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宰文欣
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1
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供职机构:
江汉大学医学院
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
易路阳
江汉大学医学院
郭凯文
武汉科技大学医学院
钟伟
江汉大学医学院
邱文洪
江汉大学医学院
艾永循
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重组人半乳糖苷结合凝集素-9质粒的构建及表达
2012年
目的构建人半乳糖苷结合凝集素-9(Galectin-9)的真核表达质粒pGalectin-9,并检测其表达。方法通过DNA重组技术和PCR方法从人外周血单个核细胞克隆Galectin-9基因,插入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,通过PCR、酶切及测序鉴定重组载体的正确性;采用脂质体转染技术将重组质粒pGalectin-9瞬时转染中国仓鼠卵巢(Chinesehamster ovary,CHO)细胞,通过Western blot、RT-PCR和间接免疫荧光方法检测Galectin-9的表达。结果 DNA测序和酶切鉴定证明Galectin-9基因正确克隆至pcDNA3.1(+)的多克隆位点;以重组质粒pGalectin-9瞬时转染CHO细胞,通过Western blot、RT-PCR和间接免疫荧光方法,在分子和细胞水平证实Galectin-9的表达。结论成功构建pGa-lectin-9的重组质粒,并证实其在CHO细胞中可以成功表达。
郭凯文
邱文洪
艾永循
钟伟
易路阳
宰文欣
关键词:
重组质粒
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