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霍乱毒素B亚单位和旋毛虫幼虫抗原诱导黏膜免疫结果分析被引量：2: 2005年; 目的探讨黏膜佐剂霍乱毒素B 亚单位（CT-B ）在激发旋毛虫感染的黏膜免疫中的作用。方法24只NI H 小鼠随机分为4 组，每组6 只。CT-B 免疫组：每只小鼠于0 、7 、14 d 用含幼虫抗原100 μg 、C T-B 10 μg 的免疫原200 μl 经口灌服；正常对照组；免疫后感染组：免疫方法同CT-B 免疫组，末次免疫后第7 天，每只小鼠用200 条旋毛虫进行感染；单纯感染组：不免疫，与免疫后感染组同时进行感染。CT 蛳B 免疫组与正常对照组在免疫后第7 天、免疫后感染组与单纯感染组在感染后第7 天分别取血检测Ig A 、Ig G 1 、Ig G 2 b ，刮取肠黏液检测sIgA ，检测肠道成虫数，并收集每鼠雌虫，在体外检查其生殖力。结果与单纯感染组相比，CT-B 免疫后感染组肠道成虫数明显减少，雌虫生殖力明显降低，成虫与新生幼虫减虫率分别为88.2%和72.4%。CT-B 免疫组小鼠肠黏液sIg A 、血清Ig A 较对照组小鼠明显提高(0 .2 9 ±0 .04 vs 0.09 ±0.02，0.21 ±0.06 vs 0.08 ±0.01，P <0.001)；而两组Ig G 1 和Ig G 2 b 水平无显著性差异(P>0.05)。CT-B 免疫后感染组小鼠肠黏液sIg A 、血清Ig A 较单纯感染组小鼠相比有显著性差异(0 .5 5 ±0 .28 vs0.08 ±0.15，0.33 ±0.06 vs 0.10 ±0.10，P <0.001)。; 田小军薛燕萍黄敏君; 关键词：霍乱毒素B亚单位黏膜免疫

弓形虫分泌蛋白ROP5的全基因原核重组表达与抗原性鉴定: 2014年; 目的在大肠杆菌工程菌中重组表达刚地弓形虫RH株棒状体蛋白5(ROP5)的融合蛋白GST-6×His-ROP5,并初步评价重组蛋白的抗原性。方法体外细胞培养弓形虫速殖子,提取总RNA,反转录获得cDNA,PCR扩增ROP5基因全长,与pET-41 Ek/LIC载体通过基因重组直接连接,在大肠杆菌RosettaTM(DE3)pLysS工程菌中诱导表达重组融合蛋白,最后通过Western blotting鉴定重组蛋白rROP5的抗原性。结果构建了弓形虫ROP5全基因重组表达质粒,诱导表达了GST-6×His-ROP5融合蛋白,分子量为96 kDa,与预测结果相符,重组蛋白与人源抗血清有显著免疫印迹反应。结论本研究获得了弓形虫ROP5全长重组蛋白,为进一步改进弓形虫诊断抗原,研究蛋白结构以及分泌蛋白与宿主细胞的相互作用奠定了基础。; 薛峰黄敏君洪彩玲杨英超甘绍伯谷俊朝; 关键词：刚地弓形虫抗原性

刚地弓形虫致密颗粒蛋白GRA2全基因的原核重组表达被引量：3: 2013年; 目的克隆弓形虫RH株致密颗粒蛋白2(GRA2)的全长基因,在大肠埃希菌工程菌中重组表达GST-HisGRA2融合蛋白。方法提取弓形虫总RNA,反转录获得cDNA,PCR扩增GRA2基因全长,与pET-41Ek/LIC载体通过基因重组直接连接,在大肠埃希菌RosettaTM(DE3)pLysS工程菌中诱导表达重组融合蛋白,然后采用SDS-PAGE和Western blot鉴定重组蛋白产物。结果 PCR鉴定弓形虫GRA2全基因重组表达质粒构建正确;诱导表达的GSTHis-GRA2融合重组蛋白分子质量单位为52ku,与预测值相符。结论本研究成功构建了弓形虫GRA2全基因重组蛋白质粒,该质粒能表达GRA2蛋白,为研究GRA2与宿主细胞的相互作用奠定了基础。; 黄敏君薛峰洪彩玲孙岚甘绍伯谷俊朝; 关键词：刚地弓形虫原核表达

70株志贺菌属血清分型及耐药分析被引量：7: 2007年; 目的分析医院细菌性痢疾的流行菌株类型及耐药特点。方法对医院肠道门诊腹泻患者的粪便标本进行细菌分离培养、鉴定和血清分型,并以K-B琼脂法进行药敏实验。结果在检出的70株志贺菌属中,弗氏志贺菌37株、宋内志贺菌33株,未分离出志贺菌属的其他型别;70例菌株对传统抗菌药物中的四环素、复方新诺明、氨苄西林、利福平、萘啶酸的耐药率均>62%,对喹诺酮类的常用药诺氟沙星耐药率较低为12.8%,而头孢类的耐药率<10%。结论医院细菌性痢疾流行株主要是弗氏志贺菌和宋内志贺菌,多重耐药率较高,达到77.1%,临床治疗可首选头孢菌素类药物,庆大霉素和诺氟沙星次之。; 李威栗绍刚郑晓燕黄敏君温艳阴赪宏; 关键词：志贺菌属血清分型耐药性

钩端螺旋体聚Beta羟基丁酸(PHB)生物合成途径分析被引量：2: 2013年; 【目的】致病型问号钩端螺旋体(问号钩体,Leptospira interrogans)和腐生型双曲钩体(L.biflexa)能够大量合成菌体内贮藏物,这可能是钩体在营养贫瘠环境中长时间存活的主要原因之一。本研究对钩体聚Beta羟基丁酸(PHB)贮藏物进行定性定量测定,通过基因组分析补充定义PHB合成主要功能基因,并采用分子生物学方法初步证明PHB合成途径的完整性,为进一步研究PHB合成与钩体抗逆能力的关系奠定基础。【方法】采用脂类特异性尼罗红染色法和浓硫酸氧化-紫外分光光度计测定法,对问号钩体和双曲钩体的PHB贮藏物进行定性定量测定;采用生物信息学方法(BLAST和InterProscan/InterPro2Go),通过同源性分析和功能结构域搜索寻找钩体基因组中的PHB合成相关基因;最后采用克隆测序和定量RT-PCR技术检测相关基因表达情况,初步验证生物信息学预测结果。【结果】尼罗红染色和氧化后比色定量实验证明钩体合成细菌常见贮藏物PHB,问号钩体合成量为菌体干重的42%45%,双曲钩体合成量为64%68%。尽管已公布的多个钩体基因组中均没有定义完整的PHB合成途径,但本研究通过综合生物信息学分析,在问号钩体和双曲钩体中鉴定了PHB合成途径的主要功能基因(phbC)。克隆测序和定量RT-PCR证实钩体转录表达大部分PHB合成相关基因(phbA/B/C),说明钩体内该生物途径基本完整,且部分高水平表达基因可能是钩体主要的PHB合成相关基因。【结论】问号钩体和双曲钩体均可合成PHB贮藏物,且具有基本完整的PHB合成生物途径。; 薛峰刘媛洪彩玲孙岚辛德莉温艳黄敏君谷俊朝; 关键词：钩端螺旋体抗逆能力

小鼠急性日本血吸虫病肝脏肉芽肿动态及脾细胞IL-4 mRNA水平的相应变化: 1997年; 本研究观察了小鼠急性日本血吸虫病肝脏肉芽肿的动态改变及在ConA或SEA体外诱导下小鼠脾细胞IL－4mRNA水平的相应变化。实验结果显示SEA刺激下牌细胞IL－4mRNA的动态变化与肝脏内芽肿的形成、发展及调节过程密切相关。在血吸虫成虫排卵前，无论ConA或SEA均不能诱导IL－4mRNA的转录。在感染后5周，肝脏肉芽肿开始出现．此时用RT－PCR法可以检测到IL－4mRNA的特异条带。感染后8周，肉芽肿炎症反应达高峰，SEA诱导的IL-4mRNA转录水平同时增高。感染10周以后，肉芽肿体积逐渐缩小，IL－4mRNA特异条带也同时消失。提示IL-4可能在肉芽肿的形成及调节过程中起重要作用。; 胡永秀薛燕萍田小军黄敏君; 关键词：日本血吸虫肉芽肿脾细胞

肺孢子菌肺炎药物治疗策略及新药靶点研究进展被引量：5: 2014年; 肺孢子菌肺炎(Pneumocystis pneumonia,PCP)是免疫功能低下患者严重的机会性感染疾病。目前临床治疗肺孢子菌肺炎常用的一线、二线药物因副作用及特定人群耐受力差等原因而应用受限,亟需开发新药并寻找新的治疗方法以改善PCP患者的预后。本文综述了近些年PCP的药物治疗策略及新的药物靶点研究进展,包括抗真菌药物、免疫调节剂的潜在应用等,以期为PCP的临床治疗提供新的参考。; 孙岚黄敏君郭增柱; 关键词：肺孢子菌肺炎抗真菌药物免疫调节剂药物靶点

从大鼠肺灌洗液中分离纯化培养卡氏肺孢子虫被引量：3: 2007年; 目的建立卡氏肺孢子虫(Pneumocystis carinii,P．c)纯培养株。方法从肺孢子虫肺炎(PCP)大鼠模型离体肺脏的灌洗液中分离P.c,用改良IMDM培养基进行体外培养;以四胺银染色计数法观察虫体增殖情况;用PCR扩增培养物中P．c线粒体大亚基rRNA基因,进行基因鉴定;用透射电镜观察培养虫体的超微结构。结果用添加s-腺苷甲硫氨酸(SAM)等辅助剂的IMDM培养基从8只PCP大鼠的肺灌洗液中分离出5个Pc纯培养株(P.c Rat1-5)。分离培养的P.c可进行冷冻保存和复苏培养。培养72 h的P.c包囊可增殖19～22倍。形态、超微结构及基因序列分析证实从大鼠肺灌洗液中分离出的培养物是大鼠源性肺孢子虫。结论从大鼠肺灌洗液中分离培养出5株大鼠源卡氏肺孢子虫。; 黄敏君安亦军李淑珍卢思奇郭增柱; 关键词：卡氏肺孢子虫分离株

隐孢子虫及圆孢子虫感染致慢性腹泻与低蛋白血症一例被引量：2: 2005年; 曾慧慧黄敏君孟繁英安亦军; 关键词：低蛋白血症慢性腹泻隐孢子虫双眼睑水肿家族遗传病尿蛋白阴性

钩虫病致上消化道出血1例被引量：5: 2011年; 本文回顾了1例钩虫病致上消化道出血病例被误诊误治的情况,分析了误诊原因,旨在加深临床医师对钩虫病流行病学及临床表现的认识,提高诊治水平。; 黄敏君孙岚郭增柱; 关键词：钩虫病上消化道出血

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黄敏君

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