- 黄单胞杆菌纤维素酶的原核表达及固定化研究
- 2012年
- 从野油菜黄单胞杆菌(Xanthomonas campestris pv.Campestris)中PCR克隆得到删除信号肽的纤维素酶基因engXCAΔSP,并成功使用CPEC(circular polymerase extension cloning)方法构建了原核表达载体pET28a-engXCAΔSP;将该载体转入大肠杆菌rosetta(DE3)中,用IPTG诱导蛋白质的表达;通过Ni-NTA树脂非变性亲和纯化到了较纯的蛋白。SDS-PAGE电泳结果表明:engXCAΔSP基因编码出约50 kD的蛋白质ENGXCAΔSP。然后对该酶成功进行了固定化。该酶比活为60 U.mg-1,固定前后最适温度为53℃与62℃,最适pH为5.4与5.8,动力学常数分别为Vmax:411μmol.mL-1.h-1与383μmol.mL-1.h-1,Km:0.2500%与0.3125%。
- 王开胜梁如冰刘喜朋刘建华邵志峰
- 关键词：内切葡聚糖酶原核表达系统固定化酶
- 野油菜黄单胞杆菌纤维素酶基因原核表达及其固定化研究
- 纤维素（cellulose）是葡萄糖经β-1,4-糖苷键连接而成的不溶性的结晶多糖物质,每年估计合成4×10～7吨,因而是一种有潜力解决能源,化学,食品等短缺问题的可再生资源[1]。纤维素酶（cellulases）是一类...
- 王开胜
- 关键词：黄单胞杆菌纤维素酶固定化酶
- 文献传递
