- 检测E种肠道病毒的免疫荧光试剂及其检测试剂盒
- 本发明公开了检测E种肠道病毒的免疫荧光试剂及其检测试剂盒，是应用本发明的检测E种肠道病毒的免疫荧光试剂，试剂建立的直接免疫荧光检测方法，既可用于临床快速诊断E种肠道病毒感染，也可用于E种肠道病毒抗原在组织中的定位与鉴定。...
- 王新平邢泽黎朱利塞郭昌明刘丹盖小春张群袁悦刘亚静王方
- 文献传递
- G种肠道病毒诊断抗原及其试剂盒
- 本发明公开了一种G种肠道病毒基因VP1，它的碱基序列如序列表SEQ ID NO.1所示，表达的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.2所示的蛋白VP1，作为包被抗原制备的一种用于检测动物血清中G种肠道病毒抗体的间接 EL...
- 王新平鲁海冰王明月郭昌明刘亚静张群朱利塞王芳
- G种肠道病毒检测抗体双夹心ELISA检测试剂盒
- 本发明公开了检测G种肠道病毒病原的双抗体夹心ELISA试剂盒，它采用其碱基序列如序列表SEQ ID NO.1所示的VP1基因，表达的VP1蛋白，免疫BALB/C小鼠后制备的单克隆抗体为捕获抗体，免疫成年健康家兔后制备的多...
- 王新平鲁海冰王明月朱利塞郭昌明刘亚静张群王芳
- 文献传递
- G种肠道病毒直接免疫荧光试剂及其试剂盒
- 本发明公开了检测G种肠道病毒的免疫荧光试剂及其检测试剂盒，是用荧光染料也可标记的VP1单克隆抗体，所述的VP1单克隆抗体，是利用G种肠道病毒的VP1蛋白，采用杂交瘤单抗制备技术获得；所述的VP1蛋白的氨基酸序列如序列表S...
- 王新平鲁海冰郭昌明王明月刘亚静张群朱利塞王芳
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- G种肠道病毒诊断抗原及其试剂盒
- 本发明公开了一种G种肠道病毒基因VP1，它的碱基序列如序列表SEQ ID NO.1所示，表达的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.2所示的蛋白VP1，作为包被抗原制备的一种用于检测动物血清中G种肠道病毒抗体的间接ELI...
- 王新平鲁海冰王明月郭昌明刘亚静张群朱利塞王芳
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- G种肠道病毒检测抗体双夹心ELISA检测试剂盒
- 本发明公开了检测G种肠道病毒病原的双抗体夹心ELISA试剂盒，它采用其碱基序列如序列表SEQ ID NO.1所示的VP1基因，表达的VP1蛋白，免疫BALB/C小鼠后制备的单克隆抗体为捕获抗体，免疫成年健康家兔后制备的多...
- 王新平鲁海冰王明月朱利塞郭昌明刘亚静张群王芳
- G种肠道病毒直接免疫荧光试剂及其试剂盒
- 本发明公开了检测G种肠道病毒的免疫荧光试剂及其检测试剂盒，是用荧光染料也可标记的VP1单克隆抗体，所述的VP1单克隆抗体，是利用G种肠道病毒的VP1蛋白，采用杂交瘤单抗制备技术获得；所述的VP1蛋白的氨基酸序列如序列表S...
- 王新平鲁海冰郭昌明王明月刘亚静张群朱利塞王芳
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- 羊肠道病毒单克隆抗体的制备及鉴定被引量：7
- 2017年
- 根据本实验室分离的国内首株羊肠道病毒CEV-JL14的核苷酸基因组序列,设计并合成了羊肠道病毒VP1基因的引物,并应用RT-PCR扩增了VP1基因片段。扩增的VP1基因片段克隆到原核表达载体pGEX-4T-1的EcoRⅠ/BamHⅠ的酶切位点。重组质粒经酶切鉴定和序列测定正确后,转化到BL21,并以IPTG诱导表达了VP1重组蛋白。重组蛋白纯化后以弗氏完全佐剂乳化,按一定的程序免疫BALB/c小鼠,加强免疫3次后,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,经过3次亚克隆获得了5株表达VP1单克隆抗体的杂交瘤细胞株。以ELISA对杂交瘤分泌的IgG亚类进行了鉴定,结果4株为IgG1亚类,1株为IgG2b。以免疫酶单层细胞技术鉴定了单克隆抗体,结果显示,获得的单克隆抗体可以特异性检出羊肠道病毒抗原。本试验在国内首次获得了抗羊肠道病毒的单克隆抗体,将为羊肠道病毒的致病机理、诊断及流行病学研究奠定基础。
- 鲁海冰王明月朱利塞刘亚静郭昌明张群袁悦涂长春王新平
- 关键词：单克隆抗体
- 检测E种肠道病毒病原的双抗体夹心ELISA试剂盒
- 本发明公开了检测E种肠道病毒病原的双抗体夹心ELISA试剂盒，它采用其碱基序列如序列表SEQ？ID？NO.1所示的<i>VP1</i>基因，表达的VP1蛋白，免疫BALB/C小鼠后制备的多克隆抗体...
- 王新平邢泽黎朱利塞郭昌明盖小春王明月鲁海冰曹玉峰刘亚静张群
- 文献传递
- 双抗体夹心ELISA检测小反刍兽疫病毒抗原方法的建立及病原流行病学调查被引量：13
- 2017年
- 应用表达纯化的小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)N蛋白制备的多克隆抗体,建立了检测PPRV抗原的双抗体夹心ELISA方法,并对吉林省和内蒙古地区羊群感染PPRV进行了调查。方阵法确定了抗PPRV兔源IgG作为捕获抗体的包被量为0.2μg,酶标抗体的最佳稀释度为1∶1 000。对大量小反刍兽疫阴性粪便样品进行检测及统计学处理,确定了双抗体夹心ELISA检测PPRV的判定标准,即被检粪便样品D490≥0.221,判定为阳性。特异性、敏感性等试验结果表明,建立的检测PPRV抗原方法具有特异、敏感和快速等优点。与RT-PCR方法相比,该方法省时省力、简单快速。应用建立的检测PPRV抗原的双抗体夹心ELISA对吉林省和内蒙古不同地区的羊粪样进行检测,发现羊群均存在程度不同的PPRV隐性感染。本研究在国内首次揭示出临床健康羊群携带PPRV,为今后小反刍兽疫的诊断与防控提供了新的流行病学理论依据。
- 郭昌明张群刘亚静鲁海冰邢泽黎邓颖瑞朱利塞郭淳光王新平
- 关键词：PPRV小反刍兽疫双抗体夹心ELISA流行病学调查
