赵松
- 作品数：55 被引量：228H指数：9
- 供职机构：江苏省血吸虫病防治研究所更多>>
- 发文基金：江苏省国际科技合作项目World Health Organization江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 苏云金杆菌以色列亚种对蚊幼虫体内解毒酶活性的影响被引量：6
- 2015年
- 目的研究苏云金杆菌以色列亚种(Bacillus thuringrensis var.israelesis,Bti)对蚊幼虫体内3种解毒酶活性的影响。方法采用室内生物测定的方法,分别测定淡色库蚊和埃及伊蚊幼虫取食Bti后体内谷胱甘肽转移酶、乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶的活性。结果 Bti对蚊幼虫体内3种解毒酶活性均产生影响。蚊幼虫在Bti处理后谷胱甘肽转移酶活性显著增强又迅速下降、后期持续抑制;羧酸酯酶活性上升后迅速下降并恢复到正常水平;乙酰胆碱酯酶活性受Bti影响较小,前期受到抑制后逐步回升至正常水平。3种酶活性与Bti浓度呈正相关。结论 Bti可显著影响蚊幼体内谷胱甘肽转移酶、乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶的活性。
- 韩光杰李传明孙俊刘琴赵松祁建杭徐健
- 关键词：淡色库蚊埃及伊蚊解毒酶
- 江苏省血吸虫病查病质控体系的构建与应用Ⅱ县级人员病原学检测能力评估被引量：5
- 2018年
- 目的评价江苏省县级血防机构开展血吸虫病病原学检测水平,提高专业技术人员血吸虫病病原学检测能力,为构建血吸虫病现场查病质控体系提供技术支撑。方法人工获取家兔血吸虫肝卵,制备成4个不同浓度的虫卵悬液,采用单盲法开展虫卵孵化检测,比较县级工作员检测结果与标准结果的符合率、误检率和漏检率。结果江苏省28个县(市、区)共检测虫卵悬液560份,检出阳性283份,阴性203份,总符合率为86.79%,总误检率为9.38%,总漏检率为15.77%,检测结果与标准结果差异有统计学意义(χ~2=12.99,P<0.01)。28个县(市、区)中有20个县(市、区)出现了漏检,占71.43%;13个县(市、区)出现了误检,占46.43%。江滩、山丘、水网和湖滩4类地区病原学检测误检率为4.55%~43.75%,差异有统计学意义(χ~2=30.34,P<0.01);漏检率为4.17%~20.45%,差异无统计学意义(χ~2=5.09,P=0.17)。传播控制和传播阻断2类流行区病原学检测误检与漏检率分别为7.50%、13.33%与10.42%、17.13%,差异无统计学意义(χ~2=0.229、0.575,P均>0.05)。达到血吸虫病传播控制10年及以上和不足10年地区误检与漏检率分别为11.81%、5.00%与16.67%、14.17%,差异无统计学意义(χ~2=2.804、2.848,P均>0.05)。达到血吸虫病传播阻断10年及以上与不足10年地区误检率分别为11.54%与10.00%,差异无统计学意义(χ~2=0.069,P=0.792);漏检率分别为10.90%与35.00%,差异有统计学意义(χ~2=17.364,P<0.01)。结论江苏省县级水平血吸虫病查病工作存在漏检、误检现象,现场病原学检测能力有待进一步提高。
- 张键锋姚韵怡熊春蓉赵松冯云王鑫瑶李伟
- 关键词：血吸虫病
- 日本血吸虫病小鼠粪便虫卵DNA检测荧光RAA法和ddPCR探针法比较
- 2025年
- 目的比较荧光重组酶介导的等温扩增反应(RAA)法和微滴式数字PCR(ddPCR)探针法检测小鼠粪便中日本血吸虫虫卵DNA的灵敏度。方法CD1小鼠15只,随机分为感染组(n=10)和阴性对照组(n=5)。阴性对照组以去氯水处理;感染组小鼠经腹壁接触感染日本血吸虫尾蚴20条,于感染后第23、27、30、35天取小鼠粪便,第45天安乐死解剖,获得肝内虫卵,进行虫卵计数。分别以含固定数量虫卵的粪便基因组DNA连续稀释梯度、含不同虫卵数量小鼠粪便基因组DNA、小鼠不同感染时间点粪便基因组DNA为模板比较荧光RAA和ddPCR探针法灵敏度。结果含固定虫卵数量(>50000)粪便样本(661 ng/μL)浓度稀释107倍后,荧光RAA仍可检出阳性反应,而ddPCR探针法检测稀释105倍样本的数值(15.10 copies/μL)与对照组(11.40 copies/μL)近似。荧光RAA法未能于虫卵含量少于50000个的粪便基因组DNA检出明显阳性扩增,而约含5000、1000、500、200、100个虫卵的粪便DNA样本的ddPCR探针法检测值[(60.97±3.46)、(103.33±10.69)、(55.10±2.02)、(20.00±2.45)、(36.37±0.45)copies/μL]与对照组(0.38±0.16)copies/μL比较差异均有统计学意义(P均<0.01)。两种方法均未能于感染后23 d小鼠粪便DNA样本中检出阳性反应,荧光RAA法可在感染后第30天粪便DNA检出明显阳性反应,感染后第27天粪便样本出现阳性反应趋势,而ddPCR探针法只于感染后第35天(205.00 copies/μL)粪便中检出阳性反应。结论荧光RAA比ddPCR探针法在检测日本血吸虫感染小鼠粪便虫卵DNA方面更敏感,但ddPCR探针法检测结果稳定,可重复性更好,两者结合使用,可以实现敏感有效地检测粪便虫卵DNA。
- 汤宪时赵松杨静许永良仝德胜
- 关键词：日本血吸虫粪便虫卵
- 尿液中外源日本血吸虫小分子DNA片段提取方法的建立与评价被引量：1
- 2023年
- 目的建立尿液中外源添加的日本血吸虫小分子DNA片段提取方法,评价不同方法处理尿液后的提取效果。方法以日本血吸虫SjG28基因片段作为靶序列,通过PCR扩增靶序列上的81 bp小分子DNA片段,经测序鉴定后作为拟添加到尿液样本中的外源小分子DNA片段。以SjG28为靶基因设计引物及探针,建立实时荧光定量PCR(qPCR)方法;将外源小分子DNA片段以10为梯度倍比稀释后进行扩增,评价该方法的敏感性;以日本血吸虫、曼氏血吸虫、埃及血吸虫、巴贝虫、十二指肠钩口线虫、华支睾吸虫、卫氏并殖吸虫基因组DNA为模板进行检测,评价该方法的特异性。将外源小分子DNA片段添加至人工尿液及健康人尿液后,经调整p H值、离心、浓缩等处理后,采用QIAmp Viral RNA Mini Kit(Qiagen试剂盒)、BIOG游离DNA提取试剂盒(BIOG试剂盒)提取尿液中的外源小分子DNA片段,比较不同处理方式及提取方法的效果。结果成功制备81 bp外源日本血吸虫小分子DNA片段,建立的qPCR法最低能检测到100拷贝/μL的81 bp外源日本血吸虫小分子DNA片段。以上述7种寄生虫DNA为模板进行检测,仅日本血吸虫基因组DNA模板有荧光信号值增长。调整人工尿液pH值为5、6、7、8,采用Qiagen试剂盒提取其中的外源日本血吸虫小分子DNA片段回收率分别(49.12±2.09)%、(84.52±4.96)%、(89.38±3.32)%和(87.82±3.90)%;采用BIOG试剂盒提取小分子DNA片段回收率分别为(2.30±0.07)%、(8.11±0.26)%、(13.35±0.61)%、(20.82±0.68)%,两种方法提取回收率差异均有统计学意义(t=38.702、26.955、39.042、29.571,P均<0.01)。采用Qiagen试剂盒提取人工尿液,pH值为5时核酸回收率最低(P均<0.05);pH值为6、7、8时,核酸回收率差异均无统计学意义(P均>0.05)。人工尿液[(64.30±1.00)%vs.(58.87±0.26)%;t=12.033,P<0.05)]、健康人尿液[(31165±1017)拷贝/μL vs.(28471±818)拷贝/μL;t=23.164,P<0.05]经离心后,外源小分子DNA片段回�
- 张乔乔赵松叶钰滢毕念念王鑫瑶张键锋李伟杨坤
- 关键词：日本血吸虫尿液游离DNA实时荧光定量PCR
- 转宿主粘虫颗粒体病毒(PuGV-Ps)增效蛋白基因的克隆表达及活性被引量：3
- 2013年
- 以东方粘虫为转宿主增殖的颗粒体病毒(PuGV Ps)DNA为模板通过PCR反应扩增出一条2.7 kb的特异性基因片段,纯化的PCR产物克隆到载体质粒pET 15b中,构建重组质粒pET 15b En,重组质粒外源基因测序证明PCR扩增产物是粘虫颗粒体病毒转宿主病毒PuGV Ps增效蛋白的全长基因。与原始美洲粘虫颗粒体病毒(PuGV)增效蛋白基因的序列比较,两者同源性达99.59%。11个突变碱基中有7个集中在5′端下游500 bp,而3′端上游500 bp仅1个碱基发生突变。PuGV Ps增效蛋白基因重组质粒pET 15b En转化到大肠杆菌中构建重组菌,在IPTG诱导下表达了108 kD的表达产物,Ni2+柱纯化证明表达产物是目标增效蛋白。LB培养液中加入0.2%的葡萄糖后有利于增效蛋白基因的表达。生物测定结果表明,粗提的表达产物具有增效活性,可以提高Btδ内毒素对棉铃虫、甜菜夜蛾的敏感性。
- 徐健赵松刘琴杨青李传明
- 关键词：增效蛋白克隆表达生物测定
- PuGV-Ps增效蛋白质基因特征及其整合载体的构建被引量：1
- 2015年
- 为了明确增效蛋白质基因特性,获得重组增效苏云金杆菌,本试验通过生物信息学方法分析了转宿主东方粘虫颗粒体病毒（Pu GV-Ps）增效蛋白质基因（En）的特征及二级结构,利用In-fusion技术构建了整合载体。基于Pu GV-Ps增效蛋白质基因进化树显示,颗粒体病毒与多角体病毒为2个明显的分支,美洲粘虫颗粒体病毒（Pu GV）与转宿主东方粘虫颗粒体病毒的增效蛋白质基因遗传距离极小。6种颗粒体病毒增效蛋白质氨基酸序列比对结果显示,增效蛋白质N端相似性较高,均含有锌离子结构域（244位）与催化域（526～565位）;增效蛋白质基因二级结构中α螺旋和无规则卷曲占整个片段的73%,且N端以不规则卷曲为主;利用改进的In-fusion技术构建整合载体,双酶切结果显示增效蛋白质基因连接方向正确,p LTV1-En构建成功;通过高温整合获得重组工程菌Bt71En。表明,Pu GV-Ps与Pu GV增效蛋白质基因同源性较高,其二级结构复杂,影响载体构建,通过高温处理连接片段可以明显提高载体的连接效率。
- 韩光杰赵松刘琴李传明徐健
- 用于检测日本血吸虫DNA试剂盒以及使用方法
- 本发明提供了一种用于检测日本血吸虫DNA的试剂盒以及使用方法，所述试剂盒包括反应体系以及侧流层析试纸；所述反应体系包括引物组、探针、缓冲液以及纯化水；所述侧流层析试纸设有检测部、检测线以及质控线，所述检测部包被有带FAM...
- 杨坤赵松张键锋叶钰滢
- 文献传递
- 重组酶介导核酸等温扩增荧光法用于日本血吸虫感染性钉螺早期检测的研究被引量：4
- 2019年
- 目的探索重组酶介导的核酸等温扩增(recombinase aided amplification,RAA)荧光法用于日本血吸虫感染性钉螺早期检测的可行性。方法用日本血吸虫毛蚴人工感染200只湖北钉螺,随机分为阳性对照组和实验组各100只,另取100只未感染钉螺作为阴性对照组。将阳性对照组钉螺饲养至70 d,通过逸蚴法观察感染情况并计算阳性率。实验组钉螺分别在3 h以及5、20、40、70 d随机取20只,压碎镜检,同时提取钉螺软体DNA,进行荧光RAA法检测,获得不同时间点的阳性率,并与阳性对照组相比较。通过二代测序法对RAA检测阳性的特异性扩增产物进行测序鉴定。结果毛蚴感染后3 h、5 d、20 d、40 d、70 d实验组钉螺RAA法检测阳性率分别为60%、60%、65%、60%、70%,压碎镜检的阳性率分别为0、0、0、15%、65%,除70 d外其余时间点两种检测方法的阳性率差异均有统计学(χ^2=17.14,χ^2=17.14,χ^220 d=19.26,χ^2=8.64,均P<0.01);各时间点间阳性率差异无统计学意义(χ^2=0.68,P>0.05),各时间点阳性率与阳性对照组阳性率64.6%比较差异均无统计学意义。RAA扩增产物经二代测序后与数据库比对,确认为血吸虫特异性基因片段。结论 RAA荧光法敏感、特异,可用于日本血吸虫感染性钉螺的早期检测。
- 董萱熊春蓉李婷赵松张键锋李伟杨坤
- 关键词：感染性钉螺核酸检测
- 一种SjHSP90重组蛋白及其在血吸虫病诊断及疗效考核中的应用
- 一种SjHSP90重组蛋白及其在血吸虫病诊断及疗效考核中的应用，属于免疫学领域。本发明包括日本血吸虫热休克蛋白SjHSP90重组蛋白的制备，SjHSP90重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。并进一步将该Sj...
- 王晓婷戴洋戴建荣邢云天曲国立唐建霞赵松朱荫昌
- 文献传递
- 江苏省血吸虫病诊断参比实验室建立与运行进展被引量：5
- 2019年
- 目的建立江苏省血吸虫病诊断参比实验室,评价参比实验室的作用与检测能力。方法按照国家血吸虫病诊断参比实验室建设要求,开展江苏省血吸虫病诊断参比实验室建设,并参加国家血吸虫病诊断参比中心的实验室室间比对,对江苏省基层实验室血吸虫病检测能力进行评估。结果江苏省血吸虫病诊断参比实验室组织结构、环境条件、管理和质量体系等符合国家血吸虫病诊断参比实验室建设要求,获得了省级血吸虫病诊断参比实验室准入资质。在由国家血吸虫病诊断参比中心组织的6次实验室室间比对活动中,各检测项目的定性和定量检测结果与参考品均完全一致(Kappa值=1),检测能力评定等级均为优秀。对4个基层实验室的426份血清样本进行了间接血凝试验(IHA)检测复核,各实验室检测结果的平均符合率为94.13%(92.08%~96.25%),平均Kappa值为0.85(0.83~0.86),平均漏检率为10.19%(0~17.65%)。结论江苏省血吸虫病诊断参比实验室已成功建立并有效运行,对提高全省血吸虫病检测质量和能力提升发挥了积极作用。
- 杭德荣张键锋李伟黄轶昕赵松高琪唐凤熊春蓉姚韵怡杨坤
- 关键词：血吸虫病
