王巍
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 重组鸡IFN-α的高效表达与一步复性和纯化被引量：3
- 2010年
- 通过在线网站以及生物学软件分析,将天然鸡IFN-α基因中的稀有密码子同义替换为大肠杆菌偏好的密码子。优化后的基因经人工合成后与温控型表达载体pWL连接并转入大肠杆菌中进行诱导表达,经SDS-PAGE分析,表达产物的分子质量约为19 ku,表达量占总蛋白的28.3%。表达产物主要以包涵体形式存在,用高浓度变性剂溶解后,采用Sephadex G50凝胶过滤一步复性并纯化重组鸡IFN-α,纯度可达98%以上。每1 L培养基可以得到47.1 mg的重组鸡IFN-α,产出率达34.14%。表达的重组鸡IFN-α在CEF/NDV检测系统上的比活性为1.12×108U/mg。
- 魏双施王艺萌王巍孙仰峰王君伟
- 关键词：Α-干扰素一步法
- 鹅IFN-α基因的高效表达被引量：7
- 2009年
- 通过对鹅IFN-α成熟蛋白基因的分析,利用在线软件,将序列中稀有密码子改为优势密码子,优化了密码子适应性指数,更多地采用了利于表达的密码子对,优化了表达的起始区域和终止区域mRNA的二级结构及自由能。然后,将人工合成的鹅IFN-α基因与表达载体pWL连接后诱导表达。SDS-PAGE分析表明,所表达蛋白的分子质量为18.83 ku,蛋白表达量占菌体总蛋白的35.3%。表达产物以包涵体形式存在。复性、纯化后的鹅IFN-α重组蛋白的纯度达98%,活性达1.28×107U/mL。
- 王巍孙仰峰魏双施李文辉王君伟
- 关键词：纯化生物学活性
