张慧
- 作品数：62 被引量：86H指数：5
- 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项中国食品药品检定研究院中青年发展研究基金“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术生物学化学工程更多>>
- 均相时间分辨荧光法测定人胰岛素生物学活性被引量：1
- 2022年
- 建立基于均相时间分辨荧光免疫分析技术的人胰岛素体外生物学活性测定方法。利用CHO-INSR B1284转基因细胞,通过均相时间分辨荧光免疫分析系统检测人胰岛素的体外生物学活性;对靶细胞铺板密度、药物的量效范围、刺激时间等关键参数进行优化;验证方法的专属性、相对准确度、中间精密度、线性与范围,以及细胞的传代稳定性;以重组人胰岛素国家标准品为参比品,将本研究建立的方法应用于其他人胰岛素类似物原料药、制剂的生物学活性测定。结果表明人胰岛素及其类似物存在剂量效应曲线,R^(2)>0.995,符合四参数方程y=(A-D)/[1+(x/C)^(B)]+D。本方法专属性良好,64%、80%、100%、125%、156%共5个效价浓度的待测品相对效价(n=8)的几何均值、相对偏倚、几何变异系数(GCV,%)均符合《中华人民共和国药典》2020版四部通则9401的要求;且方法可适用于其他胰岛素类似物的生物学活性测定。该方法操作简便、耗时短、准确度高、精密度好,可用于胰岛素类产品的生物学活性评价和质量控制。
- 王绿音杨艳枫张孝明吕萍张慧李晶梁成罡
- 关键词：生物学活性人胰岛素转基因细胞
- 报告基因法测定人绒毛膜促性腺激素生物活性
- 2024年
- 本研究根据人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)与受体结合后激活cAMP信号通路,构建一种LHCGR-CRE-luc-HEK293转基因细胞系,采用荧光素酶检测系统对hCG进行生物活性检测,利用四参数拟合分析计算样品相对效价。并且对该方法条件进行优化,对方法的专属性、相对准确度、精密度和线性进行验证。结果显示,hCG浓度与报告基因表达量存在量效关系,且符合四参数曲线。经优化后,条件确定为hCG初始浓度为2.5μg·mL-1,稀释倍数为1∶4,细胞数为每孔10000~15000个,诱导时间为6 h。该方法具有良好的专属性,相对准确度的相对偏倚范围在-8.9%~3.4%,线性回归方程相关系数为0.996,中间精密度几何变异系数范围为3.3%~15.0%,线性范围为50%~200%。本研究成功建立并验证了一种报告基因法检测hCG生物学活性,可以用于hCG生物活性检测和质量控制。
- 黄盈张孝明李鹤洋王绿音张慧吕萍李晶高向东梁成罡
- 关键词：人绒毛膜促性腺激素生物活性
- PEG化重组尿酸氧化酶蛋白含量测定方法研究
- 2014年
- 目的：以未修饰的原型蛋白为对照品，建立准确测定2种聚乙二醇化重组尿酸氧化酶（PEG-rUOX）含量的方法。方法：以原型蛋白rUOX为对照品，利用凝胶色谱法测定PEG-rUOX中的蛋白含量，通过详细的专属性、精密度、准确性等方法学考察，建立该方法。色谱条件：采用TSK Gel 5000PWxl（300 mm×7.8 mm）凝胶色谱柱，以含0.15 mol/L氯化钠的0.05 mol/L的Tris-HCl溶液（pH9.0）为流动相，流速0.5 mL/min，柱温为室温，检测波长280 nm。结果：在280 nm下，2种rUOX在200~1000μg/mL浓度范围内线性关系良好（r2分别为1和0.9999），其高、中、低平均回收率均较高，为98.33%~99.96%。结论：本方法专属性、精密度和准确性良好，可作为PEG-rUOX的含量测定方法。
- 李晶苑方园程速远张慧梁成罡
- 关键词：凝胶色谱蛋白含量
- 人用聚乙二醇化重组蛋白及多肽制品总论增订概况被引量：1
- 2022年
- 《中国药典》2020年版(三部)新增了人用聚乙二醇化重组蛋白及多肽制品总论。本文依照其总论体例,阐述了研究起草过程中所遵循的基本原则,重点详述了所关注的技术要点及相应研究结果,旨在为本领域内相关研发和质控人员更好地理解和应用总论提供参考。
- 李晶张慧李懿张孝明吕萍梁成罡
- 关键词：聚乙二醇化重组蛋白多肽
- 人胰岛素及其类似物国家标准增修订概况
- 2022年
- 本文介绍了2020年版(三部)人胰岛素及其类似物国家标准增修订概况,包括标准起草过程的基本原则和技术考量,并就关键项目在中国药典、欧洲药典和美国药典的协调性方面进行了分析,旨在为本领域内相关研发和质控人员更好地理解和使用人胰岛素及其类似物药典标准提供参考。
- 梁成罡张慧丁晓丽李晶吕萍李湛军
- 关键词：人胰岛素人胰岛素类似物
- 首批普罗雌烯国家标准物质标定
- 2024年
- 目的为满足国内普罗雌烯及相关制剂质量控制的需要,研制并标定首批普罗雌烯国家标准品。方法采用高分辨质谱、核磁共振波谱、红外光谱以及紫外光谱对待标品进行定性及结构确认;对待标品进行了理化分析;根据不同国家药品标准方法分别对待标品进行了纯度分析,通过质量平衡法进行赋值,并通过核磁定量进行验证,并对待标品的均匀性和稳定性进行了考察。结果待标品与普罗雌烯同质,经质量平衡法赋值含量为99.6%;均匀性考察符合要求;本品应在10~30℃保存,遮光、密封。结论本批待标品确认为普罗雌烯,以C_(22)H_(32)O_(2)计,含量为99.6%,可以作为首批普罗雌烯国家标准品,可作为普罗雌烯及相关制剂鉴别和含量测定用对照品。
- 张伟张慧徐翊雯任智奇梁成罡
- 关键词：国家标准物质普罗雌烯结构确证
- 多种PEG化重组人生长激素中蛋白含量测定的通用型方法的建立被引量：5
- 2014年
- 目的：通过以未修饰的原型蛋白为对照品,建立准确测定多种聚乙二醇化重组人生长激素（PEG-rhGH）中蛋白含量的通用型方法。方法：采用rhGH国家对照品和凝胶色谱法测定PEG-rhGH中的蛋白含量。通过详细的专属性、精密度、准确性等方法学考察,建立该方法。色谱条件：采用TSKGel 3000SWxl（300 mm×7.8mm）凝胶色谱柱,以0.05 mol·L-1的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠（pH7.0）为流动相,流速为0.6 mL·min-1,柱温为室温,检测波长为280 nm。通过将测定结果与申报企业原有方法测定结果进行比对,对现有含量测定方法进行评价。结果：由于PEG与蛋白质之间的连接子存在双键,在214 nm下,3种PEG-rhGH的测定结果的准确性较差,平均回收率（n=9）分别为109.3%、109.9%、110.6%;而在280 nm下,rhGH在200-1800μg·mL-1浓度范围内线性关系良好（r=0.9999）,3种PEG-rhGH的平均回收率（n=9）分别为101.2%、101.7%、100.4%。结果比对中发现,新建方法与企业申报方法中采用同质对照品的HPLC法测定结果相当,但与以BSA为对照品的Lowry法测定结果相差较大。结论：本方法专属性、精密度和准确性良好,可作为多种PEG-rhGH含量测定的通用型方法。
- 李晶何辉程速远张慧梁成罡
- 关键词：凝胶色谱
- 第二代WHO 重组人胰岛素样生长因子-1(IGF-1) 国际对照品的国际协作标定
- 2022年
- 英国国家生物制品检定所(NIBSC)组织国际协作标定以建立世界卫生组织(WHO)第二代重组人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的国际对照品。标定分2个阶段,中国食品药品检定研究院参加了第1阶段的标定工作。以初级校准物(PS01)为对照品,采用高效液相色谱法进行试验,以标准曲线法对IGF-1待标品的含量进行计算。结果显示,本实验室系统适用性试验结果均符合要求,平行3次试验结果(分别为每安瓿32.874、33.099及33.042μg)均被采纳,平均值为每安瓿33.005μg,与待标品(19/166)的最终赋值(每安瓿33.0μg)基本一致。目前IGF-1待标品(19/166)已作为第二代IGF-1国际对照品在NIBSC网站进行公布使用。本研究对我国国家对照品的建立与标定有良好的示范及借鉴意义。
- 丁晓丽李懿张慧李晶梁成罡
- 关键词：高效液相色谱法
- 一种克服质量歧视效应的聚乙二醇测定方法及应用
- 本发明涉及产品质量控制技术，具体公开了一种克服质量歧视效应的聚乙二醇测定方法及应用，利用电喷雾检测器对聚乙二醇进行定量分析，所述聚乙二醇为单一分子量或为不同分子量的聚乙二醇混合物。本发明首次发现了利用电喷雾检测器检测聚乙...
- 张伟张慧李晶梁成罡
- 糖蛋白的双酶处理法
- 本申请涉及糖蛋白的双酶处理法，是将糖苷酶与胰蛋白酶同时加入样品中进行处理。本申请的双酶处理法可用于处理诸如重组人促卵泡激素(rhFSH)这样的糖蛋白，例如用于rhFSH的N端不均一性分析和肽图检测。
- 李晶梁成罡张慧吕萍李湛军王绿音李懿张伟孙悦
