徐嫄
- 作品数：53 被引量：82H指数：5
- 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项北京市科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生化学工程更多>>
- 对猪瘟野毒及其疫苗、非洲猪瘟病毒、猪非典型瘟病毒鉴别诊断的基因芯片以及检测方法
- 本发明涉及一种探针组合物，其是用于对猪瘟野毒及其疫苗、非洲猪瘟病毒、猪非典型瘟病毒进行鉴别诊断的探针组合物；本发明还涉及包含该组合物的基因芯片和试剂盒。
- 张乾义王琴赵启祖徐璐夏应菊万建青郎洪武邹兴启李翠朱元源徐嫄王兆
- 文献传递
- 对猪瘟野毒及其疫苗、非洲猪瘟病毒进行鉴别诊断的基因芯片以及检测方法
- 本发明涉及一种探针组合物，其是用于对猪瘟野毒及其疫苗、非洲猪瘟病毒进行鉴别诊断的探针组合物；还涉及相应的基因芯片和试剂盒。
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- 猪瘟病毒抗体ELISA检测国家级能力验证结果与分析被引量：2
- 2020年
- 猪瘟疫苗免疫是我国猪瘟防控的核心,猪瘟病毒抗体ELISA检测是进行免疫效果评价的最常用手段。中国兽医药品监察所国家/OIE猪瘟参考实验室(以下简称:参考实验室)承担了国家认证认可监督管理委员会(以下简称“认监委”)组织的A类能力验证项目“猪瘟诊断检测技术”(CNCA-19-A01),全面考察和评价我国动物疫病检测机构对猪瘟病毒抗体的检测能力。参考实验室负责制备检测样品,并进行随机编号。向每个参试实验室发放4份待检盲样,由其采用ELISA方法对各盲样进行定性判断,并向参考实验室提供检验结果及原始检验报告。出现“不满意”结果的单位可参加补测1次,若补测结果仍为“不满意”,则表明该实验室暂不具备该参数的检测能力。参加本次能力验证猪瘟病毒抗体检测的实验室共有103家,初测满意率为92.23%,初测和补测的总体满意率为100%。此次能力验证结果表明,参加此次能力比对试验的猪瘟检测机构均能够提供正确的检测结果,可以满足猪瘟病毒抗体监测的需求。通过本次能力验证项目查找出了存在的问题,参试单位可以及时纠正错误,进一步提升猪瘟抗体的检测能力。
- 徐璐夏应菊张乾义张雯雯王震李翠邹兴启朱元源徐嫄王兆赵启祖王琴
- 关键词：猪瘟免疫抗体ELISA
- 猪瘟病毒C株表位突变毒株的构建及拯救
- 2024年
- 本研究旨在突变猪瘟病毒C株WH303位点,构建感染性克隆,为猪瘟病毒C株标记疫苗的研究提供候选毒株。本试验以猪瘟病毒C株为研究材料,经重叠PCR方法突变WH303位点,再分别连接至C株和C-flag株全长感染性克隆。体外转录RNA,转染PK15细胞,细胞连续传代完成病毒的拯救和增殖。结果显示,经特异性限制内切酶酶切反应验证,感染性克隆构建成功。经RT-PCR、过氧化物酶单层细胞试验检测,表明病毒成功拯救。病毒细胞传代至17代,检测到病毒,表明病毒可以稳定传代。综上,本研究成功构建了C株WH303突变感染性克隆MC和MC-flag,并成功拯救MC株,得到可以稳定传代的病毒株。
- 刘元杰徐璐朱元源徐嫄张乾义李翠李明夏应菊王琴刘业兵赵启祖邹兴启
- 关键词：猪瘟病毒C株感染性克隆
- 猪瘟病毒中等致病力毒株在体内的动态分布被引量：1
- 2018年
- 【目的】目前我国猪瘟的感染类型主要是亚急性感染及慢性感染,研究猪瘟亚急性感染后体内病毒RNA和蛋白的分布情况,有助于阐述亚急性病程猪瘟病毒的复制分布规律,为猪瘟的早期诊断和预防奠定重要基础。【方法】成功以中等致病力毒株(HeBHH1/95)构建了亚急性猪瘟感染动物模型,分别采集感染后第1、3、6、10、13、20、24、28天感染猪的十二指肠、脾脏、肾脏、肺脏、胰、回盲瓣6种组织器官并进行连续切片。应用建立的猪瘟病毒可视化原位杂交技术(ViewRNA ISH)研究感染组织中病毒RNA动态分布,同时采用免疫组化(IHC)、H.E染色分别检测感染组织中蛋白的分布情况及其组织损伤位置,从而在病毒核酸和蛋白水平系统性的观察病毒的分布情况。【结果】采用Mittelholzer方法进行临床计分发现感染后6—10 d感染猪猪瘟临床症状记分迅速增加,11—26 d感染猪临床记分一直维持在15分左右,直到28 d临床记分达到最高值20分。感染后8—10 d感染猪体温呈上升趋势;13—24 d感染猪体温呈现稽留热,持续在40℃左右;此后体温开始回落,至濒死前体温回落至39.5℃左右。应用CSFV ViewRNA ISH感染后第1天在十二指肠绒毛杯状细胞及胰腺的腺泡、回盲瓣的固有层、肾脏的肾小管等这些具有分泌功能的结构组织周围检测到病毒RNA阳性信号;感染后第3天在肺脏的细支气管和脾脏的椭圆体周围检测到病毒RNA阳性信号;第13天阳性信号富集显著,至第28天病毒RNA广泛分布在脾脏动脉周围淋巴鞘及胰腺腺泡和肾小管等组织周围。采用IHC和H.E染色法在连续切片的相似视野下验证ViewRNA ISH检测结果,发现感染后第1天十二指肠、胰腺、肾脏亦可检测到病毒蛋白阳性信号和相应组织的病理变化,但回盲瓣在第3天检测到病毒蛋白阳性信号和组织的病理变化,在之后的病程中各组织中病毒RNA、蛋白定位情况�
- 孙骏翔张乾义徐和敏王团结徐璐邹兴启朱元源李翠夏应菊徐嫄陈锴张玉杰赵启祖王琴
- 关键词：猪瘟病毒RNA
- 三剂量浊度法庆大霉素效价测定的不确定度分析被引量：2
- 2017年
- 为了对三剂量浊度法庆大霉素效价测定的不确定度进行评定,按照《测量不确定度评定与表示》(JJF1059.1—2012)中的规定进行计算。测定结果的扩展相对不确定度为U=14单位。庆大霉素原料的测定结果可以表示为639±14单位,k=2。稀释过程的标准操作所占不确定度分量比重最大,提示标准品标定赋值人员应注意操作的规范一致。
- 韩宁宁戴青于丽娜王静文徐嫄赵晖
- 关键词：庆大霉素浊度法
- 高效液相色谱-二极管阵列检测器用于兽药非法添加物质检查的优劣性分析被引量：8
- 2016年
- 阐述了高效液相色谱-二极管阵列检测器在兽药非法添加物质检查应用中的优势与局限:其优势在于方法特异性强、仪器普及面广、操作简单;局限在于无法鉴别光谱图库外的未知化合物,部分化合物在不同色谱条件下光谱图差异大难溯源,无法检出无紫外吸收的化合物。另外,进一步对应用该法的发展趋势进行了展望,以期对兽药非法添加打击治理工作提供参考。
- 韩宁宁徐嫄于丽娜张璐戴青赵晖
- 关键词：兽药非法添加
- 高效体积排阻色谱法定量检测口蹄疫疫苗中146S的疫苗预处理方法被引量：4
- 2019年
- 旨在建立一种口蹄疫灭活病毒疫苗的处理方法,去除尺寸排阻色谱法(HPSEC)检测146S抗原过程中的杂质干扰,获得最佳的检测信号并实现146S抗原含量的准确测定。分别考察了超速离心法、PEG沉淀法、核酸酶消化法对两批疫苗样品中的HPSEC检测干扰杂质的去除效果。在优化条件下,超速离心法处理后146S检测结果分别为7.1、7.6 μg/mL,PEG沉淀法为9.7、10.4 μg/mL;酶消化法处理后的检测值最高,分别为10.5、10.4 μg/mL,且杂质去除完全、处理速度快、操作条件温和。通过响应面法确定最优酶消化处理条件如下:200 μL水相中添加终浓度421 U/mL的Benzonase,25.1 ℃下反应1.29 h。在该最优条件下,对4家企业各3种不同血清型共12批疫苗样品进行146S含量检测,结果表明建立的方法对不同疫苗均有良好适用性,且重复性好(RSD<5.3%,n=3)。通过该处理方法,解决了杂质对146S定量检测的干扰,扩大了HPSEC检测技术的应用范围,进一步确保了检测结果的准确可靠。
- 宋艳民杨延丽苏志国刘丽丽朱元源徐嫄邹兴启赵启祖张松平
- 关键词：口蹄疫疫苗酶消化
- 猪瘟病毒化学发光竞争ELISA抗体检测试剂盒的应用研究被引量：5
- 2020年
- 为了验证猪瘟病毒化学发光竞争ELISA抗体检测试剂盒的临床应用效果,对6个地区的2200份血清样本进行检测,并采用进口试剂同步检测,比较2种试剂盒的一致性;田间筛选了391份猪瘟抗体阴性和阳性血清,采用该试剂盒与荧光抗体病毒中和试验同时进行检测,比较试剂盒的一致性;为了进一步验证对免疫抗体的检出情况,采用本试剂盒定期对猪瘟疫苗免疫后抗体消长情况进行检测。结果显示:本试剂盒与进口试剂盒具有高度的一致性(Kappa值为0.78);与荧光抗体病毒中和试验的结果几乎完全一致(Kappa值为0.908);免疫后18 d,所有免疫猪的抗体全部转阳。
- 徐璐张乾义夏应菊任雪健李翠邹兴启徐嫄王兆赵启祖王琴
- 关键词：猪瘟化学发光免疫分析
- 那西肽预混剂质量分析被引量：4
- 2016年
- 通过对那西肽预混剂检验与研究，对其质量进行分析，并对现有标准进行修订。依据现有标准，对那西肽预混剂进行常规检验，对标准进行了修订并确定质量控制关键点；根据文献检索和调研等情况，开展了含量均匀度、那西肽组分A、含量测定等3个方面的探索研究。建议取消标准中关于性状的规定；调整TpH值的规定限度范围为6．0～8．0；补充建立了那西肽组分A的测定方法，拟规定限度为不小于88．0％；以N,N-二甲基甲酰胺为溶剂，修订了那西肽预混剂含量测定方法。
- 于丽娜韩宁宁徐嫄郝利华戴青赵晖
