苏平
- 作品数：44 被引量：63H指数：6
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- 一种分离的CYP450蛋白及其编码基因与应用
- 本发明涉及一种雷公藤细胞色素p450氧化酶CYP81AM1，以及该酶在合成松香烷型二萜类化合物中的应用。所述酶具有催化脱氢松香酸进一步氧化生成15‑羟基脱氢松香酸的生物学功能。本发明还涉及所述酶的编码基因、包含所述基因表...
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- 雷公藤贝壳杉烯酸氧化酶基因的全长cDNA克隆与表达分析33
- 贝壳杉烯酸氧化酶(kaurenoic acid oxidase)是二萜赤霉素生物合成途径上的关键酶,参与植物生长发育等重要生物学过程.本文根据雷公藤转录组数据设计特异性引物,采用PCR技术克隆得到贝壳杉烯酸氧化酶全长cD...
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- 关键词：雷公藤克隆生物信息学分析
- 雷公藤焦磷酸合酶TwCPS4及其制备松香烷型二萜化合物的应用
- 一种新的雷公藤柯巴基焦磷酸合酶TwCPS4及其编码基因，TwCPS4在诱导初期雷公藤二萜化合物的合成过程中起重要作用。催化实验表明TwCPS4与丹参SmKSL1联合使用，能够以GGPP为底物合成松香烷型二萜前体，证实了T...
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- 文献传递
- 雷公藤乙酰CoA酰基转移酶基因全长cDNA克隆及表达分析被引量：11
- 2015年
- 研究根据雷公藤悬浮细胞转录组数据库设计引物,对雷公藤悬浮细胞乙酰辅酶A酰基转移酶(acetyl-Co A C-acetyltransferase)基因Tw AACT进行全长c DNA(Gene Bank:KP297934)克隆以及生物信息学分析和基因表达分析。克隆得到Tw AACT c DNA全长为1 704 bp,编码405个氨基酸,等电点为6.10,相对分子质量为41.20 k Da,在线预测表明Tw AACT具有2个催化活性位点。雷公藤悬浮细胞经茉莉酸甲酯(Me JA)外源诱导后,通过荧光定量PCR表明,Tw AACT相对表达量明显增加,在24 h达到最高。研究首次克隆得到雷公藤AACT基因,为进一步阐述雷公藤萜类生物合成途径奠定基础。
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- 关键词：雷公藤克隆生物信息学分析基因表达分析
- 雷公藤细胞色素p450氧化酶在制备松香烷型二萜化合物中的应用
- 本发明涉及一种雷公藤细胞色素p450氧化酶TwCYP728B70，以及编码所述酶的多核苷酸TwCYP728B70，所述酶催化实验证实其完成连续两步氧化反应，即氧化松香烷型二萜前体次丹参酮二烯(miltiradiene)及...
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- 文献传递
- 雷公藤TwKS与TwCPS3在制备贝壳杉烷型二萜化合物中的应用
- 本发明涉及雷公藤柯巴基焦磷酸合酶TwCPS3和雷公藤贝壳杉烯合酶TwKS在制备贝壳杉烷型二萜中的应用。通过对雷公藤柯巴基焦磷酸合酶基因TwCPS3和雷公藤贝壳杉烯合酶基因TwKS进行重组表达，在重组蛋白的催化下，成功的以...
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- 文献传递
- 丹参类贝壳杉烯氧化酶(SmKOL)基因全长克隆及其生物信息学分析被引量：1
- 2014年
- 根据丹参转录组数据提供的基因片段设计特异引物,采用RACE方法克隆类贝壳杉烯氧化酶(Sm KOL)全长c DNA,并进行生物信息学分析;采用实时定量PCR检测茉莉酸甲酯(Me JA)诱导丹参毛状根不同时期的Sm KOL表达水平。克隆得到的Sm KOL全长c DNA由1 884个核苷酸组成,具有完整编码框,编码519个氨基酸,蛋白相对分子质量约为58.88 k Da,等电点p I 7.62;实时定量PCR结果表明该基因受Me JA诱导后,表达水平在36 h时达到最大值。从丹参毛状根中克隆得到1条Sm KOL全长c DNA,为进一步研究该基因的功能和丹参次生代谢调控机制提供了靶基因。
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- 关键词：丹参CDNA末端快速扩增生物信息学分析
- 瑞香狼毒贝壳杉烷型二萜类合成酶功能表征
- 2024年
- ent-柯巴基焦磷酸合酶(ent-copalyl diphosphate synthase,CPS)与ent-贝壳杉烯合酶(ent-kaurene synthase,KS)的连续催化是植物以香叶基香叶基焦磷酸(geranylgeranyl pyrophosphate,GGPP)为底物开启赤霉素生物合成路径的关键步骤。该研究通过分析与挖掘瑞香狼毒的转录组数据,成功克隆得到赤霉素途径的2个关键二萜合酶基因SchCPS和SchKS。二者完整开放阅读框分别为2595、1701 bp,编码864、566个氨基酸残基,生物信息学分析预测其相对分子质量分别为97.9、64.6 kDa,理论等电点为5.61、6.12,均为亲水性蛋白。序列比对及系统发育树显示,SchCPS蛋白含有CPS基因家族保守的LHS、PNV及DxDD基序,归类于TPS-c亚家族;SchKS蛋白含有KS基因家族保守的DDxxD、NSE/DTE和PIx基序,归类于TPS-e亚家族。功能验证结果表明,SchCPS可催化GGPP质子化并环化成ent-CPP,SchKS则作用于ent-CPP去磷酸化并再次环化生成贝壳杉烯。该文首次从瑞香狼毒中克隆获得SchCPS与SchKS全长基因,并完成功能验证,不仅丰富了现有的CPS和KS基因库,也为瑞香狼毒中更多活性成分基因的克隆与生物合成途径解析奠定了基础。
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- 关键词：瑞香狼毒生物信息学
- 雷公藤甲素生物合成萜类合酶及CYP450基因克隆及功能研究
- 雷公藤甲素(triptolide)被公认为雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook.f.)中主要活性成分之一，研究表明雷公藤甲素具有明显的抗炎、免疫抑制、抗肿瘤等重要生物活性，并对治疗中枢神经系统疾...
- 苏平
- 关键词：雷公藤甲素生物合成
- 雷公藤倍半萜合酶TwNES及其编码基因与应用
- 本发明公开了雷公藤倍半萜合酶TwNES及其编码基因与应用。本发明从雷公藤悬浮细胞中克隆得到Twnes基因。该基因是首次从雷公藤中得到的倍半萜类成分合成的关键酶基因。通过实验证明：本发明的TwNES蛋白既能够催化FPP形成...
- 高伟黄璐琦苏平周家伟胡添源
- 文献传递
