吕刚 作品数:118 被引量:216 H指数:7 供职机构: 海南医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 海南省自然科学基金 海南省高等学校科学研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 环境科学与工程 轻工技术与工程 更多>>
曼氏血吸虫己糖激酶(SmHK)蛋白质结构与功能的生物信息学预测 被引量:2 2010年 目的应用生物信息学技术预测曼氏血吸虫己糖激酶(SmHK)的结构和功能,为进一步功能研究提供信息。方法从GenBank获取SmHK及其他物种HK全长cDNA序列及氨基酸序列,应用NCBI、Expasy等在线生物信息学网站及VectorNTI软件包,对所获氨基酸序列的保守功能域及基序、蛋白质理化参数、亚细胞定位、亲水性、B细胞线性表位、二级结构及拓扑结构、三级结构建模分析及预测。结果SmHK编码451氨基酸残基,理论分子量为50446.01Da,具有完整HK-1及HK-2保守功能域,与结构和功能有关的位点高度保守,与宿主(人、鼠)的同源性为30%,与人等脊椎动物有较近的进化关系;有多个潜在的抗原表位、多个磷酸化位点及1个跨膜结构。三级结构分子建模显示该蛋白两基团间有一裂隙,葡萄糖、ATP结合位点及ATP催化区位于该裂隙中或周围,跨膜区与其两端的碱性氨基酸形成一阴离子通道。结论SmHK与结构和功能相关的位点高度保守,与宿主有较近的进化关系,推测该蛋白可能通过跨膜区锚定在线粒体外膜上,主要功能位点位于蛋白裂隙中或周围,多个磷酸化位点说明其参与多种细胞功能的调节,在调节能量代谢中起重要作用,是潜在的疫苗候选分子和药物作用靶标。 吕刚 赵世勇 李静晶 范志刚 芦亚君关键词:血吸虫 己糖激酶 生物信息学 基于混合式教学的《病原生物学》课程思政探索与实践 被引量:6 2021年 如何有效实现高校思政课与专业课的融合,是当前我国高等教育的热点话题。混合式教学作为一种新的教学模式,已逐渐成为高校教学的新常态。基于混合式教学开展课程思政,既是专业课程教学的内在动力需求,也是实现全程全方位育人的必要举措。该文致力于将《病原生物学》课程思政和混合式教学相结合,协调处理好教学内容的"减法"与课程思政和教学效果的"加法"的关系,使《病原生物学》课程与思想政治理论课形成"协同效应",这对于提高教学质量、加强教学改革、真正实现"全课程育人"具有重要学术价值,同时,为相关学科的课程思政改革提供借鉴。 牛莉娜 饶朗毓 伍丽娴 吕刚 彭芸花关键词:《病原生物学》 混合式教学 啮齿动物芽囊原虫的流行病学研究进展 被引量:3 2023年 芽囊原虫是一种常见的人兽共患肠道寄生虫,呈世界性分布且动物宿主广泛,多数研究认为该虫具有机会致病性,低免疫人群感染可能会引起腹泻等症状。啮齿动物是地球上最大的且与人类生活密切相关的哺乳动物种群,具有种类多、分布广和适应性强的特点,是芽囊原虫重要的宿主,是多种人兽共患病原体的传播媒介,具有重要的公共卫生学意义。本文对全球啮齿动物芽囊原虫的流行病学情况进行综述,旨在为芽囊原虫病防控提供参考。 李佳琦 任广旭 赖秀仪 王媛 吕刚关键词:芽囊原虫 啮齿动物 人兽共患 日本血吸虫乳酸脱氢酶原核表达、纯化及鉴定 被引量:3 2007年 目的原核表达日本血吸虫乳酸脱氢酶(SjLDH),对表达产物进行纯化及生物活性鉴定。方法将SjLDH编码序列克隆入pET-28a原核表达载体并转染大肠埃希菌,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后亲和层析法对表达产物进行纯化,并用聚丙烯酰胺变性凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白印迹(Western blot)、酶联免疫吸附实验(ELISA)、酶活性染色及活性测定进行鉴定。结果成功构建pET28a-SjLDH重组质粒并在大肠埃希菌中获得可溶性表达,亲和层析纯化表达产物。SDS-PAGE及Western Blot结果显示,表达及纯化产物分子量约36kDa,与SjLDH理论分子量相符。ELISA结果表明,重组蛋白具有良好的免疫活性,酶活性染色表明重组蛋白具有乳酸脱氢酶活性,活性单位为379U/mg。结论成功进行SjLDH的原核表达并获得纯化的重组蛋白,重组蛋白具有良好的免疫原性及酶活性,为研究SjLDH的功能奠定了基础。 吕刚 胡旭初 黄灿 李艳文 徐劲 吴忠道 余新炳关键词:日本血吸虫 乳酸脱氢酶 原核表达 纯化 重组蛋白 环境科学课程教学实践改革研究 被引量:3 2014年 环境学概论是高校环境类相关专业的专业基础课,课程理论性强、信息量大。合理组织教学内容,探索有效的教学方法是搞好教学的关键。本文对环境科学概论课程的教学改革与实践进行了初步的研究,通过调整教学内容、改进教学方法、开展课程实践来提高该课程的教学效果。多种教学方法和丰富的实践活动的引入对环境学概论的授课成效具有重要作用。 蹇丽 钱士匀 吕刚 李慧君 李娜 唐天乐关键词:环境学概论 教学内容 教学方法 细粒棘球绦虫果糖二磷酸醛缩酶的生物信息学分析及其表达与活性检测 被引量:4 2014年 目的利用生物信息学方法分析细粒棘球绦虫果糖二磷酸醛缩酶(EgFBPA)的结构和功能特征,并利用基因工程技术进行克隆、表达、纯化,获得活性蛋白。方法利用多种生物信息学软件分析EgFBPA的拓扑结构、生物学以及免疫功能特征;用限制性内切酶EcoRⅠ和HandⅢ对重组质粒FBPA/P-blue酶切FBPA目的基因片段,亚克隆入表达载体pET30a,筛选重组克隆并测序,将测序正确的重组质粒转化入BL21(DE3)感受态细菌,用异丙基-β-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白;用Ni-NTA柱纯化重组蛋白,并建立酶反应体系,通过NADH(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)的变化测定重组蛋白EgFBPA的酶催化活性。结果 EgFBPA基因全长1 092bp,编码363个氨基酸,软件分析其等电点(pI)为8.34,分子质量单位为39.8035ku。亚细胞定位分析该蛋白为无信号肽的细胞质蛋白,属于稳定蛋白;结构域和保守功能域的预测,FBPAI的激活位点为VYLEGTLLKPN(222aa-232aa),并含有TIMβ/α筒状结构(6aa-346aa),二级结构以α-螺旋和环状结构居多,无跨膜区,有10种类型的活性位点。经PCR、双酶切和测序证实pET30a(+)-EgFBPA构建成功。SDS-PAGE检测重组质粒表达产物分子质量与预期相符,且具有可溶性;Bradford法测定蛋白浓度为(0.50±0.02)mg/ml。酶活性检测Ni-NTA柱纯化后的FBPA具有良好的酶促活性,且存在量效关系。结论生物信息学预测EgFBPA可能是潜在的药物靶点。重组质粒Pet30a(+)-FBPA在大肠埃希菌BL21中成功表达,表达产物具有酶促活性,为进一步研究其生物学功能及药物靶点奠定了基础。 王绚 吴巨龙 吕刚 苏娟 辛奇 鲁俊 张思 王猛 孙萃平 逯召莲 何黎黎 景涛关键词:细粒棘球绦虫 蛋白纯化 分子克隆 生物信息学 一种萘酰亚胺修饰的罗丹明B衍生物及其制备和应用 本发明涉及荧光法对金属离子的检测,具体讲是一种萘酰亚胺修饰的罗丹明B衍生物1基于荧光共振能量转移(Fluorescence Resonance Energy Transfer,FRET)机理对铜离子(II)的识别。该衍生... 张军 于春伟 钱士匀 吕刚胶体金层析法检测恶性疟原虫HRPII抗原的应用研究 被引量:3 2000年 目的 :建立一种简易快速 ,适于基层或流行病学调查的自测式胶体金免疫层析法 (GICA)用于检测恶性疟原虫中 H RPII抗原 ,判定是否现症感染。方法 :用 GICA测试条检测全血及滤纸血样中的 H RPII抗原。结果 :40例恶性疟全血及滤纸血 H RPII抗原阳性检出率均为 1 0 0 ,与镜检结果相符合 ;2 5例间日疟均为阴性。结论 :GICA检测血中恶性疟原虫 H RPII抗原特异性强、灵敏度高、简便快速 ,无需特殊仪器设备 ,滤纸血的应用使样本的采集、保存和运输更为便利 ,适合大规模流行病学调查和基层使用 ,有广泛应用价值。 吕刚 谢协驹 余新柄 陆家海 林琼莲 莫燕娜关键词:恶性疟原虫 胶体金层析法 曼氏迭宫绦虫线粒体载体蛋白结构和功能的生物信息学分析 被引量:3 2013年 目的应用生物信息学技术预测曼氏迭宫绦虫线粒体载体蛋白超家族的结构和功能,为进一步研究曼氏迭宫绦虫的蛋白质提供理论依据。方法将测得的曼氏迭宫绦虫成虫EST序列用ORF finder获取开放读码框,Blast进行分析其结构域。应用分析工具Protparam、InterProScan、protscale、SignalP-3.0、PSORTⅡ、BepiPred、TMHMM、VectorNTI Suite 9软件包、Phyre2分别进行该蛋白质的基本性质、结构域、疏水性、信号肽、亚细胞定位、抗原表位、跨膜区及空间结构的预测及分析。结果 Blast预测该蛋白质为线粒体载体蛋白超家族,保守功能域为线粒体二羧酸载体,含294个氨基酸残基,理论分子量为32132.2Da。与曼氏血吸虫进化地位最接近;有1个信号肽位点和6个潜在的抗原表位。结论曼氏迭宫绦虫线粒体二羧酸载体能够介导苹果酸、琥珀酸等二羧酸的转运,使其跨越线粒体膜参与三羧酸循环,为虫体自身提供能量,可能是潜在的疫苗候选分子及药物作用靶点。 芦亚君 史大中 钟赛凤 甘秀凤 吕刚关键词:曼氏迭宫绦虫 生物信息学分析 河岸渗滤对不同工艺再生水补给景观水的处理功效 2013年 分别采用"二级出水+O3+GFH"和"二级出水+DNBF"两种不同工艺再生水补给人工湖,河岸渗滤(简称BF)作为净化再生水补给人工湖后的维护工艺,分析BF对人工湖中污染物的去除机制。结果表明:以"二级出水+O3+GFH"工艺出水作为人工湖补水,BF对NH4+-N、NO2--N、DOC的去除效率分别为85.1%、52.0%、22.5%。以"二级出水+DNBF"工艺出水作为人工湖补水,BF对NH4+-N、NO2--N、DOC的去除效率分别为64.4%、62.0%、26.4%。人工湖NH4+-N越高,水体中充分富氧,BF砂坝内硝化作用越强,BF对NH4+-N的去除率越高,可有效抑制蓝藻的暴发。 李娜 季玉祥 张军 吕刚 唐天乐关键词:再生水 景观水 硝化作用