王太一
- 作品数:65 被引量:195H指数:8
- 供职机构:中国医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金“九五”国家科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- GFP-p16融合基因表达载体在BHK HeLa细胞中荧光蛋白表达的研究被引量:2
- 1998年
- 本文报道了通过脂质体转染技术将本室构建成的GFP-p16融合基因表达载体pCp16G和pCGp16分别导入BHK、HeLa细胞中,研究它们在真核细胞中荧光蛋白的表达。结果表明,外源脂质体对BHK、HeLa等真核细胞无损伤,经斑点杂交检测证明,外源基因可以通过脂质体转染技术整合到细胞基因组中。研究结果还表明,p16基因与GFP基因的3′端连接,可以保持GFP的荧光特性,表达荧光蛋白,而与GFP基因的5′端连接,则不能表达荧光。
- 李华王禄增刘维全崔振中王太一
- 关键词:HELA细胞荧光蛋白脂质体转染GFP基因细胞基因
- 全文增补中
- 抗G418小鼠胚胎干细胞饲养层的制备被引量:8
- 2005年
- 目的:建立具有G418抗性的 3T3细胞系,用于转染pTet on基因的ES阳性细胞克隆筛选的饲养层。方法: 通过脂质体转染的方法,将含有neo基因的质粒pWL/neo导入 3T3细胞中,利用G418的药物选择特性,对转染细胞进行压力筛选,并对其进行PCR鉴定。结果:经 500μg/ml的G418压力筛选后,获得了抗G418细胞克隆。抗性 3T3细胞的形态和生长速度与正常 3T3细胞没有差异,用特异性核苷酸引物检测抗性细胞基因组DNA,可以扩增出对应的核苷酸片段,Southernblot鉴定结果表明neo基因片段已整合入G418抗性 3T3细胞中。结论:成功地培育了G418抗性的 3T3细胞,为进行pTet on基因转染ES细胞的阳性细胞克隆筛选奠定了基础。
- 张梅英李华董婉维杨葳汪瑛秦英王禄增王太一
- 关键词:3T3细胞饲养层胚胎干细胞
- 改建清洁级动物繁育室的探讨
- 1996年
- 改建清洁级动物繁育室的探讨王禄增,宁月宝,陈玉生,王太一,杨秀芝,彭德才(中国医科大学实验动物学部,沈阳)我部根据全校科学研究的需要,将原动物部主楼四层一级动物实验室改建成清洁动物繁育室。改建后,清洁动物繁育室6间,清洁物品存放室一间,清洁级遗传研究...
- 王禄增宁月宝陈玉生王太一杨秀芝彭德才
- 关键词:动物实验室贮藏清洁级流布高压蒸气灭菌
- 胚胎干细胞途径获得基因工程小鼠的原理与方法被引量:1
- 1999年
- 高舒平王太一胡以平
- 关键词:ES细胞胚胎干细胞白血病抑制因子基因工程同源重组体胚
- 转基因技术在医学研究中的应用被引量:1
- 1997年
- 李华刘维全王太一
- 关键词:转基因技术基因治疗发病机理生物医学基因表达
- 沈阳地区实验动物环境设施条件合格证实施情况的分析
- 1997年
- 高舒平王太一戴显声王禄增郭宏
- 关键词:实验动物医学动物环境设施
- 应用以菌落为模板的聚合酶链反应技术筛选重组阳性克隆被引量:21
- 2002年
- 目的 应用以菌落为模板的聚合酶链反应 (PCR)技术筛选插有小鼠Doc 1R基因组序列的重组阳性克隆。方法 应用扩增小鼠Doc 1R基因组序列时使用的引物 ,以基因重组扩增后得到的菌落为模板 ,直接进行PCR扩增。结果 在筛选的 5个菌落中有 3个可见到 15 0 0bp大小的阳性条带与Doc 1R基因片段大小一致的阳性克隆 ,并对此 3个阳性克隆分别提取质粒 ,进一步进行双酶切及序列分析鉴定 ,证明结果正确。结论 菌落PCR用于筛选重组阳性克隆是一种简便、快速、可靠。
- 生秀杰周伟强姜莉王太一张学
- 关键词:聚合酶链反应基因克隆
- 回归基础教学的调查与思考被引量:4
- 1999年
- 培养医学生的综合能力,以使其更好地适应未来的医生工作.已受到国内各高等医学院校的普遍重视。本文就我校为适应未来社会对医学生的需求所制订的新教学计划中“回归基础”教学的可行性进行了调查,以期为这种全新的教学模式的顺利开展打下基础。
- 田伟王世鹏王忠王太一
- 关键词:医学生医生高等医学院校基础教学教学计划教学模式
- 蚓激酶基因在山羊乳腺中的瞬时表达被引量:4
- 2005年
- 构建了包括山羊β-酪蛋白基因启动子和蚓激酶基因cDNA的乳腺表达载体pβLK.通过直接注射将重组载体DNA导入山羊的乳腺组织,以纤维蛋白平板法测定乳汁中蚓激酶基因表达产物的活性.实验证实蚓激酶基因可以在山羊乳腺中瞬时表达.在进行山羊乳腺的瞬时表达时,适宜的注射剂量为500μg/ml.注射后6~9 h的表达量最高,达到2.0×105U/L,并持续表达至60h.
- 范志强姚汝强张守峰王太一王禄增扈荣良
- 基因导入的脂质体转染法和磷酸钙转染法之比较被引量:19
- 2000年
- 将外源基因导入真核细胞的方法很多。我们通过对绿色荧光蛋白 (GFP)报告基因在真核细胞中表达的研究 ,比较了较常用的两种方法—脂质体转染法和磷酸钙转染法。研究结果表明 :脂质体转染法的转染效率较磷酸钙转染法高 ,且简单易行 ,是外源基因导入体外培养细胞内较理想的方法。
- 李华刘维全王太一殷震
- 关键词:脂质体转染法体外培养细胞转染效率报告基因