李一经
- 作品数：503 被引量：1,361H指数：17
- 供职机构：东北农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省“十五”科技攻关项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 昆明鼠对猪轮状病毒核酸免疫的抗体应答被引量：2
- 2004年
- 将昆明鼠随机分为A、B两组,分别肌肉注射含有猪轮状病毒(RV)JL94株VP7基因的重组真核表达质粒pcDNA-VP7和真核表达载体pcDNA3.1(+),每只鼠100μg·(100μL)-1,共免疫3次,每次间隔2周。首次免疫第0,14,21,28,35,39,47,54天采血分离血清用ELISA法检测抗体动态变化。A组小鼠血清在首免后第14天即可检出阳性抗体(P/N≥2.0)。
- 师东方贾永清李一经王君伟马波刘宝全
- 关键词：轮状病毒VP7基因核酸免疫抗体
- 猪细小病毒HLJ-DN株分离鉴定被引量：1
- 2014年
- 按照常规病毒分离方法,从黑龙江省某猪场怀孕母猪所产死胎的肝脏中分离到一株病毒。利用ST细胞进行培养,通过血细胞凝集试验、间接免疫荧光试验及电镜观察等对新分离毒株进行鉴定。结果表明,该病毒能在ST细胞上生长并引起明显拉网状细胞病变,按Reed-Muench法计算出TCID50为10-4.6·0.1 mL-1;通过电镜观察可见直径约为20 nm无囊膜的病毒粒子,该病毒能凝集0.5%的豚鼠红细胞,免疫荧光试验显示在细胞上出现明显荧光,能与特异性抗体发生反应。对VP2基因进行扩增及测序并与GenBank已发表PPV毒株序列进行比对分析,结果显示该毒株与WB-143株在同一个分支里,同源性高达到99.8%,说明分离的病毒为猪细小病毒,命名为HLJ-DN,该病毒的分离为研究当地猪细小病毒的流行、预防和治疗奠定。
- 刘秀芬姜艳平唐丽杰李一经
- 关键词：猪细小病毒ST细胞VP2基因
- 竞争性DOT-ELISA法检测TGEV的研究被引量：2
- 2007年
- 李丹丹唐丽杰姜骞李一经
- 关键词：TGEV检测试剂猪传染性胃肠炎病毒重组N蛋白抗原制备冠状病毒科
- 抗传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白单克隆抗体的制备被引量：2
- 2013年
- 利用纯化后的传染性胰腺坏死病毒(IPNV VP3)重组蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术,采用间接ELISA和有限稀释法筛选杂交瘤细胞,利用染色体鉴定、蛋白印迹和免疫荧光等方法对单克隆抗体进行鉴定,共得到2株能稳定分泌特异性抗体的阳性细胞株,分别命名为2F1、4A7,亚类鉴定2株单抗均为IgG1亚类。ELISA检测其腹水效价,蛋白印迹检测表明获得的2株单抗均能特异性识别IPNV VP3蛋白;间接免疫荧光鉴定表明2株单抗均与IPNV发生反应;间接ELISA检测结果表明2株单抗均不与HSV、SVCV、HRV等病毒反应,与IPNV具有较强的特异性反应。
- 刘立月刘巍巍赵丽丽葛俊伟唐立杰刘敏李一经
- 关键词：VP3蛋白单克隆抗体
- 1株E亚群禽白血病病毒的分离鉴定及遗传进化分析被引量：5
- 2022年
- E亚群禽白血病病毒(ALV-E)是指存在于鸡染色体中的内源性逆转录病毒基因组DNA或片段。具有转录活性的ALV-E既会对鸡的生产性能(体重和产蛋率)产生负面影响,又能从抗体水平干扰对外源性ALV的鉴别诊断。为对黑龙江省某鸡场内一禽白血病病毒RT-PCR阳性病料进行病毒分离鉴定及分析其基因组特征和遗传进化情况,通过分子生物学、病毒形态学及全基因组序列测定方法对病毒培养物进行鉴定和分析,结果显示,该分离株可在CEF细胞盲传至第9代,电镜下可观察到近似球形、直径约为80 nm,并具有囊膜和纤突结构的病毒粒子,将其命名为HLJE2020株。序列分析结果显示,其全基因组序列中的gag和pol基因相对保守,LTR和env基因与ALV-E同属一个进化分支,而gp85基因则与ALV-E和ALV-B均具有较高相似性,遗传进化分析显示在ALV-E和ALV-B间出现一个单独的分支,结合RDPv.4和SimPlot软件分析结果,推测该毒株gp85基因可能存在E亚群AF229株与B亚群SDAU09C1株的重组现象。本研究为了解禽白血病病毒基因组遗传演化情况提供数据资料,并为ALV的防控提供参考和依据。
- 王萌张森豪张柳李佳璇王晓娜崔文崔文周晗姜艳平乔薪瑗周晗唐丽杰
- 关键词：禽白血病病毒基因组分析
- 一种同时表达产气荚膜梭菌α、β2、ε、β1外毒素的重组乳酸杆菌及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种同时表达产气荚膜梭菌α、β2、ε、β1外毒素的重组乳酸杆菌及其构建方法和应用。本发明以从基因水平去毒性化改造的产气荚膜梭菌α、β1、β2和ε外毒素为免疫原，改造后的外毒素完全失去致病性，但仍保留其免疫原性...
- 徐义刚王丽李一经唐丽杰乔薪瑗
- 文献传递
- 猪传染性胃肠炎病毒TH-98株S基因5′端部分片段克隆及序列分析被引量：3
- 2004年
- 本研究扩增出猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV) TH- 98株 S基因 5′端 6 72 bp片段 (TS1) ,包括 B、C两个主要抗原位点。将该片段克隆到 p MD 18- T载体上 ,经鉴定 TS1片段正确插入 p MD 18- T载体上。序列测定和分析表明 ,该片段的核酸序列与国外 TGEV毒株 Miller,Purdue15 ,FS772 /70等有很高的同源性 ,达 96 .88%以上 ,氨基酸同源性为 95 .0 9%以上 ,抗原位点 C(S蛋白第 4 8位氨基酸 )的丝氨酸变为脯氨酸。本研究首次克隆国内分离株 TH- 98株 S基因含有抗原位点 B、C且在 PRCV中缺失的片段。为进一步揭示 TGEV强弱毒株差别的分子机制和分子诊断的研究奠定了重要基础。
- 胡森王君伟姜骞李一经
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒S基因克隆
- 大肠杆菌油佐剂灭活苗免疫雏鸡抗体消长规律的研究被引量：4
- 1994年
- 本试验用鸡源致病性大肠埃希氏菌Ｏ２血清型制成的油佐剂灭活苗对１５日龄雏鸡进行免疫接种，以测定其抗体消长规律；对免疫后不同抗体滴度的雏鸡进行了攻毒试验．结果表明，免疫１周后可监出抗体，２～３周抗体达到高峰，抗体可持续１０周左右．抵抗同型大肠杆菌攻霉的最低抗体滴度为１：１６～１：３．免疫保护期可达２个目以上．
- 李一经吕加平杨庆霞
- 关键词：抗体油佐剂灭活苗雏鸡大肠杆菌
- 巴斯德毕赤酵母(P pastoris)表达系统被引量：2
- 2004年
- 近年来，基因工程菌被广泛用于商业化生产外源蛋白。原核生物作为基因工程表达系统简单而易培养，有其一定的优点，但也存在着一定的缺陷，如不能对表达蛋白进行糖基化等翻译后修饰，特别是对核基因的表达，可能导致产物失去生活活性。自1981年Hitzeman等首次在酿酒酵母中表达了人重组干扰素基因后，相继又有多种外源基因表达成功。与大肠杆菌不同的是，酵母可对异源蛋白进行修饰，采用有信号肽的质粒时，蛋白能被正确折叠和加工，然后分泌到培养基中；
- 邹运明李一经邹丽红
- 关键词：基因工程宿主菌
- 传染性胰腺坏死病毒VP2 COE蛋白单克隆抗体的制备与初步应用被引量：9
- 2013年
- 为制备抗IPNV VP2蛋白的单克隆抗体,对其基本特性进行鉴定并进行初步应用。实验利用Ni-NTA亲和层析纯化的IPNV VP2 COE重组蛋白作为免疫原,免疫8周龄的雌性BALB/c小鼠,经3次免疫后,将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞融合。采用间接ELISA和有限稀释法筛选杂交瘤细胞,共得到2株能稳定分泌特异性抗体的阳性细胞株,分别命名为5G10和5F3,亚类鉴定均为IgG1亚类。2株杂交瘤细胞的染色体数目在75～120之间。间接ELISA检测5G10和5F3细胞培养上清的效价分别为1∶105、1∶102,腹水效价分别为1∶108、1∶104。Western-blotting和间接免疫荧光鉴定结果显示,2株单抗均能特异性地识别IPNV。间接ELISA表明,2株单抗不与IHNV、VHSV、SVCV、HRV等病毒反应,说明获得的单抗具有高度的特异性。相加ELISA实验结果显示,2株单克隆抗体分别识别IPNV VP2蛋白上不同的抗原位点。应用间接免疫荧光方法对临床确定为患有IPN虹鳟肝组织进行检测,结果证实该2株单克隆抗体可用于后续实验。
- 连科迅赵丽丽张琳琳贾鹏唐立杰葛俊伟李一经刘敏
- 关键词：单克隆抗体
