调引起的神经元表型异常;miR-10a/b下调后胚胎神经管中Mib1表达显著上调。上述结果表明,miR-10a/b通过抑制Mib1的表达来影响斑马鱼神经元的发育。 吕峰 石运伟 王新 刘东 严兴洪关键词:MIR-10B 神经元 发育 斑马鱼 一种斑马鱼难治性癫痫模型的构建方法及应用 本发明公开了一种斑马鱼难治性癫痫模型的构建方法,将第282位脯氨酸密码子突变为丝氨酸的突变人GABRG2基因转入斑马鱼使其成为具有难治性癫痫表型的斑马鱼系。本发明为斑马鱼难治性癫痫模型的建立提供了有效的方法依据,同时也为... 张琦 刘东 沈丁玎 仇嘉颖 王新文献传递 一种下调真核基因表达的方法及其试剂盒 本发明公开了一种下调真核基因表达的方法及其试剂盒,采用5’‑磷酸化单链寡聚脱氧核糖核苷酸(5’‑p‑ss‑DNA Oligo)和Argonaute mRNA联合下调基因表达,包括NgAgo基因的改造,表达质粒的构建,表达... 刘东 石运伟 董张及 王新文献传递 FoxQ1在不同级别脑胶质瘤组织的表达和临床意义 2015年 目的:研究FoxQ1在不同级别脑胶质瘤组织中的表达和临床意义。方法:在组织水平,使用免疫组织化学法检测92例不同级别胶质瘤组织中FoxQ1的表达,并分析FoxQ1表达与临床病理参数及预后的关系。结果:FoxQ1在34例低级别星形细胞瘤(WHOⅠ~Ⅱ级)、35例间变性星形细胞瘤(WHOⅢ级)和23例胶质母细胞瘤(WHOⅣ级)组织中的阳性表达率分别为:14.70%、65.71%和91.30%,差异有统计学意义(χ2=35.85,P<0.01)。胶质瘤组织中FoxQ1表达与WHO分级相关(P<0.05)。经Kaplan-Meier法生存比较,FoxQ1的阳性表达者比阴性表达者生存期短(P<0.05)。多因素分析显示FoxQ1表达是胶质瘤患者独立的预后指标。结论:FoxQ1异常表达可能参与胶质瘤的发生发展和预后相关,并有望成为评估胶质瘤预后的有效指标。 蒋蔚 王新关键词:胶质瘤 预后 生长激素促进斑马鱼尾鳍的再生 被引量:1 2019年 目的建立生长激素过表达的转基因斑马鱼,研究生长激素在斑马鱼尾鳍再生过程中的作用。方法利用Gateway技术构建表达质粒"pDestTol2CG2; ubi:GH-polyA",在一细胞期显微注射表达质粒和转座酶mRNA后,通过荧光显微镜和qPCR技术筛选鉴定GH过表达的转基因斑马鱼。将斑马鱼分为对照组(野生型)和生长激素过表达组,尾鳍横切后,记录分析斑马鱼尾鳍再生过程。结果转基因斑马鱼中心脏被绿色荧光蛋白标记。荧光定量PCR检测结果显示GH表达水平显著高于对照组(P<0.05)。斑马鱼尾鳍横断后,生长激素过表达组的再生速度显著提高(P<0.05)。结论建立稳定生长激素过表达的转基因斑马鱼品系,过表达生长激素能够提高斑马鱼尾鳍再生速度。 刘雪静 王雪雯 石运伟 王新 高煜 刘东关键词:生长激素 外周血miR-494及Let-7e在诊断急性缺血性脑卒中患者中的临床价值 被引量:2 2016年 目的:通过检测急性缺血性脑卒中患者与正常对照组外周血中miR-494及Let-7e的表达水平,探讨其与急性缺血性脑卒中的关系。方法:收集67例急性缺血性脑卒中患者及50例非卒中正常健康人群,采用实时荧光定量PCR法(Quantitative Real-time PCR,QRT-PCR)检测血浆中miR-494及Let-7e表达水平,比较两组外周血中表达水平的差异。并对miR-494及Let-7e行ROC曲线分析,分析其对急性缺血性脑卒中的诊断价值。进一步将急性缺血性脑卒中患者分为预后不佳组(MRS 3-6)和预后良好组(MRS0-2),分析其在两组之间的差异。结果:急性缺血性脑卒中患者外周血中的miR-494(1.71±1.14)及Let-7e(1.43±0.93)的表达水平较正常对照组外周血明显升高(P<0.05)。miR-494及Let-7e ROC曲线下面积分别为0.777、0.756。预后不良组的miR-494(2.04±0.11 vs.1.46±0.05)及Let-7e(1.68±0.61 vs.1.24±0.27)表达水平均较预后良好组显著升高,两组之间有统计学差异(P<0.05)。结论:miR-494及Let-7e可能与急性缺血性脑卒中相关,对急性缺血性脑卒中患者的临床诊断和预后判断具有潜在的应用价值。 包元飞 王新 王玲玲关键词:缺血性脑卒中 LET 实时荧光定量PCR法 医学本科生分子生物学实验教学体会 被引量:8 2005年 为使本科生掌握分子生物学的基本技术,实验室进行了生物化学实验改革,对多个专业的本科生开设部分分子生物学实验,使学生增加了对新技术的认识和理解,提高了综合素质. 殷冬梅 周亚军 王新 葛锦涛 吴亦英 倪衡建关键词:分子生物学实验 医学本科生 教学体会 生物化学 实验室 遗传性耳聋诱导基因的突变筛选方法及突变检测试剂盒 本发明提供一种遗传性耳聋诱导基因的突变检测方法及突变检测试剂盒,检测试剂盒包括基因组DNA抽提体系和PCR反应体系,其中,所述基因组DNA抽提体系包括QIAmp Blood Kit;所述PCR反应体系包括PrimeSTA... 刘东 巩杰 钱佩佩 王新