李小宇
- 作品数：57 被引量：66H指数：6
- 供职机构：吉林省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项吉林省自然科学基金吉林省科技厅重点项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- Carboxin抗性基因(Cbx^R)原核表达及多克隆抗体的制备被引量：2
- 2015年
- [目的]克隆CbxR基因,进行原核表达,纯化CbxR基因蛋白并制备其多克隆抗体。[方法]CbxR基因克隆至原核表达载体p ET-28a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达并纯化,Western blot鉴定分析。制备CbxR蛋白的兔源多克隆抗体,运用间接ELISA方法检测多抗效价,利用Western blot印记检测抗体特异性。[结果]成功获得CbxR基因,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导可大量表达,成功制备CbxR蛋白兔源多克隆抗体,效价为1∶64 000,经Western blot检测表明多克隆抗体特异性良好。[结论]多克隆抗体为CbxR检测及进一步研究CbxR基因功能奠定了基础。
- 李小宇张正坤王秋华张春雨张淋淋尤晴杨凤升王永志李启云
- 关键词：原核表达蛋白纯化多克隆抗体
- 吉林省水稻二化螟发生动态研究被引量：5
- 2021年
- 2018-2020年,对吉林省不同水稻种植区水稻二化螟发生世代及发生动态进行了系统调查。结果显示,在中西部稻区白城市(洮北区)、扶余市和公主岭市二化螟一年可发生2代,性诱监测越冬代和第1代成虫发生高峰期分别在6月上、中旬和8月上、中旬。在中东部稻区的榆树市和吉林市(昌邑区),二化螟一年发生1~2代,榆树市在6月上、中旬和8月上、中旬,吉林市在6月中、下旬和8月中旬各有1个诱蛾高峰。在东南部稻区的柳河县和和龙市,二化螟1年发生1代,柳河县诱蛾高峰期在6月下旬到7月上旬,和龙市未发现明显诱蛾高峰。通过为害情况调查发现,水稻收获前2代区二化螟为害情况普遍重于1代区,应加强对2代区第2代二化螟的监测与防治。
- 周淑香陈立玲李丽娟鲁新高月波李小宇
- 关键词：水稻二化螟
- 洋葱黄矮病毒RT-PCR和ELISA检测方法的建立被引量：6
- 2019年
- 分麋洋葱Alliumcepa var.aggregatum俗称毛葱、鬼子葱,是北方地区特色经济作物,保健功效显著,其种植面积逐年增加。洋葱黄矮病毒(OBnion yellow dwarfvirus,OYDV)能够侵染分麋洋葱,造成其产量和品质下降。OYDV侵染分麋洋葱后,植株矮化,叶片变形褪绿、叶尖枯萎,后期整个叶片表现发黄、起皱及萎缩等症状。为能在发病早期及时快速地检测出OYDV,本研究利用特异性引物和已制备的单克隆抗体,通过优化参数确定最佳检测条件,建立OYDV的RT-PCR和ELISA检测方法,以期为分麋洋葱生产中农药减施提供技术保障。
- 郭炎李小宇苏颖张春雨周雪平王永志
- 关键词：ELISA检测方法RT-PCR单克隆抗体特异性引物经济作物
- 马铃薯卷叶病毒衣壳蛋白原核表达及多克隆抗体的制备被引量：1
- 2021年
- 本研究克隆马铃薯卷叶病毒(Potato leafroll virus,PLRV)衣壳蛋白(Coat Protein, CP)基因,改造其密码子,使其偏好原核表达,构建pCzn1-PLRV CP重组表达载体,通过大肠杆菌表达纯化,经Western Blot方法鉴定为PLRV CP蛋白,纯化后的蛋白免疫日本大耳兔,成功制备PLRV CP蛋白多克隆抗体,识别重组蛋白效价为128 000倍,识别PLRV叶片的效价为32 000倍,经Western Blot方法分析,其特异性良好。本研究为PLRV检测方法的建立及脱毒种薯的检测提供了必需的生物材料。
- 王韬远张春雨王忠伟李闯张胜利李建平李小宇王永志
- 关键词：马铃薯卷叶病毒衣壳蛋白原核表达多克隆抗体
- 转Cp4 epsps基因大豆快速DAS-ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2021年
- 为了快速检测转Cp4 epsps基因大豆,本研究以纯化后的CP4-EPSPS单克隆抗体1D12为捕获抗体,辣根过氧化物酶标记的羊抗CP4-EPSPS多克隆抗体8092为检测抗体,通过优化抗体工作浓度和抗原抗体反应时间,成功建立转Cp4 epsps基因大豆快速双抗夹心ELISA检测方法。结果显示:最佳检测条件为捕获抗体浓度10μg/mL,检测抗体浓度1.25μg/mL,样品与检测抗体先后加入酶标板37℃共同孵育60 min。该方法的检测范围为0.3125~80μg/mL,待检叶片、籽粒最佳检测范围为10~80倍稀释;板内变异系数为1.64%~5.42%,板间变异系数为3.05%~9.13%,符合ELISA定性试剂盒参考标准;对100份大豆叶片、20份大豆籽粒进行检测,与Western blot结果和标准结果进行比较,符合率为100%,表明该检测方法具有良好的准确性和重复性。该检测方法75 min内即可完成检测,适用于快速检测转Cp4 epsps基因大豆,为转Cp4 epsps基因快速检测试剂盒的开发奠定了基础。
- 候吉超李忠鹏梁雨欣张春雨李小宇王永志
- 关键词：大豆
- 大豆花叶病毒浸染性克隆及其构建方法和应用
- 本发明提供了一种大豆花叶病毒浸染性克隆及其构建方法和应用，涉及生物技术领域。该大豆花叶病毒浸染性克隆中，大豆花叶病毒的p3基因区域内含有宿主的内含子片段，能够在大肠杆菌中增殖，浸染宿主后能使宿主产生SMV典型症状。
- 王永志李小宇张淋淋李启云董英山
- 一种利用中药渣生产的保健饲料添加剂及制备方法
- 本发明提供一种利用中药渣生产的保健饲料添加剂及制备方法，涉及饲料技术领域。一种利用中药渣生产的保健饲料添加剂，按照重量份数计，其主要原料包括：中药渣110～150份、植物粉15～25份、第一菌种8～18份、第二菌种0.5...
- 王永志李小宇张春雨
- 双抗夹心ELISA检测转Bar基因抗除草剂大豆被引量：9
- 2016年
- 为快捷有效地检测转Bar基因抗除草剂大豆,利用已制备的抗除草剂Bar基因编码蛋白,膦丝菌素乙酰转移酶(phosphinothricin acetyltransferase,PAT)单克隆抗体和多克隆抗体,建立PAT蛋白双抗夹心酶联免疫吸附检测方法,对转Bar基因抗除草剂大豆不同组织材料进行定量检测。结果显示,最佳检测条件为捕获抗体质量浓度0.125μg/m L,包被酶标板,37℃孵育1 h后4℃静置过夜,检测样品37℃孵育1.5 h,检测抗体质量浓度6.25μg/m L,37℃孵育1.5 h;PAT蛋白的最低检测限为0.04 ng/m L,大豆蛋白体系中为8 ng/m L;重复性变异系数小于3%。利用上述检测条件,对实验建立的转Bar基因抗除草剂大豆进行PAT蛋白定量检测,成功地在根、茎、花、叶、种子不同部位检测到该蛋白的表达。
- 李小宇张春雨郭东全张淋淋尤晴董英山王永志李启云
- 关键词：BAR大豆
- 防治小菜蛾赤眼蜂蜂种和品系筛选与田间防治效果评价
- 2025年
- 通过比较螟黄赤眼蜂、玉米螟赤眼蜂、松毛虫赤眼蜂、稻螟赤眼蜂4种赤眼蜂的17个品系对小菜蛾卵寄生能力的差异,筛选防治小菜蛾的优良赤眼蜂蜂种和品系,并通过田间试验验证其对小菜蛾的防治效果。结果表明,4种赤眼蜂均能寄生小菜蛾卵,但不同蜂种的寄生能力存在差异,整体表现由高到低为螟黄赤眼蜂,玉米螟赤眼蜂,松毛虫赤眼蜂,稻螟赤眼蜂。17个品系中螟黄赤眼蜂Tc-1对小菜蛾卵的寄生能力最强,卵粒和卵卡寄生率分别为73.01%和98.89%,在小菜蛾卵上的羽化率和羽化雌蜂率均达到85%以上。田间试验结果表明,释放螟黄赤眼蜂Tc-1品系后西兰花田小菜蛾虫口数较对照显著降低,且波动较缓。随着放蜂次数增加小菜蛾虫口减退率增加,通过连续4次放蜂,收获时放蜂田中小菜蛾虫口数为278头/百株,比对照田(2740头/百株)降低了89.85%,证明螟黄赤眼蜂Tc-1品系是防治小菜蛾的优良品系,具有广阔的应用前景。
- 周淑香高芃赫思聪鲁新李小宇高月波
- 关键词：小菜蛾赤眼蜂田间防效评价
- 在原核细胞中增殖功能性马铃薯Y病毒的方法
- 本发明涉及生物技术领域，具体而言，提供了一种在原核细胞中增殖功能性马铃薯Y病毒的方法。本发明通过在马铃薯Y病毒cDNA的类原核启动子区插入内含子，用于降低或消除类原核启动子区的启动子活性，经修饰马铃薯Y病毒cDNA编码的...
- 王永志苏颖李小宇张春雨 马俊丰
