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鼻咽癌细胞HNE_2cDNA文库的构建被引量：1: 2003年; 目的　快速构建人鼻咽癌细胞株HNE2 的定向cDNA文库。方法　从人鼻咽癌细胞抽提总RNA磁珠法分离mRNA ,以含SfiI酶切位点的oligo(dT)引物合成cDNA第一链 ,利用SMART(switchingmechanismat 5’endofRNAtranscript)技术 ,经LD -PCR合成双链cDNA ,该物经SfiI酶切后分级分离 ,插入片段与λTripIEx2载体连接经体外包装成噬菌体cDNA文库。结果　经鉴定 ,该文库含0 78× 10 6 个重组子 ,重组率 >96% ;扩增文库滴度为 1 0 2× 10 9pfu/ml ,插入片段平均长度为 1 2kb。结论　构建的人鼻咽癌细胞HEN2 cDNA文库质量较好。; 舒峻李官成何小鹃李跃辉; 关键词：鼻咽癌 CDNA文库基因克隆

鼻咽癌组织cDNA文库的构建及抗原基因的筛选: 近年来,肿瘤免疫治疗研究已成为肿瘤研究领域的热点,然而,无论是肿瘤主动免疫治疗还是被动免疫治疗,前提是必须首先获得肿瘤抗原。近几年来,人们采用"重组cDNA表达文库的血清学分析"(SEREX)技术筛选及鉴定肿瘤抗原,极大...; 舒峻李官成何小鹃; 文献传递

SEREX在肿瘤抗原分析中的研究进展被引量：5: 2002年; 重组cDNA表达文库的血清学分析 (SEREX)为一种新的寻找抗原的方法 ,即利用患者自体血清对重组表达的cDNA克隆进行筛选 ,以获得相关抗原基因。这类抗原在荷瘤患者体内能诱导出多重免疫反应 ,且其核苷酸序列和蛋白质结构较易在分子水平确定 ,这一方法的运用 ,为发现新的肿瘤抗原开辟了一个崭新的领域。; 舒峻; 关键词：SEREX 肿瘤抗原肿瘤免疫治疗

人鼻咽癌组织定向cDNA文库的构建被引量：1: 2004年; 目的　快速构建成人鼻咽癌组织cDNA文库。方法　从人鼻咽癌组织分离总RNA ,以含有sfiIB酶切位点的oligo(dT)引物合成第一链cDNA ,以含sfiIA酶切位点的SMART寡核苷酸为引物经LD PCR扩增双链cDNA ,双链cDNA经sfiI(IA&IB)酶切 ,以CHROMASPIN 4 0 0柱分级分离cDNA ,收集符合需要的cDNA片段并纯化 ,随后将之与λTriplEx2载体连接经体外包装成噬菌体cDNA文库。结果　经检测共获得 3.6 4× 10 6个重组子 ,重组率 >94 % ,文库经扩增后滴度为 3.8× 10 9pfu/ml。结论　用SMART方法构建的鼻咽癌组织cDNA文库质量较高。; 舒峻李官成何小鹃; 关键词：CDNA文库定向克隆

鼻咽癌组织cDNA文库的构建及抗原基因的筛选: 目的：快速构建人鼻咽癌组织cDNA文库，以SEREX方法从cDNA文库中筛选鼻咽癌抗原基因。方法：采用初诊鼻咽癌患者新鲜活检组织，抽提总RNA，以含有SfiIB酶切位点的oligo(dT)引物合成第一链cDNA，同时利...; 舒峻; 关键词：鼻咽癌 CDNA文库 SEREX 抗原基因; 文献传递

鼻咽癌组织cDNA文库的构建及抗原基因的筛选被引量：12: 2004年; 构建人鼻咽癌组织cDNA文库 ,以SEREX方法从cDNA文库中筛选鼻咽癌抗原基因。采用确诊鼻咽癌患者新鲜活检癌组织构建cDNA文库 ,测定原始文库滴度 ,进行蓝白筛选以确定文库的重组率。以建库组织来源患者的自身血清 ,采用“一对一”的血清学方法筛选所构建的cDNA文库 ,阳性克隆经PCR检测鉴定后进行序列分析。经测定原始文库滴度为 7 2 8× 10 6 pfu mL ,含 3 6 4× 10 6 个重组子 ,重组率为 94 % ,扩增文库滴度为 3 8× 10 9pfu mL ,cDNA插入片段大小在 0 5～ 3 0kb之间。文库经三轮血清学筛选共获得 2 3个阳性克隆 ,分别代表了 16个独立的cDNA插入片段 (抗原基因 )。其中 10个与已知基因高度同源 ,另外 6个基因与GenBank中已知基因的部分同源 ,其中有 3个是新基因。利用SMART技术构建了高质量的人鼻咽癌组织cDNA表达文库 ,有利于以cDNA文库为基础的进一步的实验研究。应用SEREX技术初步筛选鼻咽癌组织cDNA文库 ,共得到 16个鼻咽癌相关抗原基因 ,其中有 3个是新基因 ,可能为鼻咽癌的免疫学研究提供新的研究分子。; 舒峻李官成何小鹃; 关键词：鼻咽癌 CDNA文库抗原基因

鼻咽癌组织cDNA文库的构建及抗原基因的筛选: 笔者采用SEREX技术,从构建的人鼻咽癌原发组织cDNA文库中筛选鉴定鼻咽癌及其相关的肿瘤抗原,可能为鼻咽癌疫苗的研制提供候选抗原或新的免疫学研究分子.; 舒峻李官成何小鹃; 关键词：鼻咽癌组织 CDNA文库抗原基因; 文献传递

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舒峻