何鹏 作品数:66 被引量:212 H指数:9 供职机构: 中国食品药品检定研究院 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 理学 文学 更多>>
甲乙型肝炎联合疫苗诱导小鼠免疫应答的研究 目的 比较甲乙型肝炎联合疫苗与单价重组乙型肝炎疫苗、甲型肝炎灭活疫苗诱导小鼠细胞免疫和体液免疫应答特点.方法 4组小鼠(BALB/c,H-2d)皮下接种甲乙型肝炎联合疫苗、单价重组乙型肝炎疫苗及甲型肝炎灭活疫苗,分别于免... 胡忠玉 何鹏 邱少辉 方鑫 李河民 梁争论关键词:甲型肝炎 乙型肝炎 疫苗 抗-HBS 不同种类乙型肝炎表面抗原诱导小鼠早期细胞免疫应答的比较 被引量:2 2011年 目的 比较不同表达系统来源的乙型肝炎(乙肝)表面抗原(HBsAg)免疫小鼠诱导早期脾淋巴细胞抗原特异性细胞免疫应答的特点,探讨影响乙肝疫苗保护效果的因素.方法 3种HBsAg(汉逊酵母、CHO细胞和血源)分别皮下接种不同组小鼠(BALB/c,H-2d),每只3μg,于免疫后4d分离脾单个核细胞(MNC),经细胞分选仪(MACs)分选后,获得纯度高于90%的CD4+和CD8+T细胞,应用ELISPOT测定MNC、CD4+和CD8+T细胞体外刺激后所产生的细胞因子IFN-γ、IL-2斑点数( SFC).结果 细胞分选后,汉逊抗原诱导CD8+T细胞分泌IFN-γ的水平和CD4+T细胞分泌IL-2水平均显著高于CHO抗原组(8/10、2/10,P=0.035;6/10、0/10,P=0.005).汉逊抗原组与血源抗原组CD8+T细胞经体外刺激诱导IFN-y全部阳转(10/10),但分泌水平上汉逊抗原组显著高于血源抗原组(t=2.479,P=0.035);汉逊抗原组诱导CD4+T细胞IFN-γ阳转率及分泌水平均显著高于血源抗原组(10/10、4/10,P=0.005;t=3.967,P=0.003).结论 乙肝抗原免疫小鼠4d即可诱导细胞免疫应答,且汉逊酵母抗原早期诱导抗原特异性IFN-γ、IL-2的能力显著高于CHO和血源抗原,与其临床考核母婴传播阻断HBV保护率显著优于CHO和血源乙肝疫苗相一致,为及时接种乙肝疫苗的必要性和高危新生儿选择接种乙肝疫苗的类型提供依据. 胡忠玉 何鹏 方鑫 邱少辉 李河民 梁争论关键词:乙型肝炎 表面抗原 细胞免疫应答 我国乙型肝炎疫苗质量现况与免疫策略 被引量:10 2015年 乙型肝炎(乙肝)病毒( hepatitis B virus,HBV)感染是目前最为严重的公共卫生问题之一。世界卫生组织( World Health Organization,WHO)估计全世界目前约有20亿人感染HBV,其中2.4亿以上为慢性感染,每年新增 HBV 感染约500万例,每年有超过78万人死于急性或慢性乙肝[1-2]。中国是HBV感染的中高流行区,近年来已经通过乙肝疫苗的广泛接种有效地控制了HBV的传播,2006年全国乙肝血清流行病学调查结果显示:1~59岁人群乙肝表面抗原(HBsAg)携带率为7.18%,15岁以下儿童 HBsAg携带率为2.08%,与1992年调查结果相比,我国1~59岁人群乙肝表面抗原(HBsAg)阳性率下降了2.5个百分点,15岁以下儿童下降了7~8个百分点。然而,由于我国人口基数大,因此仍存在庞大的感染群体,据卫生部疾病预防控制局估计,至2006年,全国约有9300万人长期携带HBV,其中慢性乙肝患者约2000万[3]。 HBV感染严重危害了人类的健康,同时也引发了一系列社会和经济方面的问题,是现阶段最为突出的公共卫生问题之一。目前,临床上应用的治疗乙肝的药物包括干扰素、核苷类似物等,然而现有的治疗方法多价格高昂,且无法治愈慢性乙肝、解除患者痛苦,常伴有严重的副作用,并可能诱导HBV突变体产生,且停药后反跳现象较高,因此乙肝疫苗的预防接种是目前最为有效的控制乙肝手段。 何鹏 胡忠玉 赵铠关键词:乙型肝炎 免疫策略 疫苗质量 慢性乙肝患者 HBV感染 乙肝表面抗原 重组乙型肝炎疫苗中庆大霉素残留量检测相关影响因素研究 目的:研究酶联免疫法测定乙型肝炎疫苗中庆大霉素含量的相关影响因素.方法:使用市场化庆大霉素酶联免疫试剂盒对三种表达系统的乙型肝炎疫苗和原液进行庆大霉素回收率测定,同时对不同个来源的庆大霉素标准品进行对比,对铝佐剂和标准品... 邱少辉 方鑫 何鹏 梁争论 沈琦 胡忠玉关键词:乙型肝炎疫苗 酶联免疫法 文献传递 重组乙型肝炎疫苗免疫小鼠后早期免疫相关因子的反应 被引量:2 2014年 目的分析乙肝疫苗免疫后早期小鼠体内细胞因子、趋化因子、转录调节因子等多种免疫相关因子在mRNA及蛋白水平的反应,寻求早期评价乙肝疫苗免疫效果的指标。方法采用皮下免疫方式,每只BALB/c小鼠注射含2μg HBs Ag的汉逊酵母重组乙肝疫苗,免疫后3 h、24 h、48 h、96 h、168 h收集处理小鼠脾细胞和血清,使用Luminex方法测定多种免疫相关因子的mRNA表达和血清中蛋白类因子的分泌水平。结果脾细胞中IFN-α1、IFN-β1、IFN-γ、IL-2、IL-5、IL-6、IL-12p40、CCR1、CCR5、CCL3、CCL4 mRNA在免疫后3 h检测无表达,之后逐渐升高,在24 h达到表达高峰。CXCL10、IRF7 mRNA在免疫后3 h即出现表达,至24 h时达到表达高峰,分别为对照组的6.09倍和9.01倍。血清中CXCL10免疫后3 h即可检测,在24 h达到表达高峰。IFN-γ在96 h开始分泌,168 h时分泌水平最高。IL-12p70的分泌趋势与IFN-γ近似,在96 h之前的3个时间点分泌水平较低,168 h时达到分泌高峰。结论汉逊酵母重组乙肝疫苗免疫后3 h到168 h可检测到多种免疫相关因子表达,为早期评价乙肝疫苗免疫效果提供了指标。 邱少辉 张然 方鑫 何鹏 梁争论 郑直 胡忠玉关键词:乙型肝炎 趋化因子 免疫效果 不同种类乙型肝炎疫苗免疫小鼠诱导细胞因子应答的比较研究 目的研究不同种类乙型肝炎(乙肝)疫苗免疫小鼠后诱导抗原特异性细胞因子反应的差异及单个核细胞产生TH1型细胞因子的能力,评价不同种类乙肝疫苗的免疫原性。方法应用重组汉逊酵母、酿酒酵母、CHO细胞来源的乙肝疫苗分别免疫BAL... 何鹏 胡忠玉 梁争论 李河民 庄辉关键词:乙型肝炎 疫苗 细胞因子 LUMINEX 文献传递 氢氧化铝佐剂对重组乙型肝炎疫苗诱导的免疫相关细胞因子的影响 被引量:2 2015年 目的分析氢氧化铝佐剂对乙型肝炎表面抗原、重组乙型肝炎疫苗诱导的早期固有免疫反应和加强免疫后获得性免疫反应的影响。方法单针免疫,分为4组,每组15只:经BALB/c小鼠背部皮下注射重组乙型肝炎抗原(20μg/ml)、重组乙型肝炎疫苗(汉逊酵母,10μg/0.5 ml)、氢氧化铝佐剂(0.5 mg/ml),100μl/只,同时设生理盐水对照组,于免疫后3、24、48、96、168 h,收集处理外周全血及血清。加强免疫,分为2组,每组9只:相同方法免疫疫苗及抗原,1μg/(100μl·只),于初免后第14天,按照相同剂量加强免疫1次,于加强免疫后24、48、168 h,采集外周血分离血清。使用Luminex方法测定全血中相关因子的m RNA表达及血清中蛋白类细胞因子的分泌水平。结果单针免疫后24 h,3个免疫组多种细胞因子m RNA表达达到高峰,其中IRF7在铝佐剂和乙肝疫苗组中的表达显著高于乙肝抗原组(P<0.05)。加强免疫后,乙肝疫苗组IL-5、IL-6和IL-12p70在24 h时分泌水平最高,之后逐渐下降;CXCL10、IFNγ和MIP-1α则随时间持续升高;乙肝抗原组中细胞因子分泌量及持续时间均低于乙肝疫苗组。结论氢氧化铝佐剂可单独或协同抗原,共同增强乙肝疫苗诱导的早期固有免疫反应,加强免疫后,铝佐剂促进多种细胞因子的分泌。 邱少辉 方鑫 张然 何鹏 梁争论 郑直 胡忠玉关键词:氢氧化铝 佐剂 乙型肝炎疫苗 细胞因子 重组乙型肝炎疫苗中庆大霉素残留量检测相关影响因素研究 目的研究酶联免疫法测定乙型肝炎疫苗中庆大霉素含量的相关影响因素。方法使用市场化庆大霉素酶联免疫试剂盒对三种表达系统的乙型肝炎疫苗和原液进行庆大霉素回收率测定,同时对不同个来源的庆大霉素标准品进行对比,对铝佐剂和标准品对庆... 邱少辉 方鑫 何鹏 梁争论 沈琦 胡忠玉关键词:乙型肝炎疫苗 庆大霉素 酶联免疫法 抗戊型肝炎病毒IgG抗体定量线性标准品的标定及初步应用 被引量:5 2008年 目的建立抗戊型肝炎病毒(Anti-HEV)IgG抗体的定量线性标准品,并进行初步应用。方法利用抗-HEV IgG和抗-HEV IgM ELISA检测试剂筛选出1份抗-HEV IgG阳性血清L9,经基因1型和4型的HEV ORF2C-端抗原及239抗原进行Western blot确认后,用WHO定量标准品,由3个实验室协作标定,利用量反应平行线法计算其抗-HEV IgG的含量。考察已标定的L9血清的稳定性,并用所标定的1.5倍系列稀释的血清对国内外6家抗-HEV IgG试剂的灵敏度进行检测。选择一灵敏度较高的试剂,在其线性范围内取L9的5个稀释度作为抗-HEV IgG抗体定量线性标准,对高、中、低浓度的3份临床血清重复检测5次,考察其重复性;对实验感染猴的系列血清中抗-HEV IgG含量进行定量检测,考核该定量线性标准品的应用效果;并对每次定量试验中的线性方程进行分析,确定相关系数r值和斜率k值的范围。结果经国内外试剂检测筛选出的阳性血清L9与基因1型和4型的HEV ORF2 C-端抗原及239抗原均有阳性反应。经协作标定,L9血清抗-HEV IgG含量为16.9U/ml。L9血清在-20℃下保存6、12、18个月,2~8℃保存24、48、96h后,定量结果均在95%置信区间内,且抗-HEV IgG含量均未明显下降。6家抗-HEVIgG检测试剂灵敏度差异较大,范围为0.03~5.00U/ml。确定L9血清从0.42U/ml开始的5个1.5倍系列稀释度,作为某一试剂抗-HEVIgG抗体定量线性标准品。利用该线性定量标准检测高、中、低浓度的3份临床血清,定量结果重复性较好;对实验感染猴系列血清进行定量检测,结果可有效地反映抗体水平变化趋势;94%的定量检测试验,r≥0.98,1.15≥k≥0.95。结论已建立了抗-HEVIgG抗体定量线性标准品,可用于疫苗免疫原性评价和流行病学调查。 黄维金 吴星 周诚 何鹏 葛胜祥 乔杉 张华远 蓝海云 辜文洁 梁争论 祁自柏 李河民关键词:戊型肝炎病毒 IGG抗体 标准品 短期异常低温对重组乙型肝炎疫苗效力相关因素的影响 2020年 目的模拟重组乙型肝炎(简称乙肝)疫苗在冷藏存储过程中发生的异常低温情况,探讨短期异常低温储存对乙肝疫苗效力相关因素的影响。方法选取3个不同表达系统(酿酒酵母、汉逊酵母、CHO细胞)来源的乙肝疫苗,分别于0、-7、-20℃储存1或7 d,检测疫苗的吸附完全性、上清中铝离子含量、效价和体外相对效力,比较乙肝疫苗经短期异常低温储存后与2~8℃正常储存条件下的差异。结果经短期异常低温储存后,疫苗的吸附完全性、疫苗上清中铝离子含量未发生变化;3种乙肝疫苗的ED50在0.16~0.68μg之间波动;汉逊酵母乙肝疫苗体外相对效力的变化幅度不超过10%,酿酒酵母乙肝疫苗在-20℃冻存7 d后相对效力较2~8℃储存下降21.8%。结论短期异常低温储存后,乙肝疫苗仍能保持较好的吸附完全性,非胶体状态铝含量未发生变化,疫苗效价和体外相对效力在部分异常储存条件下出现下降,但仍符合质量标准要求。 方鑫 邱少辉 童海青 屈旭成 曹崴 饶洪冲 朱征宇 何鹏 胡忠玉关键词:乙型肝炎疫苗 效价