王恩多
- 作品数:117 被引量:210H指数:7
- 供职机构:中国科学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生化学工程历史地理更多>>
- 分泌表达戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶基因的新菌株
- 王恩多郑勇刚陈剑峰李勇姜卫红杨蕴刘赵国屏
- 研究了一种含有从假单胞菌(Pseudomonas sp.130)中克隆的戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶基因及带有卡纳霉素抗性的重组表达质粒以及该基因在大肠杆菌中分泌的高表达。其表达的GL-7ACA酰化酶直接分泌到周质空间...
- 关键词:
- 关键词:基因工程菌分泌表达
- 带有氯霉素抗性的分泌高产戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶的菌株
- 王恩多李勇陈剑峰郑勇刚姜卫红杨蕴刘赵国屏
- 成果涉及到一种分泌型及带有氯霉素抗性的高产GL-7ACA酰化酶的新型基因工程菌。与已知的GL-7ACA酰化酶分泌型表达菌株相比,分泌表达:有利于生产;以氯霉素抗性取代了氨苄青霉素抗性:虽然已构建了带有卡纳霉素的抗性的GL...
- 关键词:
- 关键词:基因工程菌
- 钙蛋白酶通过水解多合成酶复合体(MSC)调控其成员的多种生物学功能
- 雷辉燕王恩多
- 蛋白质与核酸的相互作用被引量:1
- 1991年
- (一)复制、转录和翻译水平上蛋白质与核酸的相互作用蛋白质和核酸是组成生物体的两大重要物质。蛋白质是基因表达的产物,基因的表达离不开蛋白质。它们相互依存,彼此制约。蛋白质与核酸的相互作用存在于生物体内基因表达的各个水平之中。在DNA复制过程中,链的引发、延伸、终止所涉及的反应都由相应的酶催化,还需要许多具有调节功能的蛋白质对DNA复制进行调节。在大肠杆菌中,复制过程就需要三十多种蛋白质的协同作用。研究DNA聚合酶、拓扑异构酶、解链酶、解旋酶。
- 王恩多
- 关键词:蛋白核酸相互作用
- 人线粒体tRNA修饰碱基与遗传性脑肌病被引量:2
- 2006年
- 人的多种遗传疾病与线粒体tRNA基因突变有关,这些突变导致疾病发生的分子机理是当前研究的热点.通过研究线粒体tRNA分子上的碱基修饰情况,人们发现了一类特殊的带有牛磺酸衍生物基团的修饰,这类修饰主要位于线粒体tRNALys和线粒体tRNALeu(UUR)反密码子第一位摆动(wobble)位点的碱基上.最近的研究表明,位于这两种线粒体tRNA基因上的多种突变与遗传性脑肌病相关,包括A8344G,A3243G,T3271C等等,它们可以导致tRNA上相应摆动位点的碱基修饰缺失.无论是在体外培养的带有相应突变的细胞内,还是在来源于脑肌病病人的组织中,科学家都发现了相同的线粒体tRNA碱基修饰缺陷.通过分子手术证实,此类碱基修饰对于维持这两种tRNA的反密码子与mRNA上相应密码子的相互识别至关重要,缺失了这种修饰的tRNA将无法识别一些对应的密码子.通过进一步的实验,人们还鉴定出负责催化此类碱基修饰的酶.这些研究不但揭示了线粒体遗传性脑肌病相关突变的致病机理,也将为研究基因治疗提供可能的新手段.
- 郝睿王恩多
- 关键词:脑肌病分子机理
- 大肠杆菌等受体tRNA^(Leu)的T7 RNA聚合酶转录
- 1999年
- 用化学方法合成编码 2个大肠杆菌tRNALeu(tRNALeu1和tRNALeu2 )的基因和T7启动子 ,分别克隆到pUC1 9载体上 ,并在纯化的T7RNA聚合酶的体外转录系统中转录出不含修饰核苷酸的tRNALeu.在T7转录体系中 ,亚精胺对转录有负影响 .在最适转录条件下 ,可以得到有活力的RNA转录物的量是模板DNA的 2 5 0倍左右 .在大肠杆菌亮氨酰 tRNA合成酶的催化下 ,2种经体外转录产生的未修饰等受体tRNALeu(tRNALeu1和tRNALeu2 )的亮氨酸接受能力基本相同 ,但只有从体内纯化对应的tRNALeu的四分之一左右 ,表明修饰核苷酸在tRNALeu氨酰化过程中起着较为重要但非关键的作用 .
- 李勇陈剑峰王恩多王应睐
- 关键词:TRNA大肠杆菌
- 戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶的蛋白质工程
- 王恩多李勇陈剑峰郑勇刚姜卫红毛翔杨蕴刘赵国屏
- 本发明公开了一种获取戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶基因的方法,目的是提供一种快速从土壤中获取戊二酰-7-氨基头孢烷酸(GL-7-ACA)酰化酶基因的方法。本发明所提供的方法是在提取土壤微生物的戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化...
- 关键词:
- 关键词:7-氨基头孢烷酸酰化酶蛋白质工程
- 哺乳动物氨基酰-tRNA合成酶复合物中三个辅助因子在分子信号网络中的重要作用被引量:3
- 2009年
- 氨基酰-tRNA合成酶是一类古老而保守的蛋白质,它们催化蛋白质生物合成的第一步反应.哺乳动物细胞内存在一个由8种氨基酰-tRNA合成酶和3种辅助因子组成的氨基酰-tRNA合成酶复合物.近年来,陆续发现该复合物中的3个辅助因子p43、p38和p18在复合物外的多种生命活动中扮演着重要角色:辅助因子p43是细胞因子内皮单核细胞激活肽Ⅱ的前体,参与了血管生成和细胞凋亡等许多生命过程;辅助因子p38在肺部发育中至关重要,同时它在神经细胞中的不正确积累可能与帕金森病有关.更有趣的是,辅助因子p38和p18可以在时空上高度有序地通过不同的通路参与细胞对DNA损伤的修复.这些研究增加了对于氨基酰-tRNA合成酶和细胞内大分子信号网络之间关系的认识,并将促进对该领域的研究与发展.
- 贺然王恩多
- 关键词:哺乳动物氨基酰-TRNA合成酶DNA损伤修复信号网络
- 带有氯霉素抗性的分泌高产戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶的菌株
- 本发明提供了一种从假单胞菌中克隆并经基因工程改造得到的长为2.5kb的重组GL-7ACA酰化酶基因及其表达元件和信号肽的序列。构建了该基因的高分泌表达重组质粒pSuperCA1S,该质粒转化至大肠杆菌菌株TG1中,得到的...
- 王恩多李勇郑勇刚陈剑峰姜卫红赵国屏杨蕴刘
- 戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶
- 一种从假单胞菌中克隆的并经基因工程方法改造的,长为2.3kb的GL-7ACA酰化酶基因,并测得其全序列。构建了该基因的高表达重组质粒pKKCAl,该质粒转化至大肠杆菌菌株JM109,得到的基因工程菌株JM109/pKKC...
- 王恩多李勇姜卫红赵国屏杨蕴刘