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人胎肺细胞的条件化培养液中两种类型纤溶酶原活化物的分离: 1998年; 用正常人胎肺细胞体外培养，从其培养液中分离纤溶酶原活化物（ＰＡ），通过ＣＭ－ＳｅｐｈａｄｅｘＣ－５０层析，硫酸铵沉淀和Ｆｉｂｒｉｎ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ，Ｌｙｓｉｎｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ亲和层析及ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０凝胶过滤等步骤，从１０．５ｌ条件培养液中分离纯化得到两种类型的纤溶酶原活化物，ｔ－ＰＡ９０μｇ，ｕ－ＰＡ８００μｇ．在还原条件下ＳＤＳ－ＰＡＧＥ均显示单带，分子量ｔ－ＰＡ为７２ｋＤ，ｕ－ＰＡ为５４ｋＤ，纤溶比活分别为１５６０００ＩＵ／ｍｇ蛋白和１０６０００ＩＵ／ｍｇ蛋白．; 范清春汤国枝王石泉张鹤云李敏意张太平金以丰; 关键词：细胞培养

重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体基因的克隆及工程菌的构建与鉴定被引量：3: 2004年; 　利用RT PCR技术,从人脐带静脉上皮细胞中克隆人组织型纤溶酶原激活剂基因,将其接入TA克隆载体PCR2.1中,经DNA序列测定后,以该重组质粒DNA为模板,用PCR方法获得了人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)基因,将其转入pET29a,构建了重组表达质粒pET29a/K2tPA,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,构成工程菌.经IPTG诱导表达,在40kDa处有一明显表达条带,表达量为约占菌体总蛋白的20%.该菌种在贮存与复苏及传代过程中具有良好的质粒稳定性和表达稳定性.; 陈于红朱镇华刘蓓钫张菁傅一工王石泉张巍杨庆刘建宁; 关键词：工程菌质粒稳定性克隆

重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体的工业化制备与性质研究被引量：2: 2004年; 　将含有人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)重组表达质粒的工程菌经10L种子罐培养及100L发酵,IPTG诱导表达,其表达量为占菌体总蛋白的20%,表达产物经体外变复性、TI Sepharose亲和层析、SP Sepharose离子交换层析,每100L发酵液得重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)纯品4g,纯度达95%以上,比活大于500000IU/mg,内毒素及热源含量、宿主蛋白残留量、宿主DNA残留量等均达到临床使用标准.其分子量(质谱测定)、氨基酸组成、N、C-端氨基酸序列分析等均与理论值相符.同时进行了等电点测定及肽图分析等性质研究.; 朱镇华孙自勇陈于红张菁王石泉杨庆刘莉莉丁楅森陈新园刘建宁; 关键词：发酵活化纯化蛋白

蛋白质的分子结构对非线性声参量B／A的影响被引量：2: 1996年; 本文研究蛋白质分子结构对非线性声参量Ｂ／Ａ的影响，即由生化技术采用变性剂十二烷基硫酸钠（ＳＤＳ）溶液对三种蛋白质（牛血清蛋白、牛血红蛋白、胃蛋白酶）进行作用，以破坏其维持蛋白质空间构象的四、三、二级结构，而不改变其一级结构，也就是仅改变结构而不改变蛋白质的化学成份，用改进热力学法测量Ｂ／Ａ值受其影响的程度。实验结果表明：ＳＤＳ溶液浓度越大对蛋白质分子结构的破坏越严重，非线性参量Ｂ／Ａ中蛋白质的贡献就越小；Ｂ／Ａ能够反映蛋白质分子结构遭破坏的程度。该文对此现象作出一定的解释。; 鲁志劬龚秀芬王石泉; 关键词：蛋白质分子结构非线性声学生物声学

鳖外周血细胞显微形态及细胞化学被引量：24: 1995年; 中华鳖外周血细胞按形态分为，红细胞、嗜异性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜天青粒细胞、单核细胞、淋巴细胞和血栓细胞八种。爬行类特有的嗜天青粒细胞具吞噬功能，四种细胞化学反应均阳性，是一功能活跃细胞，表现了爬行类血细胞在系统演化中的特殊性。; 王石泉; 关键词：血细胞显微形态细胞化学

从山楂中分离纯化寡聚原花色素的生产工艺: 本发明属于生化分离纯化技术领域，本发明所述从山楂中分离纯化寡聚原花色素生产工艺，从新鲜山楂或干果中用水抽提，大孔树脂吸附及凝胶Sephadex LH-20分离得到纯度95%以上的产品，方法简便，成本低，得率高，可制成片剂...; 汤国枝张鹤云张太平王石泉金以丰; 文献传递

成纤维细胞在壳聚糖/PHEA水凝胶膜上的粘附与生长行为被引量：2: 2002年; The chitosan/PHEA-blended hydrogels were prepared from PHEA and chitosan in various blend ratios.The water contents of the hydrogels were in the range of 50%～80%(wt).The attachment and growth of fibroblast cells(L929) on the hydrogels were studied.The results indicated the PHEA content in hydrogels has great effect on cell attachment but has little effect on the growth of L929 cells.; 朱爱萍王石泉成大明陈强刘崇江沈健林思聪; 关键词：成纤维细胞粘附细胞培养

中国地鼠卵巢细胞培养上清中重组骨形态发生蛋白2的三步纯化法(英文): 2010年; 骨形态发生蛋白2(BMP-2)是转化生长因子β(TGF-β)超家族的成员,在骨组织工程领域被广泛应用.如今,BMP-2的商业生产所受关注程度与日俱增.这里建立了一种方便且低成本的方法,将人重组骨形态发生蛋白2(rhBMP-2)从中国地鼠卵巢细胞系(CHO)培养上清中纯化出来.该方法由三步组成:肝素亲和层析,Q-Sepharose离子交换层析和SephacrylS-200凝胶过滤,得率约29%.从1L培养上清中能得到约0.26mg的纯度在95%以上的rhBMP-2成熟二聚体,并通过异位成骨实验组织学分析证实了其生物活性.因此,该方法在CHO培养上清中纯化rhBMP-2方面具有潜在的应用价值.; 李睿书王石泉谭向阳刘建宁; 关键词：重组人骨形态发生蛋白2 蛋白纯化

淋巴细胞抑裂素的理化性质及生物活性研究: 1999年; 本文以猪胸腺为原料 ,经超滤、Biogel p- 4凝胶过滤、DEAE- Sephadex A- 2 5离子交换层析、Sephadex G- 10过滤、HPLC分离等步骤 ,得到分子量小于 30 0 0的多个组分 ,对其中二个组分测定了 N端序列。该抑裂素除可抑制 Con A刺激的淋巴细胞对 3H- Td R的掺入之外 ,体内可抑制机体对异源蛋白的免疫应答反应 ,延迟异体移植皮肤的存活时间 ,还可抑制大鼠同种异体心肺联合移植引起的排斥反应。鉴于抑裂素具有种族非专一性 ,组织专一性 ,非细胞毒和作用可逆性等特点 ,用于治疗自身免疫性疾病。; 江水金以丰张鹤云王石泉汤国枝邵启祥; 关键词：淋巴细胞转化皮肤移植

数种因子对人胎肺细胞分泌t─PA的影响被引量：1: 1997年; 原代人胎肺细胞培养２０ｄ后，更换１％ＢＳ培养基，细胞生长停止，ｔ－ＰＡ分泌量低；在１％ＢＳ培养基中使Ｃａ２＋浓度增加到３．５ｍｍｏｌ／Ｌ，ＬＨ浓度增加到１％，细胞表现较高ｔ－ＰＡ分泌活性，与１％ＢＳ组差异显著。以此配方为基础培养基，再分别补充以下因子：５μｇ／ｍｌ转铁蛋白，５ｍｇ／ｍｌ白蛋白，２．５ｍｇ／ｍｌ葡萄糖，１ｍｇ／ｍｌ甘露糖，１μｇ／ｍｌ氢化可的松，２Ｕ／ｍｌ胰岛素，２ｍｍｏｌ／Ｌ谷氨酰胺，２０ｎｍｏｌ／Ｌ亚硒酸钠。除谷氨酰胺和甘露糖外，其他因子均显著提高肺细胞的ｔ－ＰＡ分泌活性（Ｐ＜０．０５）; 王石泉张鹤云汤国枝李敏意金以丰; 关键词：细胞培养 T-PA

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王石泉