熊燕
- 作品数：42 被引量：77H指数：5
- 供职机构：西南民族大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省科技计划项目中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学经济管理更多>>
- 小鼠骨骼肌纤维类型定量PCR内参基因的筛选被引量：1
- 2021年
- 旨在筛选定量PCR检测不同骨骼肌纤维类型的稳定内参基因,为骨骼肌的能量和糖代谢等功能研究提供基础数据。试验选用6周龄小鼠,采集腓肠肌(Gastrocnemius muscle,GAS)、比目鱼肌(Soleus,SOL)、胫骨前肌(Tibialis anterior muscle,TA)和趾长伸肌(Extensor digitorum longus,EDL)为试验材料。以荧光定量PCR法检测Gapdh、Actb、Rer1、Hprt1、Ppia、Rpl7、B2m、Sdha和Rpl27等9个内参基因的mRNA水平,并采用Delta CT、geNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder五种方法对其表达稳定性进行评估。结果显示,Delta CT法分析稳定性前3个基因为Rpl7>Actb>Rer1,以NormFinder法分析稳定性前3个基因是Rpl7>Rer1>Actb,以BestKeeper法分析稳定性前3个基因是Rpl7>Gapdh>Actb,而以geNorm法分析稳定性前3个基因是Actb>B2m>Rpl27。最后通过RefFinder法综合分析Rpl7是最稳定的内参基因,且5种方法中Ppia均最不稳定。因此,Rpl7可作为小鼠骨骼肌纤维类型检测的稳定内参基因。
- 张静张静华永琳熊燕熊显荣字向东李键
- 关键词：小鼠骨骼肌纤维内参基因RT-PCR
- 一种山羊MTNR1A基因单核苷酸多态性的检测方法及其应用
- 本发明公开了一种山羊MTNR1A基因单核苷酸多态性的检测方法及其应用。根据山羊MTNR1A基因序列设计特异性引物，以待测山羊基因组DNA为模板，通过PCR扩增后将经过电泳验证的扩增产物测序，根据测序结果鉴定待测山羊MTN...
- 李艳艳林亚秋王瑞龙王永李志雄史海涛熊燕王友利陈娟
- SRSF10对山羊肌内前体脂肪细胞分化的影响被引量：4
- 2022年
- 旨在克隆山羊SRSF10基因序列,明确其生物学特性,并通过过表达和干扰手段阐明SRSF10对山羊肌内脂肪细胞分化的影响。本研究以简州大耳羊(Capra hircus)为试验对象,利用RT-PCR技术克隆山羊SRSF10基因序列,并进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)技术研究其在成脂诱导分化不同阶段细胞中的表达水平;转染pcDNA3.1-SRSF10过表达载体和SRSF10-siRNA至山羊肌内前体脂肪细胞并诱导分化,通过油红O和Bodipy染色法从形态学上明确其对脂滴积聚的影响;通过qPCR方法检测脂肪细胞分化标志基因表达的变化。结果显示,获得山羊SRSF10基因序列为1026 bp,其中CDS区552 bp,共编码183个氨基酸;SRSF10在诱导分化96 h的肌内脂肪细胞中表达量最高;过表达和干扰山羊SRSF10分别促进和抑制了肌内脂肪细胞中的脂滴积聚;过表达后基因SREBP1、PPARγ和C/EBPα的相对表达量极显著上调(P<0.01),干扰后分化标志基因SREBP1、PPARγ和C/EBPα相对表达水平极显著降低(P<0.01)。结果表明,山羊SRSF10是肌内脂肪细胞分化的正调控作用因子,并且这种调控作用可能主要通过调节SREBP1、PPARγ和C/EBPα的表达来实现。
- 刘珂含王永李艳艳李艳艳朱江江朱江江朱江江熊燕
- 关键词：山羊基因克隆细胞分化
- 组织特异性基因敲除小鼠生产的动物遗传学综合实验设计
- 2023年
- 设计了脂肪组织KDM2A基因特异敲除小鼠生产及基因型鉴定的综合实验。该实验采用线上线下混合的形式,以科研成果组蛋白赖氨酸去甲基化酶KDM2Aflox/-基因编辑杂合小鼠和脂联素(Adipoq)介导的环化重组酶(Cyclization recombination enzyme, Cre)-Adipoq-Cre工具小鼠为材料,通过设计小鼠的杂交实验方案,获得F3代小鼠。采用聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)技术对F3代小鼠KDM2A和Adipoq-Cre的基因型进行鉴定,筛选脂肪组织特异KDM2A基因敲除小鼠(Adipoq-Cre+-KDM2Aflox/flox)。该实验设计涵盖经典遗传学孟德尔分离定律和自由组合定律、分子遗传学的基本理论、分子生物学检测技术、基因编辑技术、Cre-loxp介导组织特异性基因敲除等知识与技能。具有综合性、设计性及研究性的特点。
- 熊燕熊显荣李志雄付伟王利林亚秋
- 关键词：基因型鉴定
- 基于山羊肌内前体脂肪细胞RNA-seq数据的新基因发掘与分析
- 2024年
- 为挖掘山羊(Capra hircus)肌内前体脂肪细胞分化前后的新基因并对其进行GO功能和KEGG通路富集分析.利用转录组测序(Transcriptome sequencing,RNA-seq)技术对山羊肌内前体脂肪细胞分化前后的两组细胞cDNA样品(n=3)进行高通量测序,有效数据与山羊参考基因组比对后利用StringTie软件组装新基因.基于|log2foldchange|>0和P-adj<0.05筛选获得差异表达新基因,并利用clusterProfiler R包针对GO和KEGG数据库对新基因进行GO功能及KEGG通路注释.结果表明,组装获得的201个新基因可定位在山羊29对常染色体上,且在染色体2、3、5、11、18和29上定位富集.山羊肌内脂肪细胞分化前后表达上调的新基因共28个,表达下调的新基因共57个.在GO功能富集方面,共21个新基因注释到277个GO功能亚类中,其中GO功能条目中参与生物过程、细胞组成和分子功能的基因分别占73.65%、3.97%和22.38%,且3个条目中显著富集的GO功能亚类分别与代谢功能、病毒组装和分子结合相关.此外,共21个新基因富集到16条KEGG通路中,其中氨基酸生物合成通路富集的新基因最多,为3个.研究结果挖掘了山羊肌内脂肪细胞分化前后的新基因201个,为揭示山羊肌内前体脂肪细胞分化相关的新基因并进一步完善山羊功能基因组提供基础数据.
- 王友利王永李志雄李志雄朱江江李艳艳林亚秋
- 关键词：转录组测序新基因
- 牦牛PKN2基因克隆与组织表达特性的分析被引量：1
- 2022年
- 克隆牦牛蛋白激酶N2(Protein Kinase N2,PKN2)基因编码序列(Coding sequence,CDS),预测和分析PKN2基因的生物学特性,并探究在不同的组织中的表达规律.以牦牛的脂肪cDNA为模板,用PCR技术克隆PKN2基因;使用MEGA7.0、SOPMA和TMHMM等进行生物信息学分析;采用荧光定量PCR技术PCR分析牦牛PKN2基因在心脏、肝脏、脾脏等组织的mRNA水平的表达.结果显示,PKN2基因CDS区长942 bp,编码313个氨基酸,分子量为107315.25 u,分子式C_(4742)H_(7535)N_(1319)O_(1442)S_(38);PKN2蛋白为不稳定的亲水蛋白,具有101个磷酸化位点;跨膜结构预测显示不存在跨膜结构区和信号肽;PKN2的二级结构主要以α-螺旋(41.61%)为主;与其他物种的同源性分析结果显示,牦牛PKN2基因与普通牛的同源性最高(99.84%),与鸡的同源性最低(84.59%),符合物种进化规律.qPCR技术显示PKN2基因在牦牛脂肪组织中表达最高,极显著高于肝脏和睾丸组织(P<0.01),显著高于心脏、脾脏和肺脏(P<0.05).本研究结果为牦牛PKN2基因的功能研究提供了参考依据.
- 马妍熊燕熊燕赵丹范依琳赵丹冯欣欣李键
- 关键词：牦牛基因克隆
- 牦牛GnIH基因生物学特征分析及其在卵巢颗粒细胞中亚细胞定位的研究
- 2023年
- 为探究促性腺激素抑制激素(gonadotropin-inhibitory hormone, GnIH)基因的序列特征及其在牦牛卵巢颗粒细胞中的表达与定位,试验从牦牛卵巢组织cDNA中克隆了GnIH基因,利用在线软件进行生物信息学分析,并采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测GnIH基因在牦牛各器官中的表达情况,通过免疫组织化学和免疫荧光法检测GnIH在组织中的表达及定位。结果表明:GnIH基因编码序列(CDS)区大小为591 bp,编码196个氨基酸;牦牛GnIH基因与黄牛和野牦牛同源性最高;GnIH前体为不稳定亲水酸性蛋白,且无跨膜结构,在第26,27个氨基酸间有信号肽区域,同时GnIH前体包含了3个磷酸化位点,二级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲组成。GnIH基因在卵巢中的相对表达量显著高于其他组织(P<0.05);随着卵泡的增长发育,GnIH基因在卵泡颗粒细胞中的表达量呈上升趋势,大卵泡(≥6 mm)中GnIH基因相对表达量最高,显著高于中(>3~<6 mm)、小卵泡(≤3 mm)(P<0.05),而中、小卵泡之间差异不显著(P>0.05)。GnIH在卵巢颗粒细胞的细胞核及细胞质中均有表达。说明牦牛GnIH基因参与了牦牛的卵泡发育调控。
- 胡宇磊杨满珍于海玲朱艳锦潘帮婷付伟熊燕李键熊显荣
- 关键词：牦牛颗粒细胞
- 鸡血藤提取物对藏鸡精子低温及冷冻保存效果的研究
- 2024年
- 为探究鸡血藤提取物对藏鸡精液低温及冷冻保存的作用,本实验采集健康的25周龄藏鸡精液,在精液中添加浓度为0.01、0.03、0.05、0.1 mg/mL的鸡血藤提取物进行低温与冷冻保存,对照组用不含鸡血藤提取物的稀释液稀释,检测保存后精子的活率、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活力、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量等指标。结果表明:在4℃保存条件下,与对照组相比,添加终浓度为0.01mg/mL的鸡血藤提取物可显著提高保存24、48h时的精子活率、精液中SOD活力,显著降低精液中MDA含量。在精液冷冻保存中,与对照组相比,添加0.01 mg/mL的鸡血藤提取物可显著提高解冻后精子活率、精液中SOD活力,而显著降低精液MDA含量。本实验结果证明在藏鸡精液低温或冷冻保存时添加0.01 mg/mL的鸡血藤提取物可有效提升精子质量。
- 赵特郭玉平措李键李志雄吴锦波熊燕
- 关键词：藏鸡冷冻保存
- 一种动物精液冷冻保护剂及提高冷冻精液质量的方法
- 本发明提供了一种动物精液冷冻保护剂，它包括0.2mM青蒿琥酯。本发明还提供了一种提高牦牛冻精质量的方法。本发明研究发现青蒿琥酯，可使牦牛冷冻精子活力、质膜完整性得到提升，减少和预防冷冻造成的牦牛精子损伤。
- 熊燕范依琳赵特李键李小伟格日万玛熊显荣兰道亮何翃闳付伟殷实何小强王燕文
- 肉羊肌内脂肪沉积分子调控机制的研究进展
- 2025年
- 羊肉是我国重要的畜产品之一,肌内脂肪沉积与羊肉品质密切相关,其影响羊肉的多汁性、嫩度及风味。肌内脂肪在肌外膜、肌内膜和肌束膜中沉积,其沉积规律相较皮下和内脏脂肪具有较大差异,受到转录因子、非编码RNA、信号通路及激素等多种分子的调控,因此从分子水平探究肌内脂肪的遗传机制对羊肉生产具有重要意义。该文对肉羊肌内脂肪起源、脂肪生成过程、转录因子以及表观遗传因子对肌内脂肪细胞增殖与分化的功能机制进行综述,旨在为生产高品质羊肉提供理论依据与新思路。
- 周子力王建梅沙培然李丹丹李安熊燕
- 关键词：肉羊肌内脂肪脂肪沉积表观遗传调控
