王淑杰
- 作品数：65 被引量：234H指数：9
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞受体Sn和CD163 TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立
- 2012年
- 为建立检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)允许细胞表面的Sn和CD163受体的方法,本研究设计针对Sn和CD163基因的特异性引物和荧光探针,建立了检测PRRSV Sn和CD163受体的荧光定量RT-PCR方法。结果显示,该方法在检测101copies/μL～108copies/μL模板范围内具有良好的线性关系。标准曲线的相关系数r值均大于0.996,扩增效率分别为100%和107%;该检测方法对Sn和CD163的检测下限均为10拷贝,敏感性高;批内重复试验和批间重复试验的变异系数均小于5%,具有良好的重复性。利用该方法对PRRSV感染肺泡巨噬细胞(PAM)72 h后Sn和CD163受体mRNA的转录水平进行了检测,结果表明Sn和CD163受体的转录水平显著上调。本研究为PRRSV病毒感染后两种主要受体变化趋势的研究提供了有效的检测方法。
- 韩梓峰刘永刚石文达王刚何玉利王淑杰刘鹤董建国武嘉男蔡雪辉
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光定量RT-PCR
- 猪链球菌的分型鉴定及其体外形成生物被膜的研究
- 2014年
- 通过生化试验及PCR等方法对13株猪链球菌进行鉴定分型,用结晶紫染色(CV)和扫描电镜(SEM)的方法对其形成生物被膜的能力进行研究,并对形成的生物被膜进行形态观察。结果显示:经鉴定的13株猪链球菌中1株为1型,4株为9型,2株为7型,另2株为2型,其他菌株为未知;13株菌均能形成生物被膜,其中1号、2号、3号、4号、7号、9号、10号、12号、13号菌形成生物被膜能力较弱,5号、6号、8号、11号菌形成生物被膜能力中等。这些结果为研究猪链球菌致病性及为生物被膜研究提供物质基础。
- 周永辉王淑杰黄全勇陈俭清李艳华
- 关键词：猪链球菌分型鉴定生物被膜
- PRRSV CH-1a株致弱过程中不同代次病毒结构蛋白基因遗传变异分析被引量：1
- 2009年
- 对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CH-1a株致弱过程中不同代次病毒(S39、S70、S148、S171)及国内分离株(GD3、JS1、JS5)的结构蛋白基因(ORF2～ORF7)进行了克隆和测序,并与国内外毒株序列进行比较和系统发育进化分析。结果表明,PRRSV CH-1a株各传代毒株和国内分离毒株各个结构蛋白序列均存在不同程度的变异,与GenBank上的登录序列进行了比对,发现GP2～GP5同源性在83.1%～100%,M蛋白同源性在95.4%～100%,N蛋白同源性在87%～100%,其中以GP2、GP3和GP5发生突变几率较大;另外,发现PRRSV CH-1a不同代次病毒GP5的H38突变为Q38(S70),L146突变为Q146(S148),而2006年分离的PRRSV变异毒株由F39突变为I39,而且分离毒株的毒力明显强于经典毒株。进化分析表明,GD3毒株与2006年～2007年分离的毒株以及PRRSV CH-1a株的亲缘关系均较近,处于二者的中间位置。
- 刘永刚蔡雪辉石文达马平王淑杰李成君武佳斌徐敏
- 关键词：PRRSVCH-1A株致弱
- PRRSV新亚型毒株JL580的基因组变异特征研究被引量：4
- 2015年
- 为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)新分离株JL580遗传变异特征,研究扩增得到了该病毒的全基因组序列,并对GP5和NSP2序列进行了比对分析。结果表明:JL580株属于美洲株,且不同于中国现流行的其他毒株,与中国代表毒株CH-1a的核苷酸同源性是84.9%,与HP-PRRSV代表株JXA1、HuN4、TJ的核苷酸同源性分别是84.8%、84.9%、85%。对基因组的进一步分析表明,JL580株GP5蛋白与CH-1a、VR-2332、HuN4相比,R13→Q13,V27→A27,H38→N38,R151→K151;且NSP2存在3处缺失,与HP-PRRSV的30个氨基酸的缺失有明显的不同。JL580分离株的出现表明中国出现了新的PRRSV亚型,这对于PRRSV的防治和新疫苗的研制提供了科学依据。
- 常晓博赵款叶超姜成刚王淑杰蔡雪辉张辉安同庆
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组
- 抗谷氨酸脱氢酶蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用
- 本发明公开了谷氨酸脱氢酶蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用。本发明将链球菌GDH基因的抗原性和疏水性进行分析，去除信号肽和跨膜区域后设计一对引物对GDH基因进行克隆，以大肠杆菌成功表达了WC-SS7的GDH蛋白，将纯化的G...
- 王淑杰蔡雪辉徐敏武佳斌刘永刚石文达李丽琴徐明明荣福龙
- 猪链球菌2型毒力因子研究进展被引量：12
- 2009年
- 猪链球菌（SS）病是一种严重危害养猪业的人畜共患病，呈世界性分布。根据荚膜抗原特性的不同，猪链球菌被分为35个血清型（1／2型，1型～34型），其中以猪链球菌2型（SS2）流行最广，毒力最强。SS2主要的毒力因子有溶菌酶释放蛋白、胞外蛋白因子、荚膜抗原、溶血素等。然而，新近发现的一些与SS2致病性相关的基因序列和蛋白片段已经成为当前研究的重点和热点。在基因水平上的新发现主要有orf2毒力因子、89kb毒力岛、转录调节因子、氨基酸通透酶、ABC转运子及表面锚定蛋白基因、反应调节因子RevS基因、纤连蛋白结合蛋白基因、编码噬菌体的基因序列Ss1和分泌性核酸酶SsnA基因等。蛋白水平上的新发现主要有脂磷壁酸的D-丙氨酰位点、自溶素、精氨酸脱亚氨酸酶系统、浑浊因子，38，45，39，44ku蛋白，以及一些蛋白酶和纤维蛋白溶血酶原受体等。
- 徐敏蔡雪辉王淑杰刘永刚
- 关键词：猪链球菌2型毒力因子致病机制
- 实验动物麻醉用注射器
- 一种实验动物麻醉用注射器，属于注射器技术领域域，解决了现有的注射器不方便对小型实验动物进行腹腔注射的问题，它包含针筒、活塞、推杆和用于插针头的乳头，活塞设置在针筒内并与推杆连接，所述乳头有多个，多个乳头设置在针筒侧面并位...
- 蔡雪辉王淑杰
- 分泌CAV-2单克隆抗体的杂交瘤细胞株7D7、由该细胞株分泌的单克隆抗体及应用
- 本发明公开了一株分泌CAV-2单克隆抗体的杂交瘤细胞株7D7、由该细胞株分泌的单克隆抗体及应用。所述杂交瘤细胞株7D7保藏编号为CGMCC？No.10877。间接免疫荧光结果表明：7D7杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体能特异...
- 王淑杰蔡雪辉
- 小动物手术用手术台
- 一种小动物手术用手术台，属于兽用手术器械领域，解决了目前的小动物手术台的台面都是平的，不能将手术部位适宜的突出的问题，它包含水箱和升降台，所述升降台由多组升降单元平行排列构成，每组升降单元包含一根横柱和垂直于横柱的两根立...
- 蔡雪辉王淑杰
- 牛α干扰素在毕赤酵母中的高效分泌表达及活性鉴定被引量：4
- 2013年
- 为高效分泌表达牛α干扰素(boIFN-α),本研究通过人工合成boIFN-α基因,将目的基因克隆至表达载体pPIC9K中,构建重组质粒pPIC9K-boIFN-α,将其电转化于毕赤酵母菌株GS115,利用抗药选择压力G418筛选重组菌,对重组菌诱导表达,取上清进行SDS-PAGE和western blot检测,并优化重组菌的诱导表达条件。结果显示:筛选获得高效分泌表达boIFN-α的重组菌,其最佳诱导条件为:250 r/min,26℃培养,1%甲醇浓度诱导,诱导72 h。上清中目的蛋白表达量最高可达200μg/mL,本研究为boIFN-α在生产中的应用奠定了基础。
- 王延群张璐李玉明汪志艳金家民刘永刚王刚王淑杰姜成刚涂亚斌蔡雪辉
- 关键词：毕赤酵母分泌表达
