何蔼
- 作品数：88 被引量：278H指数：9
- 供职机构：中山大学中山医学院寄生虫学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部科学研究基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 抗日本血吸虫循环抗原噬菌体抗体基因结构分析
- 2003年
- 目的 对获得的抗日本血吸虫循环抗原的抗体克隆进行基因分析。方法 将 2株阳性克隆抗体基因进行测序 ,并用 NCBI和 Ig Blast Analysis of Imm unoglobulin sequences中的软件 ,对DNA序列和由其推导的氨基酸序列进行分析 ,并对其二级结构进行了模拟。结果 B0 4和 C2 4阳性克隆抗体基因的长度分别为 70 8bp和 732 bp,轻链和重链可变区基因与小鼠免疫球蛋白基因有高度的同源性。推导的氨基酸序列均具有典型的抗体轻、重链可变区特征。对 2株克隆抗体基因二级结构进行模拟 ,结果显示以 β-折叠和转角为主的平行肽链形成片层样结构 ,均符合抗体的基本构型。结论 B0 4、C2 4阳性克隆外源基因均属于小鼠免疫球蛋白可变区基因。
- 陈代雄俞慕华雷智刚孟锦绣何蔼李卓雅曹爱莲詹希美
- 关键词：日本血吸虫单链抗体可变区基因
- 3株弓形虫GRA7基因的保守性鉴定被引量：1
- 2004年
- 目的 比较弓形虫不同地理株 (RH株、ZS2株、GT株 )GRA7基因的异同。 方法 从弓形虫不同地理株的基因组DNA中扩增出GRA7基因 ,对目的基因用限制性内切酶 (Esp3I、CfrI、MboI)酶切并比较。将目的基因克隆至pGEX 4T 1质粒 ,转化大肠埃希菌JM 10 9,进行测序并比较。 结果 PCR扩增出 3株弓形虫的目的基因片段 ,大小均在 5 0 0～ 75 0bp之间 ;经 3种限制性内切酶酶切 ,其大小均与理论值相符 ;3株弓形虫GRA7基因序列相同。
- 郑斌何蔼李卓雅申川军余南郑焕钦张瑞琳李道宁詹希美
- 关键词：弓形虫限制性内切酶克隆
- 刚地弓形虫RH株微线体蛋白MIC3成熟肽的克隆与表达被引量：2
- 2005年
- 目的 克隆编码刚地弓形虫(Toxoplasmagondii)RH株微线体蛋白MIC3成熟肽的基因,构建原核表达载体pET MMIC3,并在大肠杆菌BL2 1株中表达。方法 采用PCR技术从刚地弓形虫RH株基因组DNA中扩增编码微线体蛋白MIC3成熟肽的基因,并克隆到T载体上,经测序鉴定后,将目的基因亚克隆到表达载体pET30a(+)上,构建质粒pET MMIC3。表达产物用Westernblot进行进一步确认。结果 经初步菌液PCR鉴定,提取质粒双酶切鉴定并测序,确认插入T载体的序列为所需的目的序列;亚克隆构建pET -MMIC3,转化到宿主菌大肠杆菌BL2 1,得到分子量为37.2kDa的重组表达蛋白,Westernblot的结果与预测相符。结论 成功的克隆并融合表达了刚地弓形虫RH株微线体蛋白MIC3成熟肽,为进一步研究其在弓形虫粘附和入侵中的作用奠定了基础。
- 余南何蔼郑小英申川军郑斌郑焕钦李卓雅曹爱莲詹希美
- 关键词：刚地弓形虫克隆
- 广州管圆线虫感染福寿螺模型的建立被引量：3
- 2009年
- 目的建立具有足够感染度的感染有广州管圆线虫的福寿螺模型。方法将福寿螺随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,每组16只。分别用每只螺0条、1500条、2500条、3500条一期幼虫感染福寿螺。感染24h后以相同感染数量相同时间重复感染一次。35～40d后,使用酶消化法查找三期幼虫,观察螺的死亡率、感染率、感染度等指标。结果Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组死亡率分别为0、31.25%、31.25%、62.5%;Ⅰ组各螺无三期幼虫感染,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组感染率均为100%;感染度Ⅲ组和Ⅳ组明显高于Ⅱ组(P<0.05),Ⅲ组与Ⅳ组之间感染度差异无统计学意义(P>0.05)。结论无广州管圆线虫感染时,Ⅰ组螺可正常生存,无死亡;Ⅱ组螺死亡率较低,但感染度亦不高;Ⅳ组螺感染度较高死亡率亦高;Ⅲ组福寿螺死亡率较低、感染度较高、感染虫数较均衡,最适宜作为模型。
- 孙志坚彭东觉贺华良何蔼杨潇曲振宇詹希美
- 关键词：广州管圆线虫福寿螺
- 广州管圆线虫抗原IF的中间纤维蛋白组织来源分析和定位被引量：1
- 2007年
- 目的对广州管圆线虫抗原IF进行中间纤维蛋白家族分类和细胞组织定位。方法IPTG诱导重组基因pET-IF在大肠杆菌中表达广州管圆线虫抗原IF,用组氨酸亲和层析纯化表达产物,用Western blot方法鉴定抗原IF的中间纤维蛋白类型;小鼠皮下多点注射法制备抗IF抗体血清,用免疫组织化学方法检测抗原IF在虫体组织和细胞上的定位。结果广州管圆线虫抗原IF在体外成功表达并纯化,其属于中间纤维蛋白家族的角蛋白,定位于广州管圆线虫成虫肠管壁,存在于细胞质中。结论广州管圆线虫抗原IF分布于虫体肠管壁,同时从组织学角度证明广州管圆线虫存在中间纤维结构。
- 孟锦绣何蔼程梅徐贵峰李卓雅余细勇蒋文玲李运雄詹希美
- 关键词：广州管圆线虫抗原中间纤维抗原定位
- 刚地弓形虫醛缩酶基因及其内含子的分析被引量：4
- 2005年
- 目的刚地弓形虫醛缩酶是其速殖子入侵宿主细胞过程中的一个重要分子,本研究对该酶基因序列及其内含子进行实验和分析。方法提取刚地弓形虫RH株速殖子基因组DNA和总RNA,采用PCR技术分别从基因组DNA和cDNA中扩增编码果糖1,6-二磷酸醛缩酶的基因,并克隆到T载体上,经测序鉴定后对其基因组序列和cDNA序列进行比较分析。通过NCBI数据库资源对醛缩酶内含子的分布及大小进行比较分析。结果根据醛缩酶基因设计的引物从基因组DNA扩增得到的片段长度为1315bp,从cDNA扩增得到的片段为993bp。比对结果显示来源于基因组DNA的序列在对应于编码序列起始密码子下游109bp后有一个322bp的内含子。通过在线工具收集得到NCBI及EMBL数据库中来源于不同物种的32种醛缩酶数据,分析显示推断氨基酸序列具有保守性。结论编码刚地弓形虫(Toxoplasmagondii)RH株果糖1,6-二磷酸醛缩酶基因编码区内存在一个322bp的内含子。醛缩酶氨基酸序列保守性较高。内含子在不同进化等级之间插入位置数目及大小两方面均存在明显的增加趋势。
- 余南何蔼李卓雅郑斌詹希美
- 关键词：刚地弓形虫内含子
- 广州管圆线虫病致3例婴幼儿死亡报告被引量：2
- 2001年
- 通过分析3例婴幼儿因广州管圆线虫病的致死原因,提出及早检查脑脊液、气管冲洗液、粪等查虫卵、幼虫和及时治疗为诊治该病的有效方法。
- 李道宁何蔼李旭东梁瑜李卓雅孟锦绣詹希美
- 关键词：管圆线虫线虫感染
- 粉尘螨第五组主要变应原(Der f5)的克隆表达、纯化及免疫原性鉴定
- 2009年
- 目的克隆表达粉尘螨第五组变应原(Dermatophagoides farinae,Derf5)基因,并鉴定纯化蛋白免疫原性。方法提取活粉尘螨总RNA,扩增Derf5片段,PCR产物与克隆载体pMD18-T连接,转化入大肠埃希菌JM109,经酶切及测序鉴定获得pMD18-Der f5阳性菌株,再提取质粒进行双酶切,与表达载体pET-30a(+)连接,转化入大肠埃希菌BL21,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western blotting)鉴定其表达效果,Ni-IDA亲和层析柱纯化蛋白,利用尘螨病人血清鉴定其免疫原性。结果构建了重组质粒pMD18-Derf5和pET30a-Der f5,SDS-PAGE结果表明Der f5基因在BL21中获得良好的可溶性表达,蛋白质分子量与理论值相符,纯化的蛋白与病人血清有良好的IgE结合活性。结论获得广州地区Der f5的原核表达载体,高效表达纯化重组蛋白,初步鉴定了该蛋白的免疫原性。
- 张豪詹希美吴瑜甘明何蔼李卓雅张美春郑小英
- 关键词：粉尘螨F5蛋白纯化免疫原性
- 广州市部分高校广州管圆线虫的中间宿主东风螺感染情况调查被引量：4
- 2013年
- 目的调查广州市内有代表性的一部分高等院校广州管圆线虫中间宿主东风螺的情况，了解其分布及广州管圆线虫的感染情况，为制订广州管圆线虫病的防治措施提供依据。方法对广州市中心地带的各区进行调查，每个区选取1～2所高校作为调查点，在野外鼠类活动较多的地方采集东风螺作为调查样本，利用消化法观察并统计其广州管圆线虫的感染率与感染度。结果5个区共8个调查点均发现有东风螺分布，除中山大学北校区与华南农业大学未发现东风螺感染广州管圆线虫外，其余调查点均收集到感染的东风螺。所有调查点共检查东风螺292只，广州管圆线虫的感染率为16．1％（47／292），各地区感染率差异有统计学意义（X^2=186．4，P〈0．01），平均感染度为410．6条／螺。结论广州管圆线虫的中间宿主东风螺在广州各高校分布依旧广泛，且大部分东风螺均不同程度地感染广州管圆线虫．但总体感染率和感染度相对有所下降。
- 吴挺丰聂蔓牛星跃冯嘉荣梁登陈婧何蔼詹希美
- 关键词：广州管圆线虫中间宿主感染率
- 青蒿琥酯抗弓形虫病的疗效观察被引量：12
- 2003年
- 申川军詹希美杨绍基何蔼郑焕钦张瑞琳李卓雅曹爱莲
- 关键词：青蒿琥酯弓形虫病小鼠动物模型磺胺嘧啶
