田兆丰
- 作品数：53 被引量：282H指数：10
- 供职机构：北京市农林科学院植物保护环境保护研究所更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家科技支撑计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学化学工程天文地球更多>>
- 拟南芥中柯浩体蛋白Atcoilin的克隆、表达及纯化
- 2012年
- 旨在制备柯浩体的标志蛋白——Atcoilin蛋白,利用pET-28a与目的基因构建重组表达质粒,经DNA测序证实插入序列与设计完全一致后,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,产物用SDS-PAGE及Western blotting分析鉴定。通过分别改变IPTG的浓度、培养时间、培养温度等来优化Atcoilin蛋白的表达条件。表达出的重组蛋白经过镍柱、分子筛进行纯化。结果显示,原核表达载体pET28a-At1g13030成功构建,可在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,得到相应的重组蛋白经Western blotting鉴定正确。在IPTG浓度为0.7 mmol/L,18℃培养20 h的条件下,目的蛋白表达量最高。经过SDS-PAGE分析鉴定,过镍柱、分子筛后得到的重组蛋白纯度较高。
- 张静田兆丰朱文壮张飞云
- 关键词：纯化标志蛋白
- 6种光稳定剂对那他霉素抗光解的影响被引量：6
- 2011年
- [目的]那他霉素作为抗真菌剂具有广谱、高效、安全、不易获得抗性的优点,但其在紫外光下容易降解的弱点限制了它在田间的应用,通过添加光稳定剂可提高它的光稳定性。[方法]以水为药剂和光稳定剂的载体,采用抑菌圈法和盆栽法测定光稳定剂对药剂稳定性的影响。[结果]紫外吸收剂UV-234、UV-531、UV-1164和光屏蔽剂SiO2有抑制那他霉素光解的作用,其中紫外吸收剂的效果优于SiO2,在一定时间内可显著抑制光解;自由基捕获剂T-123和抗氧剂1010没有任何作用;30 mg/L那他霉素分别与3种紫外吸收剂(3 g/L)混用防治番茄灰霉病的效果可达72.9%～78.1%,而单用30 g/L那他霉素的防效仅为35.2%。[结论]适宜的紫外吸收剂可显著提高那他霉素的光稳定性,提高防治番茄灰霉病的效果。
- 卢向阳刘伟成卢彩鸽杨剑芳田兆丰刘霆董丹张涛涛
- 关键词：那他霉素光分解光稳定剂番茄灰霉病
- 桃蚜乙酰胆碱酯酶基因克隆及我国多地区桃蚜S431F突变频率检测被引量：2
- 2018年
- 克隆我国桃蚜乙酰胆碱酯酶基因(ace1、ace2)cDNA。我国桃蚜ace1经与NCBI(Gen Bank:AF287291.1)比对未发现氨基酸替换,ace2基因经c DNA末端快速克隆技术得到全长(NCBI已注册的ace2 GenBank:AY147797.1缺失3'端182 bp),ace2全长为2 022 bp,编码674个氨基酸,序列已提交NCBI(GeneBank:KJ561353)。与NCBI(Gen Bank:AY147797.1)比对发现,我国桃蚜ace2除已报道的与桃蚜抗药性有关的S431F突变(氨基酸序列431位丝氨酸变为苯丙氨酸)外,在氨基酸序列55位处发现亮氨酸突变为丝氨酸(L55S)。利用突变检测技术,对2015、2016年采自我国河北、辽宁、江苏、青海等多个地区的桃蚜种群单头乙酰胆碱酯酶基因突变(S431F)频率进行检测。结果表明,2015、2016年各种群桃蚜单头乙酰胆碱酯酶基因突变(S431F)频率均大于85%,均已处于高水平突变,突变频率与生物测定抗性水平趋势一致。
- 刘晓岚田兆丰李永丹
- 关键词：桃蚜乙酰胆碱酯酶基因克隆CDNA
- 紫茎泽兰多糖诱导烟草对烟草花叶病毒的抗性被引量：4
- 2015年
- 在紫茎泽兰(Eupatorium adenophrum)中提取紫茎泽兰多糖(EAP),用EAP、烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)对幼苗长至8叶期时(第七叶完全展开)的三生烟(Nicotiana tabacum cv.Samsun NN)进行抗性试验处理,分析EAP对TMV侵染烟草叶片的预防作用、EAP对系统宿主防御性酶活影响、EAP诱导病程相关基因在烟草叶中的表达,探讨EAP对烟草植株抗TMV的诱导作用。结果表明:EAP对TMV侵染有良好的预防作用,当EPA质量分数为10%时,预防效果最佳(为82.79%);EAP可以通过调节植物防御系统,减弱TMV对烟草的损害。EAP处理过的烟草植株多酚氧化酶(PPO)酶活在第4天达到最高,是水处理组的3.54倍;过氧化物酶(POD)酶活在第3天达到最高,是水处理组的1.59倍;超氧化物歧化酶(SOD)酶活第2天达到最高,是水处理组的2.69倍;说明EAP可以有效的诱导寄主产生防御性酶,以抵抗植物病毒侵染。EAP能够诱导酸性PR蛋白PR-1α、PR-3、PR-5在烟草叶中表达,PR-1α、PR-3、PR-5都在EAP处理后5 d达到最高峰,PR-1α是水处理组及阴性对照组的5.27、12.06倍;PR-3是水处理组及阴性对照组的7.93、26.31倍;PR-5是水处理组及阴性对照组的5.60、8.09倍;提高了病程相关基因PR-1α、PR-3、PR-5的表达。
- 厚凌宇田兆丰谢响明
- 关键词：烟草烟草花叶病毒诱导抗性
- 不同番茄品种对番茄黄化曲叶病毒的抗病性分析被引量：8
- 2016年
- 【目的】番茄黄化曲叶病毒病(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)是一种影响全世界番茄生产的病害,培育抗病品种是最有效、经济和持久的防控手段。目前生产上应用的抗病品种繁多,但存在对TYLVC不同抗性基因的抗性水平研究甚少、了解不够全面的问题。为了解带有不同抗性基因的番茄品种对番茄黄化曲叶病毒病的抗性,对北京市农林科学院蔬菜中心培育的番茄品种抗病性进行检测,并利用半定量RT-PCR方法分析抗病基因和抗病蛋白的表达水平。【方法】选取携带有Ty3a/Ty3a的番茄材料秋光285(Ty3a纯合)、棚137×246(Ty3a杂合),携带Ty1+Ty3a纯合的秋光120、携带Ty1+Ty3a杂合的秋光81和感病对照M82为试验材料,观察番茄植株自然条件下发病情况。通过调查发病率和病情指数,考查这些番茄品种的抗病性,并利用RT-PCR方法分析抗病基因Ty1和Ty3a以及病程相关蛋白葡聚糖酶和几丁质酶基因的表达水平。【结果】携带抗性基因的杂合体、纯合体抗病性差异不明显,含有两个抗性基因和含有单一抗病基因品种的抗病性稍有差异,但差异不显著。半定量RT-PCR结果显示不同番茄品种在感染TYLCV后,体内抗性基因表达量随着发病时间的增加,Ty-3a和Ty-1的表达量逐渐增强。Ty-3a在4个番茄品种中表达水平由弱到强依次为秋光285(Ty-3a纯合)、棚137×246(Ty-3a杂合)、秋光120(Ty-1+Ty-3a纯合)和秋光81(Ty-1+Ty-3a杂合),Ty-1在秋光81中的表达显著高于在秋光120中的表达。同时,植株体内葡聚糖酶和几丁质酶基因表达量均比对照显著增加,并随着发病时间的增加逐渐增强。在发病20 d和30 d后,携带Ty-1+Ty-3a杂合的秋光81的葡聚糖酶基因表达显著强于其他几个品种。【结论】几个番茄材料对TYLCV的抗性由弱到强依次为秋光285(Ty3a纯合)、棚137×246(Ty3a杂合)、秋光120(Ty1+Ty3a纯合)和秋光81(Ty1+Ty3a杂合)。不同番茄抗病品种感染T
- 田兆丰刘伟成厚凌宇谢华罗晨柴敏
- 关键词：番茄黄化曲叶病毒抗病基因病程相关蛋白半定量RT-PCR
- 黄赭色链霉菌11F发酵工艺及其对黄瓜幼苗生长的影响被引量：10
- 2020年
- 为了深入研究黄赭色链霉菌对黄瓜生长及黄瓜枯萎病的防治效果,采用固体发酵单因素方差分析对菌株11F的固体发酵条件(种龄、配水比、接种量、发酵基质)进行优化,通过检测存活率测定在不同条件处理下菌剂链霉菌孢子对菌剂耐热力与抗紫外作用进行了分析,通过温室盆栽实验研究菌株11F菌剂对黄瓜生长的影响及对黄瓜枯萎病的防治效果。结果表明:最佳固体发酵基质配比为80%大米+10%麦麸,最佳料比水为1∶0.3,最佳种龄为60 h,最佳接种量为10%。通过筛选得到菌剂最适载体是壳聚糖,温室盆栽实验显示菌株11F的发酵液与固体菌剂对黄瓜的生长都有促生作用。菌剂11F与蛭石的比例为1∶100时黄瓜幼苗的株高、根长、鲜重、干重都显著高于其他处理,株高增加39%,根长增加了33.9%,鲜重增加了35.3%,干重增加了40.9%,其长势茂盛,叶色浓绿,促生效果明显。菌剂11F对黄瓜枯萎有明显的防治效果,防效为73.45%,由此说明菌株11F菌剂可用于黄瓜枯萎的防治。
- 张涛涛张虹赵娟田兆丰吴慧玲
- 关键词：链霉菌黄瓜枯萎病促生防效
- 多花黑麦草斑驳病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达
- 根据已报道的多花黑麦草斑驳病毒(RMotV)外壳蛋白(CP)基因的核苷酸序列合成引物,用RT-PCR的方法获得外壳蛋白基因后,再将其克隆至pGEX-4T-1中,SDS-PAGE和斑点杂交(Dot-blotting)表明:...
- 张海龙田兆丰董志张晏如张飞云
- 关键词：外壳蛋白原核表达包涵体
- 文献传递
- 菇类栽培废料浸提液对蔬菜病毒病的防治
- 2011年
- 采用菇类栽培废料浸提物喷施蔬菜幼苗,可以有效地提高幼苗的抗病力。研究表明,浸提物对烟草花叶病毒病有显著的预防作用,同时对真菌病害如灰霉病等也有很好的防治效果。
- 田兆丰刘伟成
- 关键词：浸提物
- 球孢白僵菌与两种昆虫生长调节剂对甜菜夜蛾的联合作用被引量：10
- 2015年
- 本文研究了球孢白僵菌与昆虫生长调节剂甲氧虫酰肼及氟铃脲对甜菜夜蛾幼虫的联合毒力,结果表明两种昆虫生长调节剂和白僵菌混用增效作用明显。昆虫生长调节剂(浓度均为致死中浓度,甲氧酰肼25×10-6 g/L,氟铃脲1000×10-6 g/L与球孢白僵菌8.0×107孢子/m L混合使用,体积比4:1时效果最佳,共毒系数甲氧虫酰肼与白僵菌为285,氟铃脲与白僵菌为208。死虫保湿后,95%长出了白僵菌菌丝,甚至可产生孢子;采用扫描电镜对昆虫体壁纵切面进行观察,各处理组甜菜夜蛾幼虫体壁有明显不同。
- 胡安岭田兆丰高希武农向群李永丹
- 关键词：昆虫生长调节剂球孢白僵菌甜菜夜蛾联合毒力
- 小麦黄色花叶病毒(WYMV)禾谷多粘菌(polymyxa graminis )传播体系的建立
- 田兆丰
- 关键词：禾谷多粘菌侵染特性小麦黄色花叶病毒
