徐芳
- 作品数：105 被引量：170H指数：7
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- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- SARS病毒核蛋白基因的克隆及其表达研究被引量：3
- 2003年
- 从一例输入性传染性非典型性肺炎病人血清中提取病毒RNA,通过RT-PCR方法扩增出SARS病毒核蛋白基因片段,克隆入质粒载体pUCm-T后,进行核苷酸序列的测定及分析,与已公布的SARS病毒基因序列进行比较,证实为SARS冠状病毒核蛋白基因。为了解该病毒核蛋白的抗原特性,将核蛋白基因插入表达载体,构建重组质粒pET28a-SN,转导大肠杆菌BL21(DE3)后,加IPTG诱导表达。产物经SDS-PAGE电泳分析,表达出相对分子量约为50kDa的蛋白,占整个菌体的45％左右。Western-blot分析表明,表达产物仅与SARS阳性病人血清起反应,而与正常血清不起反应。间接ELISA免疫检测,抗原滴度达1:12500。表明表达的核蛋白为SARS特异性抗原,这为SARS病毒的诊断试剂的研制提供了方便而安全的抗原来源。
- 朱函坪陆群英卢亦愚姚苹苹徐芳葛琼翁景清严菊英龚黎明施雯赵芝雅朱智勇
- 关键词：SARS病毒核蛋白基因克隆严重急性呼吸综合征
- 一种生物大分子蛋白质CXCL4在制备抗新冠病毒药物中的应用
- 本发明公开了一种生物大分子蛋白质CXCL4在制备抗新冠病毒药物中的应用，本发明筛选得到一种在细胞水平能够抑制新冠病毒复制的生物大分子蛋白质CXCL4，包括分泌缺陷型生物大分子蛋白质δsp‑CXCL4；本发明生物大分子蛋白...
- 裴志超蒋健敏吴蓓蓓孙一晟张杭杰徐芳姚苹苹朱函坪
- H5N1人用禽流感疫苗的免疫原性研究
- 目的为了确定人用禽流感疫苗的效力试验,建立测定 H5N1禽流感毒种免疫原性的方法。方法用禽流感病毒 R1203株制造的人用疫苗,不同剂量免疫家兔,检查血清中的血凝抑制抗体和中和抗体;进行人、禽流感病毒交叉血凝抑制试验,人...
- 朱智勇丁晓航朱函坪李岩金陈学奎沈吉友张涛何培江姚苹苹徐芳翁景清谢荣辉赵芝雅龚华岳郭志军苏波孙淑滨梁伟峰
- 关键词：免疫原性效力试验免疫血清禽流感疫苗
- 肠道病毒71型诱导沙鼠肌肉细胞凋亡及其机理研究被引量：2
- 2017年
- 目的研究肠道病毒71型(EV71)杀伤沙鼠原代肌肉细胞的作用机理,为EV71的感染机制研究提供依据。方法采用胰酶/胶原酶消化法分离培养沙鼠原代肌肉细胞,滴加EV71感染细胞,采用CCK-8法检测感染细胞存活率,Hoechst 33258染色法检测感染细胞核变化,Annexin V/PI双染法检测感染细胞的细胞膜变化,蛋白免疫印迹试验检测感染细胞的PARP-1、Caspase-3、Bcl-2家族蛋白等凋亡因子和NF-κB通路相关蛋白表达量的变化。结果构建体外沙鼠原代肌肉细胞模型,使其感染EV71后,肌肉细胞出现皱缩、变圆、漂浮等形态学变化,且感染复数(MOI)越大,病变程度越明显,细胞存活率越低(rs=-0.964,P=0.005);细胞内染色质发生浓缩,细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻,伴随凋亡小体出现,细胞凋亡与MOI呈正相关(rs=1.000,P<0.001);凋亡标志蛋白PARP-1与凋亡执行蛋白Caspase-3被剪切激活;抑凋亡蛋白Bcl-xl与Bcl-2的表达量随着MOI的增大而减少;p65蛋白表达水平降低,磷酸化水平升高,NF-κB通路被激活。结论 EV71病毒可以诱导沙鼠原代肌肉细胞发生凋亡。
- 周彬孙一晟姚苹苹徐芳杨章女卢杭景朱函坪钱捷
- 关键词：EV71细胞凋亡
- 汉坦病毒感染Vero细胞病毒滴度和抗原滴度的动态观察
- 2004年
- 目的 观察汉坦病毒 (HV)在Vero细胞上的适应能力和毒株在该细胞中的增殖规律。方法 将HV感染Vero细胞 ,每隔 3d收取细胞培养液 ,直到细胞衰老 ,并观察细胞的病变情况。采用间接免疫荧光法 (IFAT)和反向被动血凝试验 (RPHA) ,观察细胞培养液的病毒滴度和抗原滴度的动态变化。结果 HV不致Vero细胞产生病变 ,病毒感染细胞第 8～ 11天时细胞培养液的病毒滴度和抗原滴度最高 ,以后逐渐降低 ,但直到细胞感染病毒 3 2d时其培养液的病毒滴度和抗原滴度仍稳定在 5 .0 0LgTCID50 /ml和 1∶2 0以上。结论 两株病毒已适应于Vero细胞 ,且具有病毒滴度高、毒力强和抗原性良好的特性 ,是Vero细胞肾综合征出血热灭活疫苗良好的后备筛选毒株。
- 徐芳姚苹苹朱智勇
- 关键词：汉坦病毒VERO细胞病毒滴度增殖流行病学
- 一种人柯萨奇病毒A组16型病毒株及其在制备灭活疫苗中的应用
- 本发明公开了一种人柯萨奇病毒A组16型病毒株CA‑193(简称CA‑193病毒株)及其在制备灭活疫苗中的应用，所述应用是利用MRC‑5细胞增殖CA‑193病毒株，病毒增殖液通过甲醛或β‑丙内酯灭活后进行离心、浓缩及柱层析...
- 朱函坪孙一晟陈直平姚苹苹徐芳杨章女朱智勇卢杭景周小龙
- 人用流感禽流感联合疫苗的研究被引量：1
- 2011年
- 目的了解人流感疫苗和H5N1禽流感疫苗联合后的安全性和疫苗之间产生抗体的相互干扰现象。方法制成禽流感单价疫苗、人流感3价疫苗和流感禽流感联合4价疫苗,免疫家兔,测定中和抗体和血凝抑制抗体,并接种小鼠和豚鼠,观察毒性反应和过敏反应。结果人流感疫苗和禽流感疫苗的联合,基本上没有发生疫苗对各自抗体产生的干扰;接种动物无毒性反应。结论 2种疫苗的联合是完全可能的。
- 朱函坪陈学奎姚苹苹徐芳谢荣辉杨章女李岩金朱智勇
- 关键词：疫苗联合抗体干扰安全性
- 沙鼠作为一种新的动物模型用于柯萨奇病毒A16候选疫苗评价的研究
- 柯萨奇病毒A16(CA16)是引起人类手足口病(HFMD)的主要病原体，少数婴幼儿感染CA16会引起严重的神经系统症状甚至死亡.目前，发现CA16和肠道病毒71型(EV71)存在联合感染的情况，同时感染这两种病毒的患者往...
- 朱函坪徐芳杨章女姚苹苹谢荣辉孙一晟卢杭景
- 关键词：手足口病免疫接种动物模型
- 一种肠道病毒疫苗的制备方法
- 本发明提供了一种以沙鼠肌肉细胞作为病毒培养的基质细胞制备肠道病毒疫苗的方法。本发明选择沙鼠肌肉细胞作为培养EV71或CoxA16病毒的基质细胞，EV71或CoxA16病毒在此细胞上生长滴度高，可多次收液；此细胞可多次传代...
- 朱函坪朱智勇夏时畅钱磊徐芳姚苹苹杨章女谢荣辉周小龙
- 重组蛋白酶标记技术的研究及在传染性应急样品检测中的应用
- 姚苹苹朱函坪徐芳谢荣辉郑官增姚晨辉梅玲玲张政杨章女朱智勇
- 该研究为2006年浙江省医药卫生立项课题。课题组国家及世界各地自2003年出现新发传染病SARS以来，传染性疾病的防治工作面临着新的形势，加强新发传染病等防治技术的研究与应用，对于保证中国人民健康、社会稳定、经济发展和国...
- 关键词：
- 关键词：传染性疾病防治血清学诊断试剂盒
